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烟草脉带花叶病毒、芜菁花叶病毒和马铃薯Y病毒的遗传结构分析

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-16页
第一章 引言第16-36页
 一、植物RNA 病毒的变异机制和群体遗传分析方法第16-28页
  1. 植物RNA 病毒变异机制第16-21页
   ·突变第16-17页
     ·突变率和突变频率第16-17页
     ·突变诱因第17页
   ·重组第17-21页
     ·RNA 病毒重组对病毒进化的影响第18-19页
     ·重组机制第19-21页
  2. 植物RNA 病毒群体遗传分析常用的三种方法第21-28页
   ·系统发生分析第22-25页
     ·距离法(Distance 或 Similarity)第22-23页
     ·简约法(Parsimony method)第23-24页
     ·目前常用软件第24-25页
   ·中性假说和多态性分析第25-28页
     ·中性检测第26页
     ·同义突变和非同义突变检测第26-27页
     ·遗传差异和基因交流第27-28页
     ·错配分布第28页
 二、TVBMV、TUMV 和PVY 种群变异研究进展第28-35页
  1. 烟草脉带花叶病毒(TVBMV)第29-30页
  2. 芜菁花叶病毒(TUMV)第30-32页
  3. 马铃薯Y 病毒(PVY)第32-35页
   ·马铃薯分离物第32-33页
   ·辣椒分离物第33-34页
   ·烟草分离物第34-35页
 三、本研究的目的意义第35-36页
第二章 烟草脉带花叶病毒中国分离物的遗传多样性和群体结构第36-68页
 1. 材料与方法第37-46页
   ·实验材料第37页
     ·毒原的保存第37页
     ·菌株和质粒第37页
     ·生化及分子生物学试剂第37页
     ·主要实验仪器第37页
     ·引物合成第37页
   ·实验方法第37-46页
     ·ELISA 检测第37-38页
     ·引物设计第38-39页
     ·植物总RNA 的提取第39页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第39-40页
     ·目的片段的回收第40-41页
     ·目的片段的连接第41页
     ·转化大肠杆菌感受态细胞DH5α第41-42页
     ·质粒的小量提取第42-43页
     ·重组质粒PCR 鉴定第43页
     ·序列测定与分析第43-46页
 2. 结果与分析第46-65页
   ·样品采集及检测第46-47页
   ·RT-PCR 扩增及测序第47-48页
   ·TVBMV 分离物的一致率分析第48-52页
   ·TVBMV 各基因片段系统进化分析和种群之间的遗传差异第52-59页
   ·TVBMV 连接序列系统进化分析第59页
   ·TVBMV 基因的遗传距离和选择压力分析第59-61页
   ·基因流和遗传差异的统计分析第61-62页
   ·种群基因的重组分析第62页
   ·中性检测种群多态性分析第62-65页
 3. 结论与讨论第65-68页
第三章 中国萝卜上芜菁花叶病毒的遗传结构第68-87页
 1. 材料与方法第70-72页
   ·实验材料第70-71页
     ·病毒样品采集第70页
     ·菌株、载体及生化试剂第70页
     ·引物合成第70-71页
   ·实验方法第71-72页
     ·植物总RNA 的提取第71页
     ·引物设计第71页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第71页
     ·PCR 产物回收第71页
     ·连接与转化第71页
     ·质粒的小量提取第71页
     ·重组质粒鉴定第71-72页
     ·序列分析第72页
 2. 结果与分析第72-85页
   ·TuMV 分离物采集及RT-PCR 结果第72-73页
   ·TuMV 基因序列测定与分析第73-76页
   ·TuMV 中国萝卜分离物的重组分析第76-78页
   ·利用萝卜上的TuMV 分离物构建系统进化树第78-80页
   ·中国和日本的basal-BR 分离物系统发生关系第80-82页
   ·中国萝卜上TuMV 分离物CP 基因选择压力第82页
   ·中国萝卜上TuMV 分离物的CP 和3′-UTR 基因遗传差异和基因漂流第82-85页
 3. 结论与讨论第85-87页
第四章 中国烟草上马铃薯Y 病毒遗传多样性第87-111页
 1. 材料和方法第89-94页
   ·实验材料第89页
     ·样品采集第89页
     ·菌株和质粒第89页
     ·生化及分子生物学试剂第89页
   ·实验方法第89-94页
     ·间接ELISA 检测第89页
     ·三抗夹心法第89-90页
     ·植物总RNA 提取第90-91页
     ·引物设计第91页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第91-92页
     ·目的片段的回收和连接第92页
     ·转化大肠杆菌感受态细胞DH5α第92页
     ·质粒DNA 提取第92-93页
     ·序列测定与分析第93-94页
 2. 结果与分析第94-109页
   ·样品采集与血清学检测第94-99页
   ·RT-PCR 扩增及测序第99页
   ·HC-Pro 和CP 编码区的重组第99-102页
   ·HC-Pro 和CP 编码区序列系统进化关系第102-105页
   ·选择方向和正向选择位点第105-107页
   ·序列多样性和种群多态性第107-109页
 3. 结论与讨论第109-111页
第五章 一株马铃薯X 病毒 1985 年马铃薯分离物的序列分析第111-120页
 1. 材料和方法第111-113页
   ·实验材料第111-112页
     ·病毒分离物第111-112页
     ·菌株和质粒第112页
   ·实验方法第112-113页
     ·寄主范围测定第112页
     ·引物设计第112页
     ·RNA 的提取及RT-PCR 扩增第112-113页
     ·目的片段回收与连接第113页
     ·目的片段的转化第113页
     ·质粒提取和鉴定第113页
     ·序列分析第113页
 2. 结果与分析第113-119页
   ·PVX-1985 分离物的生物学特性第113-114页
   ·PVX 分离物的基因组结构和分子变异第114页
   ·系统发生和核苷酸多样性分析第114-119页
 3. 结论与讨论第119-120页
全文结论第120-121页
参考文献第121-139页
致谢第139-140页
攻读博士期间发表论文情况第140页

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