| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-34页 |
| ·非水介质中的生物催化 | 第15-19页 |
| ·非水介质中酶和细胞催化的特点 | 第15-16页 |
| ·生物催化的非水介质 | 第16-18页 |
| ·水-有机溶剂双相体系 | 第16页 |
| ·有机溶剂体系 | 第16-17页 |
| ·无溶剂体系 | 第17页 |
| ·离子液体 | 第17页 |
| ·超临界流体和气体 | 第17-18页 |
| ·影响非水介质中生物催化的主要因素 | 第18-19页 |
| ·水分 | 第18页 |
| ·生物催化剂的培养过程 | 第18-19页 |
| ·溶剂 | 第19页 |
| ·非水相反应中的传质阻力 | 第19页 |
| ·脂肪酶生产技术及研究进展 | 第19-24页 |
| ·产脂肪酶微生物的来源 | 第19-20页 |
| ·用于酯合成反应之脂肪酶的微生物来源 | 第20-21页 |
| ·微生物脂肪酶的生产 | 第21-22页 |
| ·微生物脂肪酶的调节机制 | 第22-23页 |
| ·脂肪酶合成的调节 | 第22-23页 |
| ·脂肪酶活性的调节 | 第23页 |
| ·假单胞菌脂肪酶的研究进展 | 第23-24页 |
| ·假单胞菌脂肪酶的分类 | 第23页 |
| ·假单胞菌脂肪酶的应用 | 第23-24页 |
| ·酶促核苷酯类衍生物合成研究现状 | 第24-29页 |
| ·核苷类化合物的药理活性及其应用 | 第24-26页 |
| ·酶促核苷酯类衍生物合成的研究现状 | 第26-27页 |
| ·酶促阿糖胞苷衍酯类衍生物的合成 | 第27-29页 |
| ·阿糖胞苷及其酯类衍生物的药理活性 | 第27-28页 |
| ·阿糖胞苷酯类衍生物的酶法合成现状 | 第28-29页 |
| ·全细胞催化剂及其在酯合成反应中的应用 | 第29-31页 |
| ·全细胞催化剂与酶制剂的比较 | 第29-30页 |
| ·全细胞催化剂在酯合成反应中的应用 | 第30-31页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第31-34页 |
| 第二章 可催化阿糖胞苷区域选择性酰化反应菌种的筛选及反应产物的表征 | 第34-49页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·菌种 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·菌种培养方法 | 第36页 |
| ·全细胞催化剂制备方法 | 第36-37页 |
| ·生物量和pH值的测量 | 第37页 |
| ·不同种类微生物细胞促阿糖胞苷乙酰化反应 | 第37页 |
| ·反应初速度、产率、区域选择性的计算 | 第37页 |
| ·初速度V0值 | 第37页 |
| ·产率Yield(%) | 第37页 |
| ·区域选择性Regioselectivity(%) | 第37页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分析 | 第37-38页 |
| ·产物分离纯化 | 第38页 |
| ·产物结构鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-47页 |
| ·不同微生物全细胞在阿糖胞苷乙酰化反应中的催化行为 | 第39-43页 |
| ·不同微生物全细胞在阿糖胞苷乙酰化反应中的区域选择性 | 第43-47页 |
| ·薄层层析(TLC)分离结果 | 第44-45页 |
| ·反应产物的红外光谱及核磁共振波谱分析 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 培养条件对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应影响的研究 | 第49-67页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·菌种 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·菌种培养方法 | 第50页 |
| ·全细胞催化剂制备方法 | 第50页 |
| ·生物量和pH值的测量 | 第50页 |
| ·荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷乙酰化反应 | 第50-51页 |
| ·产率、区域选择性的计算 | 第51页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分析 | 第51页 |
| ·菌体生长曲线测定 | 第51页 |
| ·脂肪酶水解活力测定 | 第51-52页 |
| ·4 %聚乙烯醇(PVA)溶液、乳化液及酶液的配制 | 第51页 |
| ·三丁酸甘油酯法测定脂肪酶活力 | 第51-52页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第52页 |
| ·1 %酪蛋白溶液及酶液的配制 | 第52页 |
| ·标准曲线的制作 | 第52页 |
| ·样品蛋白酶活力测定 | 第52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-64页 |
| ·单一碳源或混合碳源对细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第52-56页 |
| ·氮源对细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第56页 |
| ·Mg2+浓度对细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第56-57页 |
| ·初始碳源/氮源浓度对荧光假单胞菌细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第57-60页 |
| ·培养时间对荧光假单胞菌细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第60-61页 |
| ·不同培养条件下荧光假单胞菌的生长曲线(OD550) | 第61-62页 |
| ·荧光假单胞菌产胞外酶与胞内酶关系初探 | 第62-64页 |
| ·蛋白酶水解酶活测定标准曲线 | 第62页 |
| ·培养时间对胞外脂肪酶/蛋白酶水解活力的影响 | 第62-64页 |
| ·荧光假单胞菌全细胞催化剂的脂肪酶/蛋白酶水解活力 | 第64页 |
| ·本章小结 | 第64-67页 |
| 第四章 反应条件对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应影响的研究 | 第67-92页 |
| ·实验材料 | 第68页 |
| ·菌种 | 第68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·主要仪器设备 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-72页 |
| ·菌种培养方法 | 第68页 |
| ·全细胞催化剂制备方法 | 第68页 |
| ·反应初速度、产率、区域选择性的计算 | 第68页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分析 | 第68页 |
| ·有机溶剂种类对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第68-69页 |
| ·含吡啶混合有机溶剂对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷区域选择性酰化反应的影响 | 第69页 |
| ·混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第69页 |
| ·不同pH缓冲液预处理全细胞对其促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第69-70页 |
| ·阿糖胞苷浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第70页 |
| ·全细胞催化剂用量对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第70页 |
| ·底物摩尔比对混合有机溶剂中荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第70-71页 |
| ·反应温度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第71页 |
| ·振荡速度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第71页 |
| ·不同反应介质中荧光假单胞菌细胞催化剂的热稳定性 | 第71页 |
| ·荧光假单胞菌全细胞催化剂的操作稳定性 | 第71-72页 |
| ·荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的放大 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-90页 |
| ·有机溶剂种类对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第72-73页 |
| ·含吡啶混合有机溶剂对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第73-75页 |
| ·混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第75-77页 |
| ·不同PH缓冲液预处理全细胞对其促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第77-78页 |
| ·阿糖胞苷浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第78-79页 |
| ·全细胞催化剂用量对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第79-81页 |
| ·底物摩尔比对混合有机溶剂中荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第81-83页 |
| ·反应温度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第83-86页 |
| ·振荡速度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第86-87页 |
| ·不同有机介质中荧光假单胞菌全细胞催化剂的热稳定性 | 第87-88页 |
| ·荧光假单胞菌全细胞催化剂的操作稳定性 | 第88-90页 |
| ·荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应放大的研究 | 第90页 |
| ·本章小结 | 第90-92页 |
| 第五章 米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的研究 | 第92-108页 |
| ·实验材料 | 第92-93页 |
| ·菌种 | 第92-93页 |
| ·主要试剂 | 第93页 |
| ·主要仪器设备 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-96页 |
| ·菌种培养方法 | 第93页 |
| ·全细胞催化剂制备方法 | 第93页 |
| ·反应初速度、产率、区域选择性的计算 | 第93-94页 |
| ·初速度V0值 | 第93页 |
| ·产率Yield(%) | 第93页 |
| ·区域选择性 3′-Regioselectivity(%) | 第93-94页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)分析 | 第94页 |
| ·有机溶剂种类对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第94页 |
| ·含吡啶混合有机溶剂对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第94页 |
| ·混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第94页 |
| ·底物摩尔比对混合有机溶剂中米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第94-95页 |
| ·催化剂用量对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第95页 |
| ·反应温度对米曲霉细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第95页 |
| ·振荡速度对米曲霉细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响 | 第95页 |
| ·不同反应介质中米曲霉细胞催化剂的热稳定性 | 第95-96页 |
| ·米曲霉全细胞催化剂的操作稳定性 | 第96页 |
| ·结果与讨论 | 第96-106页 |
| ·有机介质种类对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第96-97页 |
| ·混合有机溶剂中两组分配比对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第97-98页 |
| ·底物摩尔比对混合有机溶剂中米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第98-99页 |
| ·催化剂用量对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第99-100页 |
| ·反应温度对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第100-102页 |
| ·振荡速度对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响 | 第102-103页 |
| ·不同介质中米曲霉全细胞催化剂的热稳定性 | 第103-105页 |
| ·米曲霉全细胞催化剂的操作稳定性 | 第105-106页 |
| ·本章小结 | 第106-108页 |
| 结论与展望 | 第108-113页 |
| 参考文献 | 第113-127页 |
| 附录 1 HPLC色谱图 | 第127-131页 |
| 附录 2 核磁共振图谱 | 第131-134页 |
| 附录 3 缩写 | 第134-135页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 附件 | 第137页 |