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全细胞促阿糖胞苷区域选择性酯合成反应的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
目录第10-15页
第一章 绪论第15-34页
   ·非水介质中的生物催化第15-19页
     ·非水介质中酶和细胞催化的特点第15-16页
     ·生物催化的非水介质第16-18页
       ·水-有机溶剂双相体系第16页
       ·有机溶剂体系第16-17页
       ·无溶剂体系第17页
       ·离子液体第17页
       ·超临界流体和气体第17-18页
     ·影响非水介质中生物催化的主要因素第18-19页
       ·水分第18页
       ·生物催化剂的培养过程第18-19页
       ·溶剂第19页
       ·非水相反应中的传质阻力第19页
   ·脂肪酶生产技术及研究进展第19-24页
     ·产脂肪酶微生物的来源第19-20页
     ·用于酯合成反应之脂肪酶的微生物来源第20-21页
     ·微生物脂肪酶的生产第21-22页
     ·微生物脂肪酶的调节机制第22-23页
       ·脂肪酶合成的调节第22-23页
       ·脂肪酶活性的调节第23页
     ·假单胞菌脂肪酶的研究进展第23-24页
       ·假单胞菌脂肪酶的分类第23页
       ·假单胞菌脂肪酶的应用第23-24页
   ·酶促核苷酯类衍生物合成研究现状第24-29页
     ·核苷类化合物的药理活性及其应用第24-26页
     ·酶促核苷酯类衍生物合成的研究现状第26-27页
     ·酶促阿糖胞苷衍酯类衍生物的合成第27-29页
       ·阿糖胞苷及其酯类衍生物的药理活性第27-28页
       ·阿糖胞苷酯类衍生物的酶法合成现状第28-29页
   ·全细胞催化剂及其在酯合成反应中的应用第29-31页
     ·全细胞催化剂与酶制剂的比较第29-30页
     ·全细胞催化剂在酯合成反应中的应用第30-31页
   ·本研究的意义和主要内容第31-34页
第二章 可催化阿糖胞苷区域选择性酰化反应菌种的筛选及反应产物的表征第34-49页
   ·实验材料第35-36页
     ·菌种第35页
     ·主要试剂第35-36页
   ·主要仪器设备第36页
   ·实验方法第36-39页
     ·菌种培养方法第36页
     ·全细胞催化剂制备方法第36-37页
     ·生物量和pH值的测量第37页
     ·不同种类微生物细胞促阿糖胞苷乙酰化反应第37页
     ·反应初速度、产率、区域选择性的计算第37页
       ·初速度V0值第37页
       ·产率Yield(%)第37页
       ·区域选择性Regioselectivity(%)第37页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析第37-38页
     ·产物分离纯化第38页
     ·产物结构鉴定第38-39页
   ·结果与讨论第39-47页
     ·不同微生物全细胞在阿糖胞苷乙酰化反应中的催化行为第39-43页
     ·不同微生物全细胞在阿糖胞苷乙酰化反应中的区域选择性第43-47页
       ·薄层层析(TLC)分离结果第44-45页
       ·反应产物的红外光谱及核磁共振波谱分析第45-47页
   ·本章小结第47-49页
第三章 培养条件对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应影响的研究第49-67页
   ·实验材料第50页
     ·菌种第50页
     ·主要试剂第50页
   ·主要仪器设备第50页
   ·实验方法第50-52页
     ·菌种培养方法第50页
     ·全细胞催化剂制备方法第50页
     ·生物量和pH值的测量第50页
     ·荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷乙酰化反应第50-51页
     ·产率、区域选择性的计算第51页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析第51页
     ·菌体生长曲线测定第51页
     ·脂肪酶水解活力测定第51-52页
       ·4 %聚乙烯醇(PVA)溶液、乳化液及酶液的配制第51页
       ·三丁酸甘油酯法测定脂肪酶活力第51-52页
     ·蛋白酶活力测定第52页
       ·1 %酪蛋白溶液及酶液的配制第52页
       ·标准曲线的制作第52页
       ·样品蛋白酶活力测定第52页
   ·结果与讨论第52-64页
     ·单一碳源或混合碳源对细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第52-56页
     ·氮源对细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第56页
     ·Mg2+浓度对细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第56-57页
     ·初始碳源/氮源浓度对荧光假单胞菌细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第57-60页
     ·培养时间对荧光假单胞菌细胞生长及全细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第60-61页
     ·不同培养条件下荧光假单胞菌的生长曲线(OD550)第61-62页
     ·荧光假单胞菌产胞外酶与胞内酶关系初探第62-64页
       ·蛋白酶水解酶活测定标准曲线第62页
       ·培养时间对胞外脂肪酶/蛋白酶水解活力的影响第62-64页
       ·荧光假单胞菌全细胞催化剂的脂肪酶/蛋白酶水解活力第64页
   ·本章小结第64-67页
第四章 反应条件对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应影响的研究第67-92页
   ·实验材料第68页
     ·菌种第68页
     ·主要试剂第68页
   ·主要仪器设备第68页
   ·实验方法第68-72页
     ·菌种培养方法第68页
     ·全细胞催化剂制备方法第68页
     ·反应初速度、产率、区域选择性的计算第68页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析第68页
     ·有机溶剂种类对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第68-69页
     ·含吡啶混合有机溶剂对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷区域选择性酰化反应的影响第69页
     ·混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第69页
     ·不同pH缓冲液预处理全细胞对其促阿糖胞苷酰化反应的影响第69-70页
     ·阿糖胞苷浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第70页
     ·全细胞催化剂用量对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第70页
     ·底物摩尔比对混合有机溶剂中荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第70-71页
     ·反应温度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第71页
     ·振荡速度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第71页
     ·不同反应介质中荧光假单胞菌细胞催化剂的热稳定性第71页
     ·荧光假单胞菌全细胞催化剂的操作稳定性第71-72页
     ·荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的放大第72页
   ·结果与讨论第72-90页
     ·有机溶剂种类对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第72-73页
     ·含吡啶混合有机溶剂对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第73-75页
     ·混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第75-77页
     ·不同PH缓冲液预处理全细胞对其促阿糖胞苷酰化反应的影响第77-78页
     ·阿糖胞苷浓度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第78-79页
     ·全细胞催化剂用量对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第79-81页
     ·底物摩尔比对混合有机溶剂中荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第81-83页
     ·反应温度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第83-86页
     ·振荡速度对荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第86-87页
     ·不同有机介质中荧光假单胞菌全细胞催化剂的热稳定性第87-88页
     ·荧光假单胞菌全细胞催化剂的操作稳定性第88-90页
     ·荧光假单胞菌细胞促阿糖胞苷酰化反应放大的研究第90页
   ·本章小结第90-92页
第五章 米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的研究第92-108页
   ·实验材料第92-93页
     ·菌种第92-93页
     ·主要试剂第93页
   ·主要仪器设备第93页
   ·实验方法第93-96页
     ·菌种培养方法第93页
     ·全细胞催化剂制备方法第93页
     ·反应初速度、产率、区域选择性的计算第93-94页
       ·初速度V0值第93页
       ·产率Yield(%)第93页
       ·区域选择性 3′-Regioselectivity(%)第93-94页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析第94页
     ·有机溶剂种类对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第94页
     ·含吡啶混合有机溶剂对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第94页
     ·混合有机溶剂中疏水性溶剂浓度对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第94页
     ·底物摩尔比对混合有机溶剂中米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第94-95页
     ·催化剂用量对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第95页
     ·反应温度对米曲霉细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第95页
     ·振荡速度对米曲霉细胞促阿糖胞苷酰化反应的影响第95页
     ·不同反应介质中米曲霉细胞催化剂的热稳定性第95-96页
     ·米曲霉全细胞催化剂的操作稳定性第96页
   ·结果与讨论第96-106页
     ·有机介质种类对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第96-97页
     ·混合有机溶剂中两组分配比对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第97-98页
     ·底物摩尔比对混合有机溶剂中米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第98-99页
     ·催化剂用量对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第99-100页
     ·反应温度对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第100-102页
     ·振荡速度对米曲霉细胞促阿糖胞苷丙酰化反应的影响第102-103页
     ·不同介质中米曲霉全细胞催化剂的热稳定性第103-105页
     ·米曲霉全细胞催化剂的操作稳定性第105-106页
   ·本章小结第106-108页
结论与展望第108-113页
参考文献第113-127页
附录 1 HPLC色谱图第127-131页
附录 2 核磁共振图谱第131-134页
附录 3 缩写第134-135页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第135-136页
致谢第136-137页
附件第137页

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