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猪链球菌2型强毒株重要功能蛋白的克隆表达、功能鉴定及其免疫特性研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
第一部分 文献综述第7-30页
 第一章 猪链球菌毒力因子及致病机理研究进展第7-20页
  1 S.suis的生物学特性第7页
  2 S.suis的流行病学第7-8页
  3 S.suis的毒力因子第8-10页
  4 S.suis的致病机理第10-12页
  5 结束语第12-13页
  参考文献第13-20页
 第二章 链球菌烯醇化酶(Enolase)研究进展第20-30页
  1 Enolase的结构和功能域第20-22页
   ·Enolase的单体结构第20页
   ·Enolase的多聚体结构第20-21页
   ·Enolase的血纤溶酶原结合位点第21-22页
   ·Enolase C末端Lys的作用第22页
  2 链球菌中Enolase的功能第22-25页
   ·化脓链球菌(S.pyogenes,GAS)Enolase第22页
   ·肺炎链球菌(S.pneumoniae)Enolase第22-23页
   ·无乳链球菌(S.agalactia,GBS)Enolase第23页
   ·远缘链球菌(S.sobrinus)Enolase第23-24页
   ·变形链球菌(S.mutans)Enolase第24页
   ·人组织中Enolase第24-25页
   ·猪链球菌2型(S.suis 2)Enolase第25页
  参考文献第25-30页
第一篇 猪链球菌2型烯醇化酶的分子克隆、功能鉴定及免疫特性研究第30-54页
 第一章 猪链球菌2型烯醇化酶的分子克隆及酶活性测定第30-40页
  1 材料和方法第30-34页
  2 结果第34-38页
   ·eno基因的生物信息学分析第35-36页
   ·eno基因的分子克隆第36-37页
   ·Enolase的表达及纯化第37-38页
   ·Enolase活性测定第38页
  3 讨论第38-40页
 第二章 Enolase在猪链球菌2型的表面定位及其对宿主黏附和免疫下调作用的初步探讨第40-47页
  1 材料和方法第40-42页
  2 结果第42-45页
   ·Enolase信号肽和跨膜区预测第42-43页
   ·Enolase在S.suis 2的表面分布第43-45页
   ·Enolase参与S.suis 2对Hep2细胞的黏附第45页
   ·Enolase对机体初次免疫反应的下调第45页
  3 讨论第45-47页
 第三章 enolase基因在猪链球菌中的分布、重组Enolase反应原性及ELASA方法的建立和应用第47-52页
  1 材料和方法第47-49页
  2 结果第49-51页
   ·PCR分析eno基因在S.suis血清型中的存在情况第49-50页
   ·Enolase的Western blot分析第50页
   ·ELISA检测猪血清中抗Enolase抗体第50-51页
  3 讨论第51-52页
 参考文献第52-54页
第二篇 猪链球菌2型溶血素suilysin基因的表达及其产物溶血活性和免疫特性的初步研究第54-64页
 1 材料和方法第54-57页
 2 结果第57-61页
   ·重组质粒pMD-18T∶∶sly和pET32∶∶sly的构建及鉴定第57-58页
   ·IPTG诱导培养时间对SLY表达的影响第58页
   ·重组蛋白的可溶性分析第58-59页
   ·不同培养温度对SLY表达的影响第59页
   ·重组蛋白的提纯第59-60页
   ·重组蛋白溶血活性的研究第60-61页
   ·动物保护实验第61页
 3 讨论第61-62页
 参考文献第62-64页
第三篇 猪链球菌2型hemolysin基因的克隆及序列分析第64-72页
 1 材料和方法第64-66页
 2 结果第66-69页
   ·同源性分析第66页
   ·信号肽和跨膜区预测第66-67页
   ·氨基酸序列分析第67-68页
   ·pMD18T∶∶hemolysin的构建和鉴定第68页
   ·pET30∶∶hemolysin的构建和鉴定第68-69页
 3 讨论第69-70页
 参考文献第70-72页
致谢第72页

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