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基于产絮克隆菌的遗传及产絮特性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-17页
第1章 绪论第17-35页
   ·生物絮凝剂的研究现状及发展趋势第17-29页
     ·生物絮凝剂第17-22页
     ·生物絮凝剂的应用与发展趋势第22-26页
     ·复合型生物絮凝剂的开发第26-29页
   ·絮凝基因的研究进展第29-33页
     ·絮凝基因的种类第29-30页
     ·基因复合型菌株的研制第30页
     ·絮凝基因的研究进展第30-33页
   ·课题的研究目的和主要内容第33-35页
     ·课题来源第33页
     ·研究目的和意义第33-34页
     ·解决的关键科学问题第34页
     ·本课题的主要研究内容第34-35页
第2章 实验材料与方法第35-51页
   ·实验材料第35-38页
     ·菌株第35页
     ·培养基第35-36页
     ·试验试剂和仪器第36-38页
   ·实验方法第38-51页
     ·细菌的形态学观察和生理生化鉴定第38-41页
     ·基因定位方法第41-42页
     ·细胞融合方法第42-44页
     ·絮凝基因文库构建方法第44-46页
     ·絮凝试验第46页
     ·克隆菌絮凝特性的研究第46-47页
     ·絮凝活性分布第47-48页
     ·不同因素对菌株絮凝水平的影响第48页
     ·絮凝形态的表征第48-49页
     ·蛋白质表达第49-50页
     ·两段式发酵分析方法第50-51页
第3章 絮凝菌的基因定位与絮凝成分分析第51-71页
   ·絮凝菌的分类鉴定第51-59页
     ·菌体形态第51-54页
     ·菌落形态第54-55页
     ·生理生化特征第55页
     ·絮凝菌F2 的16SrDNA鉴定第55-59页
   ·絮凝成分分析第59-64页
     ·絮凝活性分布第59-60页
     ·絮凝剂F2 的热稳定性第60-61页
     ·生物絮凝剂F2 的有效成份分析第61-64页
   ·絮凝菌的絮凝基因定位研究第64-69页
     ·絮凝菌质粒提取第65-66页
     ·抗生素抗性遗传选择标记的测定第66-67页
     ·絮凝菌质粒DNA转化大肠杆菌第67页
     ·转化子絮凝测定第67-68页
     ·基因定位与代谢工程的相关性第68-69页
   ·本章小结第69-71页
第4章 絮凝菌的细胞融合研究第71-90页
   ·青霉素GK预处理对菌液活性的影响第72-75页
     ·不同浓度的青霉素GK作用不同时间预处理对F2 菌株生长的影响第73-74页
     ·不同浓度的青霉素GK作用不同时间预处理对F6 菌株生长的影响第74-75页
   ·F2、F6 抗生素选择第75-77页
   ·原生质体的形成第77-84页
     ·溶菌酶作用的最佳条件第77-79页
     ·原生质体形成率及再生率第79-82页
     ·原生质体形成的显微观察第82-84页
   ·原生质体融合第84-87页
     ·PEG最佳作用时间的选择第84-86页
     ·融合细胞的筛选第86-87页
   ·融合子的絮凝测定第87-88页
   ·本章小结第88-90页
第5章 絮凝基因的克隆、表达与絮凝形态分析第90-130页
   ·絮凝基因组文库的构建第91页
   ·阳性克隆的筛选及鉴定第91-94页
     ·阳性克隆的筛选第91-92页
     ·阳性克隆的鉴定第92-93页
     ·絮凝基因的序列及同源性分析第93-94页
   ·絮凝特性的研究第94-98页
     ·FC2 表达的絮凝特性第94页
     ·影响絮凝特性的因素测定第94-96页
     ·絮凝条件对絮凝活性的影响第96-98页
   ·不同因素对菌株絮凝水平的影响第98-105页
     ·不同糖对FC2 絮凝水平的影响第99-103页
     ·Ca~(2+)浓度对絮凝水平的影响第103页
     ·pH值对絮凝水平的影响第103-104页
     ·温度对絮凝水平的影响第104-105页
     ·放置时间对絮凝水平的影响第105页
   ·FC2 絮凝成份分析第105-111页
     ·絮凝活性的比对第106-107页
     ·絮凝活性分布第107页
     ·FC2 絮凝剂灭菌失活后絮凝活性第107-108页
     ·FC2 生物絮凝剂有效成分分析第108-111页
   ·絮凝形成过程与Zeta(ξ)电位的关系第111-114页
     ·不同pH值的Zeta(ξ) 电位第111-112页
     ·不同样品的Zeta(ξ) 电位第112-114页
   ·FC2 絮凝形态结构的表征第114-123页
     ·FC2 絮凝体的表面微观形态第114-116页
     ·原子力显微镜下FC2 与高岭土絮凝的图像分析第116-118页
     ·絮凝形态学研究第118-122页
     ·颗粒计数分析第122-123页
   ·蛋白质表达第123-129页
     ·克隆载体PUC19 的结构第124-127页
     ·诱导表达时间的测定第127-128页
     ·蛋白质表达第128-129页
   ·本章小结第129-130页
第6章 絮凝菌在两段式发酵工艺中的应用第130-143页
   ·纤维素降解菌株的表型特征第131-133页
   ·葡萄糖标准曲线第133页
   ·纤维素降解酶活第133-136页
     ·以羧甲基纤维素为底物测定纤维素酶活第135页
     ·以滤纸为底物测定纤维素酶活第135-136页
   ·TOC与总氮的测定第136-138页
     ·发酵产物总碳分析第136-137页
     ·发酵产物总氮分析第137-138页
   ·两段式发酵液絮凝效果测定第138-139页
   ·絮凝剂的絮凝效果测定第139-141页
     ·絮凝活性测定第139-140页
     ·絮凝菌的菌群构建第140-141页
     ·两段式发酵与絮凝菌混合培养的絮凝效果差异第141页
   ·本章小结第141-143页
结论第143-146页
参考文献第146-156页
附录第156-159页
攻读学位期间发表的学术论文第159-161页
致谢第161-162页
个人简历第162页

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