| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 英文缩写及中英文对照 | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-20页 |
| ·单克隆抗体简介 | 第13-15页 |
| ·鼠源性单克隆抗体 | 第13-14页 |
| ·嵌合抗体 | 第14-15页 |
| ·CD20靶抗原 | 第15-17页 |
| ·CD20靶抗原的特征 | 第15-16页 |
| ·CD20分子的限制性表达 | 第16页 |
| ·CD20分子的生理功能 | 第16-17页 |
| ·CD20抗体的临床研究 | 第17-19页 |
| ·Rituximab | 第17-18页 |
| ·Zevalin | 第18页 |
| ·Bexxar | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第2章 抗CD20嵌合抗体TGLA体内、外生物活性研究 | 第20-46页 |
| ·引言 | 第20-21页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·细胞系 | 第21页 |
| ·细胞培养液 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-28页 |
| ·体外实验 | 第23-27页 |
| ·RT-PCR | 第23页 |
| ·双夹心ELISA法检测蛋白含量 | 第23页 |
| ·Western blot分析抗体的分子量 | 第23页 |
| ·免疫沉淀 | 第23-24页 |
| ·TGLA抗体与细胞结合实验 | 第24页 |
| ·异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体 | 第24页 |
| ·抗体竞争性抑制实验 | 第24-25页 |
| ·抗原抗体复合物在细胞表面稳定性实验 | 第25页 |
| ·亲和常数的测定 | 第25页 |
| ·TGLA抗体对细胞生长的抑制作用 | 第25页 |
| ·TGLA抗体诱导B细胞凋亡的检测 | 第25-26页 |
| ·补体依赖的细胞毒性作用(CDC) | 第26页 |
| ·人外周血中效应细胞的分离 | 第26页 |
| ·抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用(ADCC) | 第26-27页 |
| ·动物实验 | 第27-28页 |
| ·TGLA抗体异常毒性实验 | 第27页 |
| ·荷瘤裸鼠模型的建立 | 第27页 |
| ·移植瘤细胞表面标记检测 | 第27页 |
| ·TGLA抗体抑制肿瘤疗效观察 | 第27页 |
| ·统计学分析 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-42页 |
| ·体外实验 | 第28-39页 |
| ·RT-PCR分析 | 第28页 |
| ·嵌合抗体分子量大小分析 | 第28-29页 |
| ·TGLA识别抗原的分子量 | 第29-30页 |
| ·TGLA与CD20~+细胞的特异性结合 | 第30-32页 |
| ·TGLA的亲和常数 | 第32-33页 |
| ·美罗华对TGLA-FITC单抗的竞争抑制作用 | 第33-34页 |
| ·抗原抗体复合物在细胞表面稳定性分析 | 第34页 |
| ·嵌合抗体TGLA对Daudi和Raji细胞的生长抑制作用 | 第34-36页 |
| ·FACS分析TGLA诱导Daudi和Raji细胞的凋亡 | 第36-37页 |
| ·TGLA对Daudi和Raji细胞的CDC作用 | 第37-38页 |
| ·TGLA对Daudi细胞的ADCC作用 | 第38-39页 |
| ·动物实验 | 第39-42页 |
| ·抗体异常毒性实验 | 第39页 |
| ·人B-淋巴细胞荷瘤裸鼠模型的建立 | 第39-41页 |
| ·TGLA抗体抑制肿瘤疗效 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第3章 抗CD20抗体1-28的结构模拟、改造及结合活检测 | 第46-66页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·细胞系 | 第47页 |
| ·细胞培养液 | 第47页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47-48页 |
| ·仪器 | 第48页 |
| ·引物合成及序列测定 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-54页 |
| ·抗体结构模拟 | 第48-49页 |
| ·LH23载体构建 | 第49-50页 |
| ·LH1-3载体构建 | 第50-51页 |
| ·电转细菌感受态的制备 | 第51页 |
| ·电转化 | 第51-52页 |
| ·转染 | 第52页 |
| ·双夹心ELISA法检测蛋白含量 | 第52页 |
| ·Western blot分析抗体的分子量 | 第52-53页 |
| ·间接免疫荧光分析 | 第53页 |
| ·补体依赖的细胞毒性作用 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-63页 |
| ·利用同源模建、分子力学方法构建抗CD20抗体scFv空间构象 | 第54-56页 |
| ·表达载体的构建 | 第56-58页 |
| ·LH23表达载体构建和鉴定 | 第56-57页 |
| ·LH1-3表达载体构建和鉴定 | 第57-58页 |
| ·ELISA定量目的蛋白 | 第58-59页 |
| ·工程抗体的分子量 | 第59-60页 |
| ·间接免疫荧光分析工程抗体的特异性结合 | 第60-62页 |
| ·CDC作用 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 附录 | 第75页 |
| 博士学位期间发表论文 | 第75页 |
| 博士期间参加的会议 | 第75页 |
| 专利申请 | 第75页 |
