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鸡传染性法氏囊病病毒VP1蛋白影响病毒复制及致病性机制的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-28页
   ·鸡传染性法氏囊病研究概况第15-17页
     ·鸡传染性法氏囊病的研究历史第15-16页
     ·鸡传染性法氏囊病的致病性研究第16页
     ·鸡传染性法氏囊病的流行病学研究第16页
     ·鸡传染性法氏囊病的诊断第16-17页
     ·鸡传染性法氏囊病的防控第17页
   ·鸡传染性法氏囊病病毒第17-20页
     ·IBDV 病毒粒子第17-18页
     ·IBDV 基因组第18-19页
     ·病毒编码蛋白第19-20页
   ·反向遗传系统第20-23页
     ·几种不同类型的反向遗传系统第21-22页
     ·IBDV 反向遗传系统的建立第22页
     ·反向遗传学在IBDV 研究中的应用第22-23页
   ·决定IBDV 抗原变异,致病性及细胞嗜性的分子基础第23-24页
   ·IBDV 的B节段研究进展第24-26页
   ·问题与展望第26页
   ·本研究的目的及意义第26-28页
第二章 IBDV B 节段全长克隆及序列分析第28-38页
   ·材料与方法第28-32页
     ·病毒,SPF 鸡胚及实验动物第28-29页
     ·主要试剂及引物合成第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·病毒的处理及dsRNA 的提取第30页
     ·基因组序列的克隆第30-31页
     ·序列比对及进化分析第31页
     ·UTR 部分二级结构预测第31页
     ·病毒致病性研究第31-32页
   ·结果第32-36页
     ·B 节段全基因组序列的扩增第32页
     ·B 节段全基因组序列分析第32-33页
     ·B 节段进化分析第33-35页
     ·B 节段 UTR 二级结构分析第35-36页
     ·致病性实验第36页
   ·讨论第36-38页
第三章 IBDV VP1 影响弱毒复制位点的鉴定第38-49页
   ·材料与方法第38-44页
     ·质粒,病毒,细胞,动物第38页
     ·主要仪器第38-39页
     ·工具酶及主要试剂第39页
     ·引物设计与合成第39-40页
     ·B 节段基因修饰及感染性克隆的构建第40-42页
     ·病毒的拯救第42-43页
     ·拯救病毒的鉴定第43页
     ·突变病毒的体外复制动力学分析第43-44页
   ·结果第44-48页
     ·B 节段基因修饰及感染性克隆的构建第44页
     ·拯救病毒的鉴定第44-46页
     ·拯救病毒的复制动力学分析第46-48页
   ·讨论第48-49页
第四章 IBDV VP1 上突变位点对病毒致病性的影响第49-57页
   ·材料与方法第49-51页
     ·质粒,细胞,鸡胚,动物第49页
     ·主要试剂和工具酶第49页
     ·主要仪器第49页
     ·vvIBDV 反向遗传操作系统的建立第49-50页
     ·B 节段突变的vvIBDV 的拯救第50-51页
     ·拯救病毒的动物感染实验第51页
   ·结果第51-55页
     ·拯救超强毒株的SPF 鸡病理变化第51-52页
     ·拯救超强毒株的SPF 鸡的法氏囊病理变化第52页
     ·RT-PCR 鉴定第52页
     ·拯救病毒的电镜鉴定第52-54页
     ·致病性实验第54页
     ·病毒的体内复制动力学第54-55页
   ·讨论第55-57页
第五章 VP1 突变位点影响IBDV 复制及致病性的分子机制第57-74页
   ·材料与方法第58-64页
     ·质粒,细胞第58页
     ·主要仪器第58页
     ·主要试剂及工具酶第58页
     ·引物的设计与合成第58-59页
     ·基于B 节段的IBDV Minigenome 的构建第59-61页
     ·用Minigenome 系统进行聚合酶活性的检测第61-62页
     ·HLJ-4 株的 VP1 区段突变对聚合酶活性影响的检测第62-63页
     ·HLJ-4 株的VP1 单点突变对聚合酶活性影响的检测第63页
     ·Gt 株的 VP1 突变对聚合酶活性影响的检测第63-64页
   ·结果第64-71页
     ·以HLJ-4 的B 节段为骨架的Minigenome 系统的建立第64页
     ·以Gt 的B 节段为骨架的Minigenome 系统的建立第64页
     ·以HLJ-4 的B 节段为骨架的Minigenome 系统检测聚合酶活性第64-65页
     ·以 Gt 的 B 节段为骨架的 Minigenome 系统检测聚合酶活性第65页
     ·HLJ-4 株的 VP1 上区段突变对聚合酶活性影响的检测第65-67页
     ·HLJ-4 株的 VP1 上单点突变对聚合酶活性影响的检测第67-69页
     ·Gt 株的 VP1 上突变位点对聚合酶活性影响的检测第69-71页
   ·讨论第71-74页
第六章 全文结论第74-75页
参考文献第75-85页
致谢第85-86页
作者简历第86页

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