| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-42页 |
| ·PED概述 | 第18-22页 |
| ·流行病学 | 第18-19页 |
| ·临床症状 | 第19页 |
| ·发病机理 | 第19-20页 |
| ·病理变化 | 第20页 |
| ·诊断 | 第20-21页 |
| ·组织嗜性和免疫 | 第21页 |
| ·防治 | 第21-22页 |
| ·PEDV的生物学特性 | 第22-27页 |
| ·PEDV的形态结构 | 第22-23页 |
| ·PEDV理化特性 | 第23页 |
| ·PEDV抗原性 | 第23页 |
| ·PEDV细胞培养特性 | 第23页 |
| ·PEDV病毒学学分类地位 | 第23-24页 |
| ·PEDV的基因组结构和复制 | 第24-26页 |
| ·PEDV基因组编码蛋白及其功能 | 第26-27页 |
| ·PEDV及其它冠状病毒B细胞抗原表位和细胞受体的研究进展 | 第27-32页 |
| ·PEDV及其它冠状病毒S蛋白B细胞抗原表位的研究进展 | 第28-29页 |
| ·PEDV及其它冠状病毒受体蛋白的研究进展 | 第29-31页 |
| ·PEDV及其它冠状病毒受体结合域的研究进展 | 第31-32页 |
| ·抗原表位研究方法 | 第32-38页 |
| ·B细胞抗原表位研究方法 | 第32-37页 |
| ·T细胞表位研究方法 | 第37页 |
| ·抗原表位研究的应用及意义 | 第37-38页 |
| ·病毒受体结合域研究的方法 | 第38-41页 |
| ·常规方法 | 第38-40页 |
| ·生物物理学方法 | 第40-41页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第41-42页 |
| 第二章 PEDV S基因的克隆及其分子特性分析 | 第42-52页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·病毒和细胞 | 第43页 |
| ·质粒与菌种 | 第43页 |
| ·生化试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·PEDV的细胞培养 | 第44页 |
| ·PEDV病毒RNA的提取 | 第44页 |
| ·cDNA合成的引物 | 第44-45页 |
| ·Sa、Sb和Sc片段的克隆 | 第45页 |
| ·S基因及其编码蛋白的分子特性分析 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·PEDV的细胞培养 | 第46页 |
| ·Sa、Sb和Sc片段的RT-PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·PEDV S基因序列分析及分子特性 | 第47-49页 |
| ·S蛋白S1 和S2 功能区的划分 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 PEDV S蛋白S1 区B细胞抗原表位的筛选和鉴定 | 第52-65页 |
| ·材料与方法 | 第53-58页 |
| ·质粒和菌种 | 第53页 |
| ·试剂盒与主要生化试剂 | 第53页 |
| ·实验动物与血清 | 第53页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| ·PEDV S1 基因特异性肽库的构建 | 第53-56页 |
| ·S1 基因特异性肽库的生物淘选及展示表位的鉴定 | 第56页 |
| ·S1P1、S1P2 和S1P3 抗原短肽ELISA与Western blot分析 | 第56-57页 |
| ·S1P1、S1P2 和S1P3 抗原短肽的免疫原性分析 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-64页 |
| ·PEDV S1 基因PCR扩增 | 第58-59页 |
| ·PEDV S1 基因DNaseI消化 | 第59页 |
| ·S1 基因特异性肽库鉴定 | 第59-60页 |
| ·S1 基因特异性肽库生物淘选 | 第60-61页 |
| ·抗原短肽ELISA和Western blot分析 | 第61-62页 |
| ·抗原短肽的免疫原性分析 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 PEDV S蛋白S1 区原核表达及其免疫优势区鉴定 | 第65-75页 |
| ·材料与方法 | 第66-69页 |
| ·质粒、细胞和菌种 | 第66页 |
| ·试剂盒与生化试剂 | 第66页 |
| ·实验动物和血清 | 第66页 |
| ·仪器设备 | 第66页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D片段的原核表达与纯化 | 第66-68页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白的免疫活性分析 | 第68页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白单因子血清制备及其免疫活性分析 | 第68页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白单因子血清的病毒中和试验 | 第68-69页 |
| ·PEDV S蛋白S1D区的序列比对分析 | 第69页 |
| ·结果 | 第69-74页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D片段PCR扩增 | 第69-70页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D片段的表达与纯化 | 第70页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白的免疫活性分析 | 第70-71页 |
| ·S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白单因子血清的免疫活性分析 | 第71-73页 |
| ·S1D重组蛋白单因子血清中和活性 | 第73页 |
| ·PEDV S蛋白S1D区序列比对分析 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| 第五章 PEDV S蛋白S1D区单克隆抗体的制备及表位鉴定 | 第75-89页 |
| ·材料与方法 | 第76-81页 |
| ·质粒、菌种和病毒 | 第76页 |
| ·试剂盒与主要生化试剂 | 第76页 |
| ·实验动物 | 第76页 |
| ·仪器设备 | 第76页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第76-77页 |
| ·McAbs免疫活性与中和活性鉴定 | 第77-78页 |
| ·S1D单克隆抗体对PEDV S1 基因特异性肽库的生物淘选及噬菌体ELISA | 第78页 |
| ·S1D淘选表位区（MER）的原核表达与表位鉴定 | 第78-80页 |
| ·S1D5 和S1D6 抗原表位免疫原性鉴定 | 第80页 |
| ·S1D5 和S1D6 表位的核心氨基酸鉴定 | 第80-81页 |
| ·结果 | 第81-87页 |
| ·S1D重组蛋白纯化 | 第81页 |
| ·S1D单克隆抗体亚型鉴定和腹水效价测定 | 第81-82页 |
| ·S1D单克隆抗体免疫活性和中和活性的鉴定 | 第82-83页 |
| ·S1 基因特异性肽库的生物淘选及噬菌体ELISA | 第83页 |
| ·S1D淘选表位区MER抗原表位的精确定位 | 第83-85页 |
| ·S1D5 和S1D6 抗原表位免疫原性鉴定 | 第85-87页 |
| ·S1D5 和S1D6 表位的核心氨基酸鉴定 | 第87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| 第六章 PEDV S蛋白受体结合域的筛选与鉴定 | 第89-101页 |
| ·材料与方法 | 第90-93页 |
| ·质粒、细胞、菌种和肽库 | 第90页 |
| ·试剂盒与主要生化试剂 | 第90页 |
| ·实验动物 | 第90页 |
| ·仪器设备 | 第90-91页 |
| ·pAPN对PEDV S1 基因特异性肽库的淘选 | 第91页 |
| ·pAPN多克隆血清制备 | 第91页 |
| ·MRR重组蛋白的真核表达 | 第91-92页 |
| ·MRR重组蛋白的免疫活性分析 | 第92页 |
| ·MRR重组蛋白与pAPN相互作用检测 | 第92-93页 |
| ·结果 | 第93-99页 |
| ·PEDV S1 基因特异性肽库的pAPN淘选 | 第93-95页 |
| ·MRR基因重组pFastBacHTB真核表达载体的构建 | 第95-96页 |
| ·MRR基因重组杆状病毒制备及鉴定 | 第96-97页 |
| ·MRR重组蛋白的表达与免疫活性鉴定 | 第97页 |
| ·MRR重组蛋白与pAPN的相互作用 | 第97-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| 第七章 全文结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简历 | 第118-119页 |
