中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
一、引言 | 第12-16页 |
二、材料与方法 | 第16-42页 |
2.1 材料 | 第16-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第16页 |
2.1.2 细胞系 | 第16页 |
2.1.3 细胞芯片 | 第16页 |
2.1.4 主要试剂 | 第16-19页 |
2.1.5 主要抗体 | 第19-20页 |
2.1.6 主要实验耗材 | 第20页 |
2.1.7 主要仪器 | 第20-22页 |
2.2 方法 | 第22-42页 |
2.2.1 主要试剂配制 | 第22-25页 |
2.2.2 细胞培养 | 第25-26页 |
2.2.3 小鼠注入血管紧张素动物模型 | 第26页 |
2.2.4 小鼠肌肉拉力的测定 | 第26-27页 |
2.2.5 小鼠体内注射羟基胆固醇动物模型 | 第27页 |
2.2.6 小鼠胫骨前肌注射含ch25h基因过表达质粒的慢病毒动物模型 | 第27页 |
2.2.7 小鼠注射GSK3β 抑制剂动物模型 | 第27-28页 |
2.2.8 小鼠肌卫星细胞分离 | 第28页 |
2.2.9 肌管的测量 | 第28-29页 |
2.2.10 TNF-α 和ch25h基因过表达质粒的构建 | 第29-31页 |
2.2.11 小鼠肌细胞C2C12芯片 | 第31页 |
2.2.12 蛋白印迹(Western blot) | 第31-33页 |
2.2.13 实时定量荧光PCR(Real-Time PCR) | 第33-35页 |
2.2.14 冰冻切片免疫荧光(immunofluorescence) | 第35-36页 |
2.2.15 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第36页 |
2.2.16 肌纤维横截面面积(CSA)测定 | 第36-37页 |
2.2.17 化学发光测定(双荧光素酶报告基因检测) | 第37页 |
2.2.18 Ch25h基因启动子的构建 | 第37-40页 |
2.2.19 TUNEL染色 | 第40页 |
2.2.20 病毒包装方法 | 第40-41页 |
2.2.21 统计方法 | 第41-42页 |
三、结果 | 第42-56页 |
3.1 TNF-α 信号通路可调节血管紧张素Ⅱ诱导的肌肉萎缩 | 第42-46页 |
3.2 Ch25h是TNF-α 介导的肌肉萎缩效应的下游靶基因 | 第46-51页 |
3.3 在C57BL/6 小鼠中 25-OHC通过激活GSK3β 来诱导肌肉萎缩 | 第51-54页 |
3.4 GSK3β 信号通路的抑制可以阻止血管紧张素Ⅱ诱导的肌肉萎缩 | 第54-56页 |
四、讨论 | 第56-60页 |
五、结论 | 第60-62页 |
1、TNF-α 信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的肌肉萎缩。 | 第60页 |
2、Ch25h是TNF-α 介导的肌肉萎缩效应的下游靶基因。 | 第60页 |
3、在C57BL/6 小鼠中 25-OHC通过激活GSK3β 来诱导肌肉萎缩。 | 第60-61页 |
4、抑制GSK3β 可以防止血管紧张素Ⅱ诱导的肌肉萎缩。 | 第61-62页 |
六、参考文献 | 第62-71页 |
综述 骨骼肌萎缩机制的研究进展 | 第71-89页 |
参考文献 | 第81-89页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论文 | 第89-90页 |
中英文缩写词表 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-93页 |