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芦荟多糖干预的PBMC对肝癌细胞的作用及其机制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-19页
引言第19-21页
第一章 文献研究第21-55页
 一、芦荟研究进展第21-32页
  1 芦荟的种类第21-22页
  2 芦荟的历史第22-23页
  3 芦荟的主要化学成分第23-25页
  4 芦荟的主要功效第25-32页
 二、芦荟多糖药理作用研究现状第32-40页
  1 免疫调节作用第32页
  2 抗肿瘤作用第32-33页
  3 抗辐射作用第33页
  4 保肝作用第33-34页
  5 创伤愈合作用第34页
  6 抗炎、抗艾滋病病毒作用第34页
  7 降血糖作用第34-35页
  8 其他作用第35页
  9 结语第35-40页
 三、原发性肝癌的病因和发病机制研究第40-46页
  1 肝炎病毒第40-41页
  2 肝硬化第41页
  3 黄曲霉素第41页
  4 饮水污染第41页
  5 肝吸虫第41-42页
  6 幽门螺杆菌第42页
  7 饮酒和吸烟第42页
  8 遗传因素第42-43页
  9 糖尿病第43页
  10 结论第43-46页
 四、中医药治疗原发性肝癌研究进展第46-55页
  1 辨证论治研究第46页
  2 中医治法研究第46-47页
  3 中药外治研究第47-48页
  4 单味药及有效成分研究第48页
  5 中药复方研究第48-49页
  6 中西医结合治疗研究第49-50页
  7 讨论第50-55页
第二章 实验研究第55-89页
 第一部分 芦荟多糖的提取纯化及含量测定第55-61页
  材料与方法第55-58页
   1 材料第55-56页
   ·药物第55页
   ·试剂第55-56页
   ·仪器第56页
   2 方法第56-58页
   ·芦荟凝胶冻干粉中总糖的测定第56-57页
     ·葡萄糖标准溶液的配制第56页
     ·蒽酮试剂的配制第56页
     ·标准曲线的测定第56页
     ·总糖的含量测定第56-57页
   ·芦荟凝胶冻干粉中多糖的分离、纯化及含量测定第57页
     ·芦荟粗多糖的分离第57页
     ·芦荟粗多糖的纯化第57页
     ·芦荟多糖含量测定第57页
   ·蛋白质含量测定第57-58页
     ·考马斯亮蓝G-250蛋白试剂的配制第57页
     ·蛋白质标准溶液的配制第57-58页
     ·标准曲线的测定第58页
     ·蛋白质含量的测定第58页
   ·统计方法第58页
  结果第58-59页
  讨论第59-61页
 第二部分 芦荟多糖对外周血单个核细胞和HepG2生长的影响第61-69页
  材料与方法第61-64页
   1 材料第61-62页
   ·药物第61页
   ·试剂第61-62页
   ·仪器第62页
   ·其它第62页
   2 方法第62-64页
   ·PBMC的原代培养第62-63页
     ·PBMC的分离制备第62页
     ·PBMC生长曲线测定第62页
     ·PBMC活力检测第62-63页
   ·芦荟多糖对PBMC生长的影响第63页
   ·芦荟多糖对HepG2生长的影响第63-64页
     ·HepG2细胞的解冻和培养第63页
     ·HepG2细胞的冷冻保存第63页
     ·HepG2细胞的传代第63-64页
     ·MTT法测定HepG2细胞的生长趋势第64页
     ·MTT法测定芦荟多糖对HepG2生长的影响第64页
   ·统计方法第64页
  结果第64-67页
   1 PBMC原代培养第64页
   2 PBMC生长趋势第64页
   3 HepG2生长趋势第64-65页
   4 芦荟多糖对PBMC生长的影响第65-66页
   5 芦荟多糖对HepG2生长的影响第66-67页
  讨论第67-69页
 第三部分 芦荟多糖抗肿瘤作用机制研究第69-83页
  材料与方法第70-73页
   1 材料第70-71页
   ·药物第70页
   ·试剂第70页
   ·仪器第70-71页
   ·其它第71页
   2 方法第71-73页
   ·AP11单独及联合Anti-CD3McAb、rhIL-2干预的PBMC对HepG2生长的影响第71-72页
     ·效应细胞PBMC的诱导制备及分组第71页
     ·倒置显微镜下观察各组PBMC形态特点第71页
     ·AP及其联合Anti-CD3McAb与rhIL-2对PBMC生长的影响第71页
     ·MTT法观察效应细胞上清液对靶细胞生长的影响第71-72页
     ·MTT法观察效应细胞对靶细胞生长及其形态的影响第72页
   ·AP抗肿瘤作用机制研究第72-73页
     ·效应细胞对靶细胞周期及凋亡率的影响第72页
     ·TNF-α、IFN-γ和AKP的测定第72-73页
     ·芦荟多糖AP11单独或联合Anti-CDMcAb、rIL-2对PBMC FasL表达的影响第73页
     ·效应细胞对靶细胞HepG2 Fas表达的影响第73页
   ·统计方法第73页
  结果第73-77页
   1 PBMC在光镜下的形态特点第73-74页
   2 AP11及其联合Anti-CD3McAb与rhIL-2对PBMC生长的影响第74页
   3 MTT法观察效应细胞上清液对靶细胞生长的影响第74页
   4 MTT法观察效应细胞对靶细胞生长及其形态的影响第74-75页
   5 效应细胞对靶细胞周期及凋亡率的影响第75-76页
   6 TNF-α、IFN-γ和AKP的测定第76-77页
   ·芦荟多糖对PBMC上清中IFN-γ水平的影响第76页
   ·芦荟多糖对PBMC上清中TNF-α水平的影响第76页
   ·效应细胞对靶细胞HepG2上清中IFN-γ水平的影响第76-77页
   ·效应细胞对靶细胞HepG2上清中TNF-α水平的影响第77页
   ·效应细胞对靶细胞HepG2上清中AKP水平的影响第77页
   7 Fas/FasL的测定第77页
   ·芦荟多糖对PBMC FasL表达的影响第77页
   ·效应细胞对HepG2 Fas表达的影响第77页
  讨论第77-83页
   1 芦荟多糖对PBMC生长的影响第77-78页
   2 芦荟多糖干预的PBMC效应细胞及其上清液对HepG2生长的影响第78页
   3 芦荟多糖干预的PBMC效应细胞对HepG2靶细胞周期及凋亡率的影响第78-79页
   4 芦荟多糖对PBMC分泌IFN-γ的影响第79页
   5 芦荟多糖对细胞因子TNF-α的影响第79-80页
   6 芦荟多糖干预的效应细胞对靶细胞HepG2 AKP水平的影响第80页
   7 芦荟多糖对效应细胞FasL与靶细胞Fas蛋白表达的影响第80-83页
 第四部分 PHCC原代培养及AP11、自体PBMC对其影响的探讨第83-89页
  材料与方法第84-86页
   1 材料第84页
   ·药物第84页
   ·试剂第84页
   ·仪器第84页
   ·其它第84页
   2 方法第84-86页
   ·人PBMC分离制备第84页
   ·原发性肝细胞癌癌细胞的制备第84-85页
     ·取材第85页
     ·初步处理第85页
     ·原代肝癌细胞分离及分组培养第85页
     ·芦荟多糖对原代培养肝癌细胞形态的影响第85页
     ·同源外周血单个核细胞(PBMC)对肝癌细胞生长的影响第85页
   ·统计方法第85-86页
  结果第86-87页
   1 肝癌细胞的原代培养第86页
   2 原代肝癌细胞形态学研究第86页
   3 芦荟多糖对原代培养肝癌细胞形态的影响第86页
   4 芦荟多糖对原代培养肝癌细胞生长的影响第86-87页
  讨论第87-89页
第三章 结语第89-91页
 一、结论第89页
 二、本课题的创新点第89-90页
 三、存在的问题第90-91页
参考文献第91-93页
附录第93-105页
在校期间发表论文第105-106页
致谢第106页

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