| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-29页 |
| ·研究的目的和意义 | 第13页 |
| ·轮状病毒研究进展 | 第13-20页 |
| ·轮状病毒的形态学 | 第14-15页 |
| ·轮状病毒的不同抗原类型和特性 | 第15页 |
| ·轮状病毒的基因组结构特征 | 第15页 |
| ·轮状病毒蛋白质及其功能 | 第15-16页 |
| ·VP4 基因研究进展 | 第16-17页 |
| ·轮状病毒免疫保护机制的研究 | 第17-18页 |
| ·轮状病毒疫苗研究进展 | 第18-20页 |
| ·大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）研究进展 | 第20-23页 |
| ·LT 的结构与性质 | 第20-22页 |
| ·LT 的功能 | 第22页 |
| ·B 亚基介导的免疫调节作用 | 第22-23页 |
| ·乳酸菌作为口服疫苗传递异源抗原活载体的研究进展 | 第23-29页 |
| ·乳酸菌的益生作用 | 第24页 |
| ·乳酸杆菌作为黏膜免疫活载体疫苗的特征 | 第24-26页 |
| ·重组乳酸菌作为活载体疫苗的研究现状 | 第26-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-43页 |
| ·表达PRV-VP4 与PRV-VP4-LTB 蛋白重组干酪乳杆菌的构建 | 第29-36页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第36-39页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·口服重组干酪乳杆菌免疫学指标的测定 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·重组干酪乳杆菌口服免疫小鼠后对脾细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
| ·免疫后小鼠脾细胞增殖的测定 | 第40-41页 |
| ·免疫后细胞因子IL-４、IFN-r 的测定 | 第41页 |
| ·抗体中和活性检测 | 第41-43页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-55页 |
| ·目的基因的PCR 扩增结果 | 第43页 |
| ·重组质粒PMD18-T-VP4 的鉴定结果 | 第43-44页 |
| ·重组质粒PMD18-T-VP4-LTB 的鉴定结果 | 第44页 |
| ·表达载体的鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·重组表达载体PPG-2-VP4、PPG-2-VP4-LTB 的鉴定 | 第45页 |
| ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第45-49页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第45-47页 |
| ·目的蛋白分泌性表达的鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·间接免疫荧光鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·重组菌口服免疫小鼠特异性抗体的检测结果 | 第49-53页 |
| ·小鼠粪便中特异性sIgA 检测结果 | 第49页 |
| ·小鼠血清中特异性IgG 抗体检测结果 | 第49-51页 |
| ·免疫小鼠眼洗液、阴道洗液中特异性sIgA 测定结果 | 第51页 |
| ·小鼠乳汁特异性抗体sIgA 测定结果 | 第51-53页 |
| ·小鼠粪便中特异性抗体sIgA 变化趋势的检测结果 | 第53页 |
| ·重组干酪乳杆菌口服免疫小鼠后对脾细胞增殖的影响结果 | 第53-54页 |
| ·免疫后小鼠脾细胞增殖的测定结果 | 第53-54页 |
| ·免疫后细胞因子IL-４、IFN-r 的测定结果 | 第54页 |
| ·抗体中和效价的检测结果 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-62页 |
| ·依据猪轮状病毒感染的特点设计乳酸菌口服疫苗可行性分析 | 第55-56页 |
| ·VP4 抗原的选择与免疫效果的分析 | 第56-57页 |
| ·外源蛋白表达后在菌体中的定位 | 第57-58页 |
| ·口服免疫后引起的局部和系统免疫应答的效果分析 | 第58-59页 |
| ·口服免疫重组乳酸菌后引起的细胞免疫应答 | 第59-60页 |
| ·LTB 的共表达与免疫效果分析 | 第60-61页 |
| ·重组菌免疫动物后抗体中和活性分析 | 第61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
