快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫胶体金诊断试纸条的研制
| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-20页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒病原学 | 第13-15页 |
| ·分类地位 | 第13页 |
| ·形态特征 | 第13页 |
| ·理化特性 | 第13页 |
| ·培养特性 | 第13-14页 |
| ·分子生物学特性 | 第14页 |
| ·遗传变异 | 第14-15页 |
| ·致病机理 | 第15页 |
| ·PRRSV 的检测方法 | 第15-16页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第15页 |
| ·免疫组织化学法 | 第15-16页 |
| ·聚合酶链反应（PCR）技术 | 第16页 |
| ·核酸探针原位杂交技术（ISH） | 第16页 |
| ·免疫胶体金快速诊断技术的应用 | 第16-18页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条基本原理 | 第17页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条的优点 | 第17-18页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条在猪病诊断上的应用 | 第18页 |
| ·课题研究的背景与意义 | 第18页 |
| ·研究内容及技术路线 | 第18-20页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·病毒与细胞 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-29页 |
| ·抗PRRSV McAb 的制备 | 第20-24页 |
| ·兔抗PRRSV N 蛋白抗体的制备 | 第24-25页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条的组装 | 第25-26页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条反应条件的优化 | 第26-28页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条的性能测试 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| ·抗PRRSV McAb 制备结果 | 第29-34页 |
| ·PRRSV 抗原的制备 | 第29页 |
| ·间接ELISA 检测方法最佳工作条件的建立 | 第29-30页 |
| ·小鼠抗体水平检测 | 第30页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第30-31页 |
| ·腹水的制备与纯化 | 第31页 |
| ·McAb 的特性鉴定 | 第31-34页 |
| ·兔抗PRRSV N 蛋白抗体制备结果 | 第34-35页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条的组装结果 | 第35-38页 |
| ·胶体金颗粒的质量 | 第35页 |
| ·McAb 最适标记量的测定 | 第35-36页 |
| ·抗体标记反应时间的确定 | 第36页 |
| ·金标McAb 稳定剂的选择 | 第36页 |
| ·金标McAb 包被量确定 | 第36-37页 |
| ·NCM 抗体包被量的确定 | 第37-38页 |
| ·结合垫封闭液的选择 | 第38页 |
| ·样品垫封闭液的选择 | 第38页 |
| ·NCM 封闭液的选择及浓度确定 | 第38页 |
| ·免疫胶体金诊断试纸条性能测试结果 | 第38-40页 |
| ·特异性试验 | 第38-39页 |
| ·敏感性试验 | 第39页 |
| ·保存期 | 第39页 |
| ·现地样本的检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| ·关于抗PRRSV McAb 的制备 | 第40-41页 |
| ·抗原的制备与动物免疫 | 第40页 |
| ·细胞融合 | 第40-41页 |
| ·杂交瘤细胞株筛选 | 第41页 |
| ·McAb 的特性鉴定 | 第41页 |
| ·关于免疫胶体金诊断试纸条的组装 | 第41-43页 |
| ·胶体金的制备 | 第41-42页 |
| ·胶体金标记抗体最适pH 值 | 第42页 |
| ·McAb 与胶体金的结合比例 | 第42页 |
| ·NCM 的封闭 | 第42-43页 |
| ·关于免疫胶体金的诊断特点和改进方向 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
