中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
符号说明 | 第6-13页 |
文献综述 | 第13-34页 |
1. 新城疫基本生物学特性 | 第13-14页 |
2. 新城疫的分子生物学 | 第14-22页 |
·N DV 各基因的结构与功能如下 | 第15-20页 |
·各基因对毒力的影响 | 第20-22页 |
3. 新城疫流行病学概况 | 第22-26页 |
·世界流行新城疫概况 | 第22-23页 |
·国内流行的ND 的基因分型状况 | 第23-26页 |
4. 流行病学特性及水禽的发病规律 | 第26-32页 |
·宿主范围 | 第26页 |
·N D 流行形式改变的原因分析 | 第26-28页 |
·野毒的严重污染 | 第27页 |
·鸡群免疫中存在的问题 | 第27页 |
·其它疾病的干扰或免疫失败 | 第27页 |
·我国禽类饲养方式的结果 | 第27-28页 |
·流行毒株与疫苗株的同源性差异 | 第28页 |
·新城疫由陆禽到水禽的转变和流行状况 | 第28-32页 |
·N DV 感染宿主的演变 | 第28-29页 |
·演变规律 | 第29-30页 |
·水禽在新城疫传播中的作用 | 第30页 |
·我国鹅源新城疫的流行和研究现状 | 第30-32页 |
5. 立项背景 | 第32-34页 |
研究一、4 株NDV 分离株生物学特性研究 | 第34-57页 |
1 材料 | 第34-35页 |
·病毒、血清及鸡胚 | 第34页 |
·主要分子生物学试剂 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34-35页 |
2 方法 | 第35-43页 |
·病毒的复壮与纯化 | 第35-36页 |
·病毒的分离与增殖 | 第35页 |
·病毒纯化 | 第35-36页 |
·血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI) | 第36页 |
·1%鸡红细胞悬液的制备 | 第36页 |
·血凝试验(HA) | 第36页 |
·血凝抑制试验(HI) | 第36页 |
·鸡胚的MDT 的的测定 | 第36-37页 |
·E LD50 的测定(同时进行F48E8 的ELD50 的测定) | 第37页 |
·1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)的测定 | 第37-38页 |
·NDVF 基因的扩增 | 第38-40页 |
·引物设计与合成 | 第38页 |
·病毒 RNA 的提取 | 第38页 |
·一步法RT-PCR | 第38-39页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
·N DV F 基因的克隆 | 第40-41页 |
·感受态细胞的制备(TSS 法) | 第40页 |
·P CR 产物的回收 | 第40-41页 |
·阳性重组子的筛选与鉴定 | 第41-43页 |
·碱裂解法提取质粒DNA | 第41页 |
·质粒PCR 鉴定 | 第41-43页 |
·F 基因核苷酸序列测定 | 第43页 |
·序列分析、核苷酸同源性比较、基因分型及进化树的绘制 | 第43页 |
3 结果与分析 | 第43-57页 |
·N DV 生物学特性鉴定结果 | 第43-46页 |
·病毒分离和鉴定 | 第43-44页 |
·血凝及血凝抑制试验 | 第44页 |
·NDV 的毒性试验 | 第44-46页 |
·F 基因部分扩增序列电泳图 | 第46-47页 |
·F 基因部分序列电泳图 | 第46-47页 |
·F 基因部分序列的测序结果分析 | 第47-56页 |
·试验毒株与其他禽副粘病毒的F 基因部分序列比对情况 | 第47-52页 |
·试验毒株与其他禽副粘病毒的F 基因部分序列推导氨基酸序列比对情况 | 第52-55页 |
·F 基因部分序列及其推导的氨基酸的同源性比较 | 第55-56页 |
·F 基因系统进化树 | 第56-57页 |
研究二、新城疫毒株CH2000 全基因组序列测定 | 第57-71页 |
1. 材料 | 第57页 |
·病毒 SPF 胚、试剂 | 第57页 |
2 方法 | 第57-59页 |
·引物设计 | 第57-58页 |
·病毒RNA 的提取 | 第58页 |
·一步法RT-PCR | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-71页 |
·CH2000 全基因组各片段的RT-PCR 扩增电泳图 | 第59-60页 |
·C H2000 的全基因组测序分析 | 第60-71页 |
·C H2000 与其他禽副粘病毒各个功能基因核苷酸以及氨基酸的同源性比较 | 第60页 |
·CH2000 与其他NDV 毒株的NP 非编码区基因比对情况 | 第60-64页 |
·L、HN 基因建立的进化树 | 第64-65页 |
·CH2000 的3′引导序列和5′尾端序列与其他几个禽副粘病毒的比对情况 | 第65-68页 |
·C H2000 与其他禽副粘病毒基因的分子特征和推导的氨基酸长度 | 第68-70页 |
·新城疫毒株各基因型的分子特征和推导产物长度 | 第70-71页 |
研究三、CH2000 毒株对鹅的致病性试验 | 第71-77页 |
1、材料 | 第71页 |
·试验毒株 | 第71页 |
·试验鸡胚和鹅 | 第71页 |
2、方法 | 第71-72页 |
·病毒增殖 | 第71页 |
·鸡源分离株人工感染鹅的试验 | 第71-72页 |
3 结果与分析 | 第72-77页 |
·CH2000 和F48E8 对鹅的致病性 | 第72-73页 |
·主要病变照片 | 第73-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
致谢 | 第83-84页 |