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新城疫病毒CH2000株全基因组的序列测定及其对鹅的致病力试验

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
符号说明第6-13页
文献综述第13-34页
 1. 新城疫基本生物学特性第13-14页
 2. 新城疫的分子生物学第14-22页
     ·N DV 各基因的结构与功能如下第15-20页
   ·各基因对毒力的影响第20-22页
 3. 新城疫流行病学概况第22-26页
   ·世界流行新城疫概况第22-23页
   ·国内流行的ND 的基因分型状况第23-26页
 4. 流行病学特性及水禽的发病规律第26-32页
   ·宿主范围第26页
     ·N D 流行形式改变的原因分析第26-28页
     ·野毒的严重污染第27页
     ·鸡群免疫中存在的问题第27页
     ·其它疾病的干扰或免疫失败第27页
     ·我国禽类饲养方式的结果第27-28页
     ·流行毒株与疫苗株的同源性差异第28页
   ·新城疫由陆禽到水禽的转变和流行状况第28-32页
       ·N DV 感染宿主的演变第28-29页
     ·演变规律第29-30页
     ·水禽在新城疫传播中的作用第30页
     ·我国鹅源新城疫的流行和研究现状第30-32页
 5. 立项背景第32-34页
研究一、4 株NDV 分离株生物学特性研究第34-57页
 1 材料第34-35页
   ·病毒、血清及鸡胚第34页
   ·主要分子生物学试剂第34页
   ·主要仪器设备第34-35页
 2 方法第35-43页
   ·病毒的复壮与纯化第35-36页
     ·病毒的分离与增殖第35页
     ·病毒纯化第35-36页
   ·血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)第36页
     ·1%鸡红细胞悬液的制备第36页
     ·血凝试验(HA)第36页
     ·血凝抑制试验(HI)第36页
   ·鸡胚的MDT 的的测定第36-37页
     ·E LD50 的测定(同时进行F48E8 的ELD50 的测定)第37页
     ·1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)的测定第37-38页
     ·NDVF 基因的扩增第38-40页
     ·引物设计与合成第38页
     ·病毒 RNA 的提取第38页
     ·一步法RT-PCR第38-39页
     ·琼脂糖凝胶电泳第39-40页
     ·N DV F 基因的克隆第40-41页
     ·感受态细胞的制备(TSS 法)第40页
       ·P CR 产物的回收第40-41页
   ·阳性重组子的筛选与鉴定第41-43页
     ·碱裂解法提取质粒DNA第41页
     ·质粒PCR 鉴定第41-43页
     ·F 基因核苷酸序列测定第43页
   ·序列分析、核苷酸同源性比较、基因分型及进化树的绘制第43页
 3 结果与分析第43-57页
     ·N DV 生物学特性鉴定结果第43-46页
     ·病毒分离和鉴定第43-44页
     ·血凝及血凝抑制试验第44页
     ·NDV 的毒性试验第44-46页
     ·F 基因部分扩增序列电泳图第46-47页
       ·F 基因部分序列电泳图第46-47页
     ·F 基因部分序列的测序结果分析第47-56页
     ·试验毒株与其他禽副粘病毒的F 基因部分序列比对情况第47-52页
     ·试验毒株与其他禽副粘病毒的F 基因部分序列推导氨基酸序列比对情况第52-55页
     ·F 基因部分序列及其推导的氨基酸的同源性比较第55-56页
     ·F 基因系统进化树第56-57页
研究二、新城疫毒株CH2000 全基因组序列测定第57-71页
 1. 材料第57页
   ·病毒 SPF 胚、试剂第57页
 2 方法第57-59页
   ·引物设计第57-58页
   ·病毒RNA 的提取第58页
   ·一步法RT-PCR第58-59页
 3 结果与分析第59-71页
   ·CH2000 全基因组各片段的RT-PCR 扩增电泳图第59-60页
     ·C H2000 的全基因组测序分析第60-71页
       ·C H2000 与其他禽副粘病毒各个功能基因核苷酸以及氨基酸的同源性比较第60页
     ·CH2000 与其他NDV 毒株的NP 非编码区基因比对情况第60-64页
     ·L、HN 基因建立的进化树第64-65页
     ·CH2000 的3′引导序列和5′尾端序列与其他几个禽副粘病毒的比对情况第65-68页
       ·C H2000 与其他禽副粘病毒基因的分子特征和推导的氨基酸长度第68-70页
     ·新城疫毒株各基因型的分子特征和推导产物长度第70-71页
研究三、CH2000 毒株对鹅的致病性试验第71-77页
 1、材料第71页
   ·试验毒株第71页
   ·试验鸡胚和鹅第71页
 2、方法第71-72页
   ·病毒增殖第71页
   ·鸡源分离株人工感染鹅的试验第71-72页
 3 结果与分析第72-77页
   ·CH2000 和F48E8 对鹅的致病性第72-73页
   ·主要病变照片第73-77页
参考文献第77-83页
致谢第83-84页

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