| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 精原干细胞的研究背景及概况 | 第13-15页 |
| ·鸡SSCs 的来源 | 第13页 |
| ·鸡SSCs 的增殖和分化 | 第13-14页 |
| ·鸡SSCs 的鉴定 | 第14-15页 |
| 2 鸡的睾丸组织解剖与组织学特点 | 第15-16页 |
| 3 转基因鸡的研究现状和进展 | 第16-20页 |
| ·对输卵管、受精卵的操作 | 第16-17页 |
| ·对胚胎细胞的操作 | 第17页 |
| ·对胚盘的操作 | 第17-20页 |
| 4 基因转染技术 | 第20-22页 |
| ·磷酸钙介导DNA 转染法 | 第21页 |
| ·脂质体介导DNA 转染法 | 第21页 |
| ·电穿孔介导DNA 转染法 | 第21-22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 实验部分 | 第23-59页 |
| 实验一 鸡胚精原干细胞体外转染 EGFP 基因及转染后的筛选 | 第23-41页 |
| 1 材料和方法 | 第23-27页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·鸡胚精原干细胞培养液 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·饲养层的制备 | 第24页 |
| ·鸡胚SSCs 分离、培养和传代 | 第24-25页 |
| ·鸡胚SSCs 的鉴定 | 第25页 |
| ·鸡胚SSCs 对G418 毒性敏感试验 | 第25页 |
| ·pEGFP-N1 质粒的制备 | 第25-26页 |
| ·3 种转染方法 | 第26-27页 |
| ·转染率的观察与计算 | 第27页 |
| ·转染细胞的筛选 | 第27页 |
| ·数据处理 | 第27页 |
| 2 实验结果 | 第27-36页 |
| ·鸡胚SSCs 的培养传代 | 第27-28页 |
| ·鸡胚SSCs 的鉴定结果 | 第28页 |
| ·鸡胚SSCs 对不同浓度G418 毒性的敏感性 | 第28-29页 |
| ·质粒pEGFP-N1 的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·3 种转染方法转染精原干细胞的结果 | 第30-31页 |
| ·电穿孔转染条件优化结果 | 第31-35页 |
| ·转染细胞的筛选结果 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-41页 |
| ·不同转染方法结果 | 第36-38页 |
| ·电穿孔转染条件的优化 | 第38-39页 |
| ·转染后鸡SSCs 的筛选 | 第39-41页 |
| 实验二 白消安诱发建立鸡无精子症模型 | 第41-50页 |
| 1 材料和方法 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验模型建立 | 第41页 |
| ·鸡存活情况和药物毒性观察 | 第41页 |
| ·光镜形态学观察 | 第41页 |
| ·鸡受精生育实验 | 第41页 |
| ·统计方法 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-47页 |
| ·死亡情况及毒性反应 | 第41-42页 |
| ·公鸡睾丸切片形态学观察 | 第42-45页 |
| ·公鸡精液光镜观测 | 第45-46页 |
| ·公鸡受精结果检测 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-50页 |
| 实验三 携带 EGFP 基因的精原干细胞移植 | 第50-59页 |
| 1 材料与方法 | 第50-53页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·种蛋 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·转基因精原干细胞的获得 | 第51页 |
| ·白消安诱导鸡无精子症模型 | 第51页 |
| ·转染EGFP 的SSCs 移植 | 第51-52页 |
| ·检测方法 | 第52-53页 |
| ·精液涂片检测 | 第52页 |
| ·精液基因组DNA PCR 检测 | 第52-53页 |
| ·睾丸组织冰冻切片检测 | 第53页 |
| ·统计方法 | 第53页 |
| 2 结果 | 第53-56页 |
| ·白消安诱导鸡无精子症模型 | 第53页 |
| ·精液涂片检测结果 | 第53-55页 |
| ·精液基因组DNA PCR 产物琼脂糖检测结果 | 第55-56页 |
| ·睾丸组织冰冻切片结果 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第72-73页 |