| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-25页 |
| ·胭脂鱼简介 | 第12-13页 |
| ·胰蛋白酶原前体和胰蛋白酶 | 第13-25页 |
| ·胰蛋白酶原的活化及胰蛋白酶的作用机制 | 第13-15页 |
| ·胰蛋白酶的酶学特性研究 | 第15-16页 |
| ·胰蛋白酶(原前体)基因的研究 | 第16-19页 |
| ·胰蛋白酶活性的影响因素 | 第19-25页 |
| 第2章 引言 | 第25-27页 |
| 第3章 胭脂鱼胰蛋白酶原前体的cDNA克隆 | 第27-37页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·动物材料 | 第27页 |
| ·菌种与质粒 | 第27页 |
| ·药品与试剂 | 第27页 |
| ·试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·仪器和设备 | 第28页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶原前体基因的cDNA克隆 | 第29-33页 |
| ·总 RNA的制备及检测 | 第29-30页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第30页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶原前体基因中间片段的克隆 | 第30-31页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶原前体基因3'RACE | 第31-32页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶原前体基因5’RACE | 第32-33页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶原前体基因全长 cDNA扩增 | 第33页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第33-35页 |
| ·PCR产物回收和纯化 | 第33-34页 |
| ·T载体连接 | 第34页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第34页 |
| ·质粒 DNA转化大肠杆菌 | 第34-35页 |
| ·筛选和鉴定重组质粒 | 第35页 |
| ·重组质粒的提取 | 第35页 |
| ·测序与生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 第4章 消化道不同部位和不同蛋白水平饲料对胭脂鱼胰蛋白酶活性的影响 | 第37-39页 |
| ·实验鱼与饲养条件 | 第37页 |
| ·取样及酶液制备 | 第37页 |
| ·酶活性的测定 | 第37-38页 |
| ·数据分析 | 第38-39页 |
| 第5章 结果与分析 | 第39-52页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶原前体基因克隆结果 | 第39-48页 |
| ·总 RNA提取及基因克隆 | 第39-40页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶前体基因的cDNA序列分析 | 第40页 |
| ·内含子外显子分析 | 第40-42页 |
| ·基因推导蛋白的氨基酸序列比对和系统发生树分析 | 第42-46页 |
| ·胰蛋白酶原前体基因推导蛋白的基本参数 | 第46页 |
| ·胰蛋白酶原前体蛋白二级结构预测 | 第46-47页 |
| ·胰蛋白酶原前体蛋白三级结构预测 | 第47-48页 |
| ·酶活性检测结果 | 第48-52页 |
| ·胭脂鱼消化系统不同部位胰蛋白酶活性检测结果 | 第48页 |
| ·不同蛋白水平的饲料对胭脂鱼胰蛋白酶活性的影响 | 第48-52页 |
| 第6章 讨论 | 第52-61页 |
| ·胰蛋白酶原前体的信号肽和激活肽 | 第52-54页 |
| ·胰蛋白酶基因序列在进化过程中的氨基酸残基的插入和删除 | 第54页 |
| ·胰蛋白酶的二硫键 | 第54-55页 |
| ·胰蛋白酶基因的系统进化 | 第55-56页 |
| ·阳离子(cationic)和阴离子(anionic)胰蛋白酶(原) | 第56-57页 |
| ·胰蛋白酶的作用 | 第57-58页 |
| ·胰蛋白酶活性的影响 | 第58-61页 |
| 第7章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 发表论文 | 第72页 |
