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RGD-蛛丝蛋白工程菌高密度发酵条件的优化及支架材料的细胞相容性研究

摘要第1-3页
Abstract第3-4页
中文文摘第4-8页
第1章 绪论第8-20页
   ·天然蜘蛛丝的研究进展第8-9页
   ·人工合成蜘蛛丝第9-10页
   ·内毒素与基因工程产物第10-14页
     ·内毒素的检测第10-11页
     ·去除内毒素的方法第11-14页
   ·丝蛋白纤维与细胞外基质第14-17页
     ·复合型细胞外基质第14-15页
     ·电纺丝第15-17页
     ·丝纤维蛋白构建细胞外基质第17页
   ·本研究的背景、目的与意义第17-20页
     ·本研究的背景第17-18页
     ·本研究的目的与意义第18-20页
第2章 正交实验优化RGD-蛛丝蛋白基因工程菌高密度发酵条件第20-28页
   ·材料和试剂第20-21页
     ·菌株第20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器第20页
     ·培养基第20-21页
   ·方法第21-23页
     ·正交实验设计第21页
     ·工程菌10L高密度发酵流程第21-23页
   ·结果第23-26页
     ·工程菌高密度发酵的生长曲线第23页
     ·目的蛋白的表达量第23-25页
     ·验证优化条件第25页
     ·纯化目的蛋白第25-26页
   ·讨论第26-28页
第3章 膜支架材料中内毒素的去除第28-32页
   ·材料第28页
     ·主要试剂第28页
     ·主要仪器第28页
   ·方法第28-29页
     ·蛛丝蛋白膜支架材料的制备第28-29页
     ·除去残留于材料的小分子第29页
     ·去除内毒素第29页
     ·鲎试剂反应前的器具处理第29页
     ·鲎试剂法测内毒素第29页
   ·结果第29-30页
     ·支架浸提液pH和离子强度的测定第29页
     ·酒精碱处理后支架浸提液内毒素的测定第29-30页
     ·加热处理第30页
   ·讨论第30-32页
第4章 蛋白支架材料的生物相容性实验第32-42页
   ·材料第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器第32页
   ·方法第32-34页
     ·NIH3T3细胞的培养第32-33页
     ·NIH3T3细胞的冻存第33页
     ·细胞计数第33页
     ·倒置相差显微镜观察细胞形态第33页
     ·制备材料浸提液第33页
     ·浸提液培养细胞第33页
     ·蛋白支架材料/NIH3T3成纤维细胞的复合培养第33页
     ·细胞HE染色第33-34页
     ·MTT实验第34页
     ·扫描电镜观察第34页
   ·实验结果第34-39页
     ·细胞HE染色第34页
     ·浸提液细胞培养实验第34-37页
     ·支架复合细胞第37-39页
   ·讨论第39-42页
结论第42-44页
参考文献第44-50页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第50-52页
致谢第52-54页
个人简历第54-56页

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