摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 前言 | 第10-24页 |
·乙烯利与天然橡胶生产 | 第10-13页 |
·乙烯利刺激橡胶树增产及其分子生物学研究 | 第10-12页 |
·乙烯利刺激橡胶树增产的副作用 | 第12-13页 |
·CDNA 差减文库构建及在橡胶树分子生物学研究中的应用 | 第13-15页 |
·利用SSH(suppression subtractive hybridization)技术构建cDNA 差减文库 | 第13页 |
·cDNA 差减文库在解析橡胶树产胶基因中的应用 | 第13-14页 |
·cDNA 差减文库在解析茉莉酸刺激乳管分化和胶乳合成中的应用.. | 第14页 |
·cDNA 差减文库在解析乙烯利刺激橡胶树增产过程中的应用 | 第14-15页 |
·泛素蛋白酶体降解系统研究 | 第15-18页 |
·泛素的结构和功能 | 第15页 |
·泛素-蛋白酶体降解途径 | 第15-17页 |
·泛素蛋白酶体降解系统与乙烯利刺激橡胶树增产 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
·相关技术图解 | 第19-24页 |
·SSH 技术 | 第19-20页 |
·SMART-RACE 技术 | 第20-24页 |
2 乙烯利刺条件下橡胶树胶乳差异表达CDNA 文库存的构建与分析(此部分与刘宽灿合作完成) | 第24-39页 |
·实验材料与试剂 | 第24页 |
·实验材料 | 第24页 |
·菌种和质粒 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-35页 |
·胶乳总RNA 提取 | 第24-25页 |
·RNA 电泳检测 | 第25页 |
·m RNA 的纯化 | 第25-27页 |
·橡胶树胶乳差异表达分析(SSH) | 第27-35页 |
·结果与分析 | 第35-39页 |
·橡胶树胶乳Total RNA 的提取结果 | 第35-36页 |
·橡胶树胶乳的表达差异SSH 结果 | 第36-39页 |
3 橡胶树UBI 基因全长CDNA 的克隆、基因结构及其表达分析 | 第39-61页 |
·实验材料与试剂 | 第39页 |
·菌种及质粒 | 第39页 |
·试剂 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-51页 |
·胶乳总RNA 提取(参照4.2) | 第39页 |
·差异片段全长cDNA 克隆 | 第39-44页 |
·Southern 杂交 | 第44-49页 |
·UBI 基因在乙烯刺激后不同时期的表达分析 | 第49-51页 |
·结果与分析 | 第51-61页 |
·NO.84 差异表达基因全长cDNA 序列克隆 | 第51-52页 |
·cDNA 序列及其ORF 分析结果 | 第52-58页 |
·Southern 杂交鉴定基因组中拷贝数 | 第58-59页 |
·半定量PCR 进行初步的表达分析 | 第59-61页 |
4 一种快速、高效的橡胶树胶乳总RNA 提取方法 | 第61-66页 |
·材料与方法 | 第61页 |
·材料 | 第61页 |
·主要试剂 | 第61页 |
·RNA 提取缓冲液配制 | 第61页 |
·器皿使用及消毒 | 第61页 |
·胶乳总RNA 提取方法及步骤 | 第61-62页 |
·RNA 质量检测 | 第62-63页 |
·普通琼脂糖凝胶电泳分析 | 第62页 |
·紫外分光光度计分析 | 第62页 |
·应用于RT-PCR 检测分析 | 第62-63页 |
·应用于RACE 技术克隆基因 | 第63页 |
·结果与分析 | 第63-66页 |
·RNA 完整性分析 | 第63页 |
·RNA 纯度检测及得率分析 | 第63-64页 |
·RT-PCR 检测 | 第64-65页 |
·应用本方法提取的RNA 可以满足RACE 技术操作的要求 | 第65-66页 |
5 讨论 | 第66-69页 |
·SSH CDNA 差减文库构建 | 第66页 |
·橡胶树UBI 基因的功能及表达分析 | 第66-67页 |
·橡胶树胶乳总RNA 提取方法的改良 | 第67-69页 |
6 结论 | 第69-70页 |
7 参考文献 | 第70-74页 |
致谢 | 第74页 |