摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
1. 前言 | 第10-24页 |
·香蕉的概述 | 第10页 |
·香蕉果实成熟及可能的信号转导途径 | 第10-15页 |
·乙烯的信号转导和果实成熟 | 第11-13页 |
·ABA 信号转导与果实成熟 | 第13-15页 |
·ROP 蛋白的研究进展 | 第15-22页 |
·ROP 蛋白的分类 | 第16页 |
·ROP 蛋白的结构 | 第16-17页 |
·ROP 蛋白的研究手段 | 第17页 |
·ROP 蛋白的信号转导途径的研究进展 | 第17-20页 |
·ROP 蛋白的功能 | 第20-22页 |
·研究的目的和意义 | 第22-23页 |
·技术路线 | 第23-24页 |
2. 实验材料、试剂及仪器 | 第24-26页 |
·实验材料 | 第24页 |
·实验试剂 | 第24-25页 |
·实验仪器 | 第25-26页 |
3. 实验方法 | 第26-44页 |
·RACE 方法在香蕉中克隆一个 ROP 基因(MAROP1) | 第26-32页 |
·RACE-PCR | 第26-30页 |
·全长克隆 | 第30-32页 |
·MAROP1 SOUTHERN杂交分析 | 第32-37页 |
·香蕉基因组DNA 的提取 | 第32-33页 |
·基因组DNA 限制性内切酶消化 | 第33-34页 |
·探针的标记 | 第34-35页 |
·DNA 的印迹转移 | 第35页 |
·Southern 杂交 | 第35-37页 |
·香蕉各成熟阶段的果实、及各组织器官的 RNA 的提取及反转录 | 第37-39页 |
·RNA 的提取 | 第37-38页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第38-39页 |
·基因表达特征分析 | 第39-41页 |
·RT-PCR 引物设计 | 第39页 |
·模板量的确定 | 第39页 |
·MUACTIN 指数增长期的确定 | 第39-40页 |
·香蕉的Marop1 基因指数增长期的确定 | 第40页 |
·MUACTIN 的 RT-PCR 分析 | 第40页 |
·Marop1 的 RT-PCR 分析 | 第40-41页 |
·抗体的制备 | 第41-43页 |
·原核表达载体的构建 | 第41页 |
·Marop1 原核表达与抗原的初分离(Kuhelj R,et al. 1995) | 第41-42页 |
·抗原的制备 | 第42页 |
·免疫兔子 | 第42-43页 |
·抗血清效价检测 | 第43-44页 |
·ELISA 方法检测抗体效价(中国农大植物病毒研究室,2000) | 第43页 |
·Western 检测抗体的效价 | 第43-44页 |
4 | 第44-57页 |
·BR-75 在 NCBI 上的比对结果 | 第44-45页 |
·香蕉果实 CDNA 文库筛选 | 第45-49页 |
·3’RACE-PCR 扩增 | 第45-46页 |
·核苷酸序列的测定 | 第46-47页 |
·用 GENSCAN 对拼接序列进行预测结果如下所示 | 第47页 |
·全长克隆 | 第47-48页 |
·测序结果 | 第48-49页 |
·保守结构域预测 | 第49-50页 |
·多序列比对 | 第50-51页 |
·对预测的氨基酸序列与进行聚类分析 | 第51-52页 |
·SOUTHERN 杂交 | 第52-53页 |
·基因的表达 | 第53-55页 |
·RNA 的提取 | 第53页 |
·循环数的确定 | 第53页 |
·目的基因在各成熟时期的表达 | 第53-54页 |
·目的基因在各组织器官中的表达 | 第54-55页 |
·原核表达载体的构建 | 第55页 |
·表达载体测序结果 | 第55-56页 |
·原核表达及抗原的初分离 | 第56页 |
·抗血清的 ELISA 检测结果 | 第56-57页 |
·抗血清的 WESTERN 检测结果 | 第57页 |
5. 讨论 | 第57-59页 |
·关于基因 MAROP1 的聚类分析 | 第57-58页 |
·关于基因在各成熟时期的表达 | 第58页 |
·关于基因在各组织器官的表达 | 第58-59页 |
·关于 SOUTHERN杂交的分析 | 第59页 |
·关于抗体制备方法的分析 | 第59页 |
6. 结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
缩写词(ABBREVIATION) | 第68-69页 |
附录 测序图 | 第69-71页 |