摘要 | 第1-15页 |
ABSTRACT | 第15-18页 |
缩略语表 | 第18-19页 |
第一章 综述:花粉及活性肽的研究进展 | 第19-56页 |
1 花粉的研究进展 | 第19-42页 |
·花粉的研究历史 | 第20-21页 |
·花粉的生理功能 | 第21-35页 |
·降血脂和抗动脉粥样硬化作用 | 第21-24页 |
·增强免疫功能 | 第24-27页 |
·降血糖 | 第27-30页 |
·抗衰老作用 | 第30-31页 |
·抑制前列腺疾病 | 第31-33页 |
·花粉与美容养颜 | 第33-34页 |
·其它生理功能 | 第34-35页 |
·油菜花粉资源 | 第35-36页 |
·油菜花粉的生理功能 | 第36-37页 |
·油菜花粉与前列腺疾病 | 第36页 |
·油菜蜂花粉多糖抗肿瘤作用的研究 | 第36-37页 |
·油菜蜂花粉黄酮类物质的抗氧化性研究 | 第37页 |
·油菜花粉抗衰老功能药理研究 | 第37页 |
·制约花粉利用的因素及今后发展的方向 | 第37-40页 |
·灭菌问题 | 第37-38页 |
·感官质量问题 | 第38页 |
·服用剂量的问题 | 第38页 |
·乳化问题 | 第38-39页 |
·破壁论与不破壁论 | 第39页 |
·油菜花粉的过敏问题 | 第39-40页 |
·蜂花粉中的生物活性肽研究现状 | 第40-41页 |
·进一步全面开发利用花粉资源及发展趋势 | 第41-42页 |
2. 植物源生物活性多肽的研究进展 | 第42-55页 |
·生物活性肽的来源 | 第43页 |
·蛋白质原料的选择 | 第43-44页 |
·蛋白酶及酶的选择 | 第44-46页 |
·酶法生产存在的问题及解决办法 | 第46-47页 |
·存在的问题 | 第46页 |
·解决办法 | 第46-47页 |
·生物活性肽的提取、分离和纯化 | 第47-49页 |
·酶法制备生物活性肽过程 | 第47-48页 |
·活性肽的分离和分析检验技术 | 第48-49页 |
·生物活性肽的摄入与吸收原理 | 第49-53页 |
·消化道对肽吸收的阻碍作用 | 第50-51页 |
·肽的吸收机制 | 第51-53页 |
·肽吸收的影响因素 | 第53-54页 |
·促进肽吸收的方法 | 第54-55页 |
·肽的定点释放技术 | 第54页 |
·延长肽在吸收位点的滞留时间 | 第54页 |
·蛋白酶抑制剂和吸收增强剂的使用 | 第54-55页 |
·肽结构的修饰 | 第55页 |
3 本研究的目的及研究内容 | 第55-56页 |
第二章 油菜花粉蛋白的制备 | 第56-66页 |
引言 | 第56页 |
1 材料和方法 | 第56-60页 |
·材料 | 第56-57页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57页 |
·研究方法 | 第57-59页 |
·油菜花粉的破壁 | 第57-58页 |
·油菜花粉的脱脂 | 第58页 |
·等电点沉淀最佳pH值的选择 | 第58-59页 |
·油菜花粉中蛋白的制备 | 第59页 |
·测定方法 | 第59-60页 |
·水分含量测定 | 第59页 |
·蛋白质的测定 | 第59页 |
·脂肪的测定 | 第59页 |
·还原糖的测定 | 第59页 |
·维生素C的测定 | 第59-60页 |
·微量元素的测定 | 第60页 |
·破壁脱脂后的油菜花粉各组分蛋白含量的测定 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-65页 |
·油菜花粉的破壁 | 第60-61页 |
·温差破壁法 | 第60页 |
·蒜汁酶破壁法 | 第60-61页 |
·两种破壁方法的破壁率比较 | 第61页 |
·水分含量 | 第61-62页 |
·破壁对新、陈油菜花粉主要营养成分的影响 | 第62页 |
·微量元素的测定分析 | 第62-63页 |
·原料花粉样品的确定 | 第63页 |
·等电点沉淀最佳pH的选择 | 第63-65页 |
·清蛋白等电点沉淀最佳pH的选择 | 第63-64页 |
·球蛋白等电点沉淀最佳pH的选择 | 第64页 |
·醇溶蛋白等电点沉淀最佳pH的选择 | 第64页 |
·碱溶蛋白等电点沉淀最佳pH的选择 | 第64-65页 |
·破壁脱脂后油菜花粉中蛋白质组分分析 | 第65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
第三章 油菜花粉蛋白的理化性质研究及其营养价值评价 | 第66-81页 |
引言 | 第66页 |
1 材料与方法 | 第66-71页 |
·材料 | 第66-67页 |
·实验材料 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66-67页 |
·主要仪器 | 第67页 |
·研究方法 | 第67-70页 |
·破壁脱脂的油菜花粉的制备 | 第67页 |
·油菜花粉中蛋白的提取 | 第67-68页 |
·油菜花粉蛋白功能性质的测定 | 第68-69页 |
·油菜花粉蛋白·OH抑制率的测定 | 第69页 |
·油菜花粉蛋白的氨基酸分析 | 第69-70页 |
·油菜花粉蛋白的营养价值评价 | 第70页 |
·目的蛋白的提取研究 | 第70-71页 |
2 结果与分析 | 第71-80页 |
·油菜花粉蛋白的功能性质 | 第71-73页 |
·吸水性 | 第71页 |
·溶解性 | 第71-72页 |
·吸油性 | 第72页 |
·乳化能力和乳化稳定性 | 第72-73页 |
·花粉蛋白抗氧化活性比较 | 第73-74页 |
·油菜花粉蛋白氨基酸的分析 | 第74-77页 |
·清蛋白、球蛋白、谷蛋白氨基酸的分析 | 第74-75页 |
·氨基酸比值系数法评价结果 | 第75-77页 |
·花粉中目的蛋白的提取研究 | 第77-80页 |
·单因子实验分析 | 第77-79页 |
·L_9(4~3)正交试验 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-81页 |
第四章 油菜花粉谷蛋白酶解肽的制备研究 | 第81-101页 |
引言 | 第81-82页 |
1 材料与方法 | 第82-88页 |
·材料 | 第82-83页 |
·实验材料 | 第82页 |
·主要试剂 | 第82-83页 |
·主要仪器 | 第83页 |
·测定方法 | 第83-84页 |
·蛋白含量的测定 | 第83页 |
·游离氨基酸含量的测定 | 第83页 |
·蛋白酶的酶活力测定 | 第83-84页 |
·酶解液水解度(DH)的测定 | 第84页 |
··OH抑制率的测定 | 第84页 |
·研究方法 | 第84-88页 |
·油菜花粉碱溶谷蛋白的制备 | 第84页 |
·蛋白的酶解反应 | 第84-85页 |
·蛋白酶的选择 | 第85页 |
·单因素酶解试验 | 第85页 |
·对底物浓度、温度和pH值的响应面实验 | 第85-86页 |
·柱层折分离蛋白酶解物 | 第86-87页 |
·酶解肽的抗氧化活性研究 | 第87页 |
·酶解肽各级分的紫外光谱 | 第87页 |
·酶解肽各级分的红外光谱 | 第87页 |
·酶解肽的单糖组成分析 | 第87-88页 |
2 结果与分析 | 第88-100页 |
·蛋白酶的确定 | 第88页 |
·单因素试验 | 第88-91页 |
·底物浓度对酶解的影响 | 第88-89页 |
·加酶量的影响 | 第89页 |
·pH的影响 | 第89-90页 |
·酶解时间的影响 | 第90页 |
·温度的影响 | 第90-91页 |
·响应面实验 | 第91-93页 |
·谷蛋白及酶解肽中氨基酸组成分析 | 第93-95页 |
·谷蛋白在酶解前后的抗氧化活性比较 | 第95-96页 |
·酶解肽的分离纯化 | 第96页 |
·花粉谷蛋白酶解肽的基本理化性质 | 第96-100页 |
·多肽各级分中蛋白质和总糖含量分析 | 第96-97页 |
·酶解肽的抗氧化活性研究 | 第97页 |
·多肽的紫外光谱 | 第97-98页 |
·肽各级分的红外光谱 | 第98-99页 |
·PRPG的气相色谱分析 | 第99-100页 |
3 讨论 | 第100-101页 |
第五章 油菜花粉谷蛋白酶解肽的抗氧化活性 | 第101-112页 |
引言 | 第101页 |
1 材料和方法 | 第101-105页 |
·实验材料 | 第101-102页 |
·实验样品 | 第101页 |
·实验动物 | 第101-102页 |
·主要试剂 | 第102页 |
·主要仪器 | 第102页 |
·实验方法 | 第102-105页 |
·PRPG还原能力的测定 | 第102-103页 |
·PRPG清除·OH效果的测定 | 第103-104页 |
·PRPG对H_2O_2诱导小鼠RBC氧化溶血的影响 | 第104页 |
·PRPG对小鼠RBC自氧化溶血的影响 | 第104页 |
·PRPG对小鼠RBC生成MDA的影响 | 第104页 |
·PRPG对小鼠肝匀浆体外生成MDA的影响 | 第104-105页 |
·PRPG对小鼠肝线粒体脂质过氧化的影响 | 第105页 |
·PRPG在小鼠体内的抗氧化作用 | 第105页 |
·统计学分析 | 第105页 |
2 结果与分析 | 第105-111页 |
·PRPG在化学体系中的抗氧化活性 | 第105-107页 |
·PRPG的还原能力 | 第105-106页 |
·PRPG清除·OH的效果 | 第106-107页 |
·PRPG在生物体系中的抗氧化活性 | 第107-111页 |
·PRPG对H_2O_2诱导小鼠红细胞(RBC)氧化溶血的影响 | 第107-108页 |
·PRPG对小鼠红细胞(RBC)自氧化溶血的影响 | 第108页 |
·PRPG对小鼠RBC生成MDA的影响 | 第108-109页 |
·PRPG对小鼠肝匀浆体外生成MDA的影响 | 第109页 |
·PRPG对小鼠肝线粒体肿胀度的影响 | 第109-110页 |
·PRPG在小鼠体内的抗氧化作用 | 第110-111页 |
3 讨论 | 第111-112页 |
第六章 油菜花粉谷蛋白酶解肽抗肿瘤活性研究 | 第112-135页 |
引言 | 第112-113页 |
1 材料和方法 | 第113-119页 |
·材料及仪器 | 第113-115页 |
·实验样品 | 第113页 |
·实验动物 | 第113页 |
·肿瘤细胞株 | 第113页 |
·其它材料 | 第113-114页 |
·主要试剂 | 第114页 |
·主要仪器 | 第114-115页 |
·体外抑瘤实验方法 | 第115-116页 |
·肿瘤细胞准备 | 第115页 |
·PRPG对瘤细胞体外生长的抑制实验 | 第115-116页 |
·体内抑瘤实验 | 第116-119页 |
·S180细胞的小鼠体内传代培养 | 第116页 |
·S180肿瘤鼠模型的建立 | 第116页 |
·实验方法 | 第116页 |
·PRPG体内抑瘤作用 | 第116页 |
·PRPG对荷瘤鼠免疫功能的影响 | 第116-118页 |
·PRPG对荷瘤鼠抗氧化能力的影响 | 第118页 |
·PRPG与环磷酰胺抗癌活性和毒性的影响 | 第118-119页 |
·PRPG对荷瘤小鼠外周血象的影响 | 第119页 |
·PRPG对荷瘤鼠组织形态的影响 | 第119页 |
·统计方法 | 第119页 |
2 结果与分析 | 第119-134页 |
·PRPG的体外抑瘤作用 | 第119-121页 |
·PRPG对瘤细胞体外生长抑制实验 | 第119-120页 |
·PRPG对肿瘤细胞生长抑制作用的显微镜观察 | 第120-121页 |
·PRPG的体内抑瘤作用 | 第121-122页 |
·PRPG对荷瘤鼠免疫功能的影响 | 第122-125页 |
·PRPG对荷瘤鼠免疫器官的影响 | 第122页 |
·PRPG对荷瘤鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响 | 第122-123页 |
·PRPG对荷瘤鼠单核巨噬细胞功能的影响 | 第123-124页 |
·PRPG对荷瘤鼠NK细胞活性的影响 | 第124页 |
·PRPG对荷瘤鼠脾淋巴细胞转化实验的影响 | 第124-125页 |
·PRPG对荷瘤小鼠血清溶血素形成的影响 | 第125页 |
·PRPG对荷瘤鼠抗氧化能力的影响 | 第125-127页 |
·PRPG对荷瘤小鼠血清MDA的影响 | 第125-126页 |
·PRPG对荷瘤小鼠血清GSH-Px活性的影响 | 第126页 |
·PRPG对荷瘤小鼠血清SOD活性的影响 | 第126-127页 |
·PRPG对荷瘤小鼠血清LDH活性的影响 | 第127页 |
·PRPG与环磷酰胺合用的效果 | 第127-128页 |
·对环磷酰胺抗肿瘤活性的影响 | 第127-128页 |
·对荷瘤小鼠各脏器的影响 | 第128页 |
·PRPG对荷瘤小鼠外周血象的影响 | 第128-129页 |
·对白细胞的影响 | 第128-129页 |
·对红细胞、血红蛋白、血小板的影响 | 第129页 |
·PRPG对荷瘤鼠组织形态的影响 | 第129-134页 |
·肿瘤 | 第129页 |
·肝 | 第129-130页 |
·脾 | 第130页 |
·肾 | 第130-134页 |
3 讨论 | 第134-135页 |
第七章 油菜花粉蛋白酶解肽对荷瘤鼠脾细胞因子分泌及其mRNA表达的影响 | 第135-144页 |
引言 | 第135页 |
1 材料和方法 | 第135-139页 |
·材料及仪器 | 第135-136页 |
·实验样品 | 第135页 |
·实验动物与肿瘤细胞株 | 第135页 |
·主要试剂 | 第135-136页 |
·主要仪器 | 第136页 |
·方法 | 第136-139页 |
·动物分组及处理 | 第136页 |
·脾细胞培养 | 第136-137页 |
·TNF-a活性测定 | 第137页 |
·IL-2和IL-6活性测定 | 第137页 |
·mRNA的抽提 | 第137页 |
·逆转录(RT)反应合成cDNA | 第137-138页 |
·引物设计 | 第138页 |
·PCR扩增 | 第138-139页 |
·PCR产物定量 | 第139页 |
·数据统计分析 | 第139页 |
2 结果与分析 | 第139-142页 |
·PRPG对荷瘤鼠脾细胞分泌细胞因子TNF-a的影响 | 第139-140页 |
·PRPG对荷瘤鼠脾细胞分泌细胞因子IL-2的影响 | 第140-141页 |
·PRPG对荷瘤鼠脾细胞分泌细胞因子IL-6的影响 | 第141-142页 |
3 讨论 | 第142-144页 |
第八章 结论 | 第144-146页 |
参考文献 | 第146-155页 |
致谢 | 第155-156页 |
附录 | 第156-159页 |