| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第8-9页 |
| 1.前言 | 第9-21页 |
| ·研究意义 | 第9-10页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸的失活机理 | 第10-11页 |
| ·SAM稳定性盐 | 第11-13页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸的制备 | 第13页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸在体内的生理作用 | 第13-14页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸的应用 | 第14页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸在体内的代谢 | 第14-16页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因 | 第16-21页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因水平的研究 | 第16-18页 |
| ·大肠杆菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶结构研究 | 第18-21页 |
| 2.材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23-24页 |
| ·PCR引物 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-31页 |
| ·基因组的提取 | 第24页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第24-25页 |
| ·PCR产物纯化与酶切 | 第25-26页 |
| ·SAM合成酶表达载体的构建 | 第26页 |
| ·克隆鉴定 | 第26页 |
| ·SAM合成酶的诱导表达 | 第26页 |
| ·序列测定、分析及系统发育树的构建 | 第26-27页 |
| ·SAM合成酶的纯化 | 第27页 |
| ·纸层析法测定酶活性 | 第27-28页 |
| ·高效液相色谱法酶活性比较 | 第28-29页 |
| ·SAM7的定点诱变 | 第29-31页 |
| 3.结果与分析 | 第31-47页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·SAM合成酶基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·SAM合成酶基因表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的EcoRⅠ与BamHⅠ双酶切 | 第33-34页 |
| ·基因序列测定与比较 | 第34-40页 |
| ·SAM合成酶的诱导表达 | 第40-42页 |
| ·SAM合成酶蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·纸层析测定SAM合成酶活性 | 第42-43页 |
| ·纸层析法测定SAM7最适反应条件 | 第43-44页 |
| ·HPLC测定SAM7最适反应条件 | 第44-45页 |
| ·SAM2,SAM5,SAM7,SAM10,SAM11活性比较 | 第45-46页 |
| ·SAM7的定点诱变 | 第46-47页 |
| 4.讨论 | 第47-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56页 |