中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-46页 |
第一节 松材线虫及其危害 | 第12-17页 |
1 分类地位 | 第12页 |
2 形态特征 | 第12页 |
3 起源与分布 | 第12-13页 |
4 生活史 | 第13页 |
5 寄主范围及为害症状 | 第13页 |
6 防治 | 第13-17页 |
第二节 线虫耐寒性研究进展 | 第17-23页 |
1 耐寒性的测定 | 第17-18页 |
2 线虫的耐寒对策 | 第18-19页 |
3 线虫的耐寒机制 | 第19-21页 |
4 研究意义及展望 | 第21-23页 |
第三节 耐热性研究概况 | 第23-28页 |
1 产生热伤害的原因 | 第23-24页 |
2 耐热性获得 | 第24-25页 |
3 耐热性机制 | 第25-26页 |
4 秀丽杆线虫热激蛋白的表达 | 第26-28页 |
第四节 线虫RNA干涉技术研究现状 | 第28-33页 |
1 RNAi的发现 | 第28-29页 |
2 C.elegans的RNAi研究 | 第29-30页 |
3 植物寄生线虫的RNAi研究 | 第30-32页 |
4 动物寄生性线虫的RNAi研究 | 第32-33页 |
第五节 本研究的立题背景与技术路线 | 第33-35页 |
1 立题背景 | 第33-34页 |
2 试验技术路线 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-46页 |
第二章 松材线虫对温度逆境的适应能力分析 | 第46-52页 |
1 材料与方法 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-49页 |
·松材线虫的低温存活能力 | 第47-48页 |
·松材线虫的高温存活能力 | 第48页 |
·不同温度预处理对耐热性的影响 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-52页 |
第三章 海藻糖与松材线虫耐热性的关系分析 | 第52-59页 |
1 材料与方法 | 第53-54页 |
2 结果与分析 | 第54-55页 |
·海藻糖的标准曲线 | 第54页 |
·线虫体内海藻糖的测定 | 第54-55页 |
·海藻糖含量和耐热力相关性分析 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
第四章 松材线虫Hsp70基因的克隆与原核表达 | 第59-85页 |
1 材料与方法 | 第59-70页 |
2 结果与分析 | 第70-81页 |
·RNA的质量 | 第70-71页 |
·内参检测 | 第71-72页 |
·Hsp70基因部分片断扩增 | 第72页 |
·Hsp70基因RACE结果 | 第72-75页 |
·序列分析 | 第75-78页 |
·进化分析 | 第78-79页 |
·Bx-hsp-1的开放阅读框区域克隆 | 第79-80页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第80-81页 |
·目的融合蛋白的表达 | 第81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
第五章 松材线虫Hsp70基因的功能鉴定 | 第85-103页 |
1 材料与方法 | 第85-93页 |
2 结果与分析 | 第93-99页 |
·异源表达Hsp70基因提高大肠杆菌的耐热力 | 第93-94页 |
·标准曲线的建立 | 第94-95页 |
·Hsp70 mRNA水平变化分析 | 第95页 |
·PCR扩增结果及dsRNA表达载体的构建 | 第95-96页 |
·dsRNA的诱导及鉴定 | 第96-97页 |
·Hsp70基因的RNAi表型鉴定 | 第97-99页 |
3 讨论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-103页 |
第六章 利用RNAi技术研究松材线虫纤维素酶基因(Bx-eng-1)的功能 | 第103-115页 |
1 材料与方法 | 第103-108页 |
2 结果与分析 | 第108-112页 |
·浸泡体系的建立 | 第108-109页 |
·dsRNA的合成 | 第109页 |
·RT-PCR鉴定Bx-eng-1的mRNA丰度 | 第109-110页 |
·Bx-eng-1 dsRNA对松材线虫体内纤维素酶活性的影响 | 第110-111页 |
·Bx-eng-1基因的RNAi表型鉴定 | 第111-112页 |
3 讨论 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-115页 |
第七章 主要结论与创新之处 | 第115-117页 |
1 主要结论 | 第115页 |
2 创新之处 | 第115-116页 |
3 下一步设想 | 第116-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
本人简历 | 第118页 |