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芪合酶基因酵母表达载体的构建及其表达研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 文献综述第10-24页
   ·芪合酶的研究进展第10-13页
     ·芪合酶的酶学性质第10-11页
     ·芪合酶的蛋白质结构第11-12页
     ·芪合酶基因的研究进展第12-13页
   ·白藜芦醇的研究进展第13-15页
     ·白藜芦醇的结构和理化性质第13页
     ·白藜芦醇的分离纯化第13页
     ·白藜芦醇分布及其含量第13-14页
     ·白藜芦醇的生物活性功能第14-15页
       ·抗癌、抗诱变作用第14页
       ·抗增殖、诱导细胞凋亡的作用第14页
       ·抗氧化和自由基作用第14页
       ·抗菌作用第14-15页
       ·降血脂和保护心血管的作用第15页
       ·雌激素调节作用第15页
   ·酿酒酵母表达系统的研究概况第15-20页
     ·酿酒酵母表达系统的宿主-酿酒酵母菌第16页
     ·酿酒酵母表达系统中在载体的种类第16-17页
       ·YIp(yeast integration plasmid)型载体第16-17页
       ·YEp(yeast episomal plasmid)型载体第17页
     ·外源基因在酿酒酵母中的表达第17-20页
   ·酵母基因工程技术在饲料资源开发中的应用第20-24页
     ·酵母基因工程第20-21页
     ·利用酵母基因工程菌开发饲料资源的优点第21页
     ·酵母基因工程菌在饲料生产中的研究与应用第21-23页
       ·利用酵母基因工程菌表达植酸酶第21-22页
       ·利用酵母基因工程菌表达鱼生长激素第22-23页
       ·利用酵母基因工程菌表达抗菌肽第23页
     ·前景第23-24页
第二章 试验研究第24-48页
   ·前言第24页
   ·材料与方法第24-37页
     ·试验材料第24-27页
       ·菌株第24页
       ·质粒载体及目的基因第24-25页
       ·酶及生化试剂第25页
       ·模板和引物第25页
       ·仪器设备第25页
       ·抗生素的配制第25页
       ·质粒提取(碱裂解法)试剂第25-26页
       ·酵母菌感受态制备试剂第26页
       ·电极缓冲液的配制第26页
       ·菌体破碎缓冲液第26页
       ·SDS-PAGE 蛋白电泳试剂第26-27页
       ·培养基第27页
     ·试验方法第27-37页
       ·芪合酶基因的PCR 扩增第27-28页
       ·PCR 扩增产物的回收纯化第28页
       ·PCR 扩增产物的克隆第28-31页
       ·测序及序列分析第31页
       ·芪合酶基因酵母表达载体的构建及鉴定第31-36页
       ·重组菌遗传稳定性检测第36页
       ·芪合酶基因在酿酒酵母中的诱导表达第36页
       ·表达产物的SDS-PAGE 电泳第36-37页
   ·结果与分析第37-44页
     ·芪合酶基因的PCR 扩增第37-38页
     ·芪合酶基因的克隆与序列分析第38-41页
       ·测序结果第38-39页
       ·序列的同源比对第39-41页
       ·由芪合酶基因序列推测的氨基酸序列及其同源性比对第41页
     ·芪合酶基因酵母表达载体的构建及鉴定第41-42页
     ·酿酒酵母的生长曲线第42-43页
     ·重组菌遗传稳定性检测第43页
     ·pYES6/CT-STS 在酿酒酵母INVSc1 中的诱导表达及SDS-PAGE 电泳第43-44页
   ·讨论第44-46页
   ·结论第46-48页
参考文献第48-56页
附录第56-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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