| 第一部分 大黑花芸豆(Phaseolus multiflorus.Willd)凝集素的分离、纯化和性质研究 | 第1-38页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1.材料和试剂 | 第12-13页 |
| ·材料 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12-13页 |
| ·仪器与设备 | 第13页 |
| 2.方法 | 第13-18页 |
| ·大黑花芸豆凝集素(PML)的分离纯化 | 第13-15页 |
| ·PML的粗提 | 第13-14页 |
| ·PML的分离纯化步骤 | 第14页 |
| ·DEAE—Sepharose离子交换层析 | 第14页 |
| ·CM—Sepharose离子交换层析 | 第14页 |
| ·Sephacryl S—200分子筛层析 | 第14页 |
| ·PML纯度鉴定 | 第14-15页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第15页 |
| ·Sephacrlyl S-100分子筛层析测定表观分子量 | 第15页 |
| ·PML活性的测定方法 | 第15页 |
| ·糖抑制实验 | 第15-16页 |
| ·温度对凝血活性的影响 | 第16页 |
| ·酸碱度对凝血活性的影响 | 第16页 |
| ·变性剂对PML凝血活性的影响 | 第16页 |
| ·不同浓度盐酸胍对PML凝血活性的影响 | 第16页 |
| ·不同浓度脲对PML凝血活性的影响 | 第16页 |
| ·色氨酸残基的修饰 | 第16-17页 |
| ·PML荧光光谱分析 | 第17-18页 |
| ·天然态PML样品荧光光谱 | 第17页 |
| ·不同温度处理对PML荧光光谱的影响 | 第17页 |
| ·不同酸碱环境对PML荧光光谱的影响 | 第17页 |
| ·Trp残基化学修饰后PML的荧光光谱 | 第17页 |
| ·PML的荧光淬灭研究 | 第17-18页 |
| ·变性剂对PML荧光光谱的影响 | 第18页 |
| ·盐酸胍对PML荧光光谱的影响 | 第18页 |
| ·不同浓度脲对PML荧光光谱的影响 | 第18页 |
| 3.结果 | 第18-33页 |
| ·PML的分离纯化 | 第18-19页 |
| ·PML的性质测定结果 | 第19-33页 |
| ·PML的纯度和分子量测定 | 第19-20页 |
| ·糖抑制实验结果 | 第20-22页 |
| ·温度和酸碱度对PML凝血活性的影响 | 第22-23页 |
| ·PML的荧光光谱研究 | 第23-33页 |
| ·天然状态下PML的荧光光谱 | 第23-24页 |
| ·不同温度条件下PML的荧光光谱 | 第24-25页 |
| ·不同酸碱度对PML荧光光谱的影响 | 第25-26页 |
| ·色氨酸残基的化学修饰对PML荧光光谱的影响 | 第26-27页 |
| ·PML的荧光淬灭研究 | 第27-30页 |
| ·变性剂对PML荧光光谱的影响 | 第30-33页 |
| 4.讨论 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 第二部分 玉竹凝集素(Polygonatum odoratum(Mill.)Druce lectin,POL)的基因克隆及序列分析 | 第38-64页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| Abstract | 第39-41页 |
| 引言 | 第41-42页 |
| 1.材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料、菌株及常用质粒载体 | 第42页 |
| ·试剂盒、酶 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·药品 | 第43页 |
| 2.方法 | 第43-51页 |
| ·玉竹总RNA的提取 | 第43页 |
| ·反转录及聚合链式扩增法 | 第43-51页 |
| ·3'RACE PCR反应 | 第43-46页 |
| ·PCR扩增片段的回收、连接 | 第46页 |
| ·PCR扩增片段的回收 | 第46页 |
| ·PCR扩增片段的连接 | 第46页 |
| ·PCR扩增片段的转化和鉴定 | 第46-47页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·转化 | 第46-47页 |
| ·测序和序列分析 | 第47页 |
| ·5'RACE PCR反应 | 第47-51页 |
| 3 结果和分析 | 第51-59页 |
| ·玉竹总RNA的提取 | 第51页 |
| ·玉竹凝集素cDNA基因的克隆 | 第51-53页 |
| ·玉竹凝集素cDNA基因3’末端片段的克隆 | 第51-52页 |
| ·玉竹凝集素cDNA基因5’末端片段的克隆 | 第52-53页 |
| ·玉竹凝集素基因全长核甘酸序列及推导的蛋白序列的分析 | 第53-54页 |
| ·POL成熟蛋白编码氨基酸序列的同源性分析 | 第54-55页 |
| ·POL蛋白的性质与结构的预测 | 第55-59页 |
| ·蛋白质分子量、等电点 | 第55页 |
| ·蛋白质的氨基酸组成 | 第55-56页 |
| ·POL成熟蛋白序列中结构域的预测分析 | 第56页 |
| ·POL专一性结合糖基化位点盒分析 | 第56-57页 |
| ·POL成熟蛋白质的二级结构预测 | 第57-58页 |
| ·POL成熟蛋白质的高级结构预测 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 文献综述 | 第64-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
