| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-25页 |
| ·体细胞核移植技术的应用价值 | 第13-17页 |
| ·体细胞克隆技术在畜牧业生产中的应用 | 第13-14页 |
| ·体细胞克隆技术对转基因动物生产的影响 | 第14页 |
| ·体细胞克隆技术在医疗临床上的可能应用 | 第14-16页 |
| ·体细胞克隆技术对动物保护的启示 | 第16页 |
| ·体细胞克隆对帮助阐明一些生物学基础问题的价值 | 第16-17页 |
| ·其它 | 第17页 |
| ·体细胞克隆的方法研究进展 | 第17-22页 |
| ·胞质受体的选择 | 第17-18页 |
| ·供体细胞的选择 | 第18-19页 |
| ·克隆胚胎的构建方法 | 第19-21页 |
| ·克隆胚胎的活化 | 第21-22页 |
| ·克隆动物重编程研究进展 | 第22-23页 |
| ·供体细胞核膜破裂和PCC | 第22页 |
| ·组蛋白H1的变化 | 第22页 |
| ·DNA甲基化和遗传印记的变化 | 第22-23页 |
| ·哺乳动物异种克隆的研究进展 | 第23页 |
| ·面临问题与前景 | 第23-25页 |
| 2 实验材料 | 第25-27页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·耗材 | 第26-27页 |
| 3 实验方法 | 第27-32页 |
| ·猪卵母细胞的体外成熟 | 第27-28页 |
| ·卵泡液的制备 | 第27-28页 |
| ·成熟培养后COCs上卵丘细胞的去除 | 第28页 |
| ·Hoechst染色观察成熟效果 | 第28页 |
| ·卵母细胞孤雌激活 | 第28-29页 |
| ·电刺激 | 第28-29页 |
| ·化学激活 | 第29页 |
| ·孤雌激活后胚胎培养 | 第29页 |
| ·Hoechst33342染色计数 | 第29页 |
| ·克隆胚的构建与体外发育 | 第29-31页 |
| ·体细胞核移植 | 第29-30页 |
| ·融合与激活 | 第30-31页 |
| ·胚胎培养 | 第31页 |
| ·统计分析 | 第31-32页 |
| 4 结果 | 第32-46页 |
| ·猪卵母细胞的体外成熟实验结果 | 第32-36页 |
| ·卵泡大小不同对卵母细胞体外成熟影响 | 第32页 |
| ·COCs分级对卵母细胞成熟影响 | 第32-33页 |
| ·不同培养基对卵母细胞体外培养的影响 | 第33页 |
| ·不同培养时间对卵母细胞体外成熟的影响 | 第33页 |
| ·激素对卵母细胞体外成熟影响 | 第33-34页 |
| ·卵泡液对猪卵母细胞体外成熟影响 | 第34-36页 |
| ·猪体外成熟卵母细胞的孤雌激活的结果 | 第36-40页 |
| ·不同电激活参数与激活液对孤雌激活效果的影响 | 第36-37页 |
| ·电激活联合化学处理对孤雌激活效率的影响 | 第37页 |
| ·离子霉素联合6-DMAP处理对体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响 | 第37-38页 |
| ·不同卵龄的体外成熟卵母细胞进行孤雌激活比较 | 第38-40页 |
| ·克隆胚的构建与体外发育的结果 | 第40-46页 |
| ·不同来源供体细胞构建重构胚后期发育效果的比较 | 第40-41页 |
| ·不同传代次数的供体成纤维细胞对重构胚后期发育的影响 | 第41页 |
| ·不同去核方法对去核率与重构胚后期发育的影响 | 第41-44页 |
| ·融合参数对重构胚后期发育的影响 | 第44-46页 |
| 5 讨论 | 第46-55页 |
| ·关于影响猪卵母细胞体外成熟因素的讨论 | 第46-48页 |
| ·卵母细胞自身因素对卵母细胞体外成熟影响 | 第46页 |
| ·成熟培养液对体外成熟的影响 | 第46-48页 |
| ·关于影响猪体外成熟卵母细胞孤雌激活的讨论 | 第48-52页 |
| ·关于不同孤雌激活体系 | 第48-51页 |
| ·卵龄对孤雌激活的影响 | 第51-52页 |
| ·影响克隆胚的构建与体外发育因素的讨论 | 第52-55页 |
| ·供体细胞系对构建重构胚的影响 | 第52-53页 |
| ·关于不同的去核方法 | 第53-54页 |
| ·不同培养体系 | 第54-55页 |
| 6 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录Ⅰ 部分试剂配方 | 第67-69页 |
| 附录Ⅱ 供体细胞系图片 | 第69-70页 |
| 附录Ⅲ 在读期间发表论文的情况 | 第70页 |