摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-34页 |
1 玉米纹枯病调查研究 | 第11-18页 |
·玉米纹枯病的发生 | 第11-12页 |
·病原菌的种类及其融合群 | 第12页 |
·玉米纹枯病病菌病害的组织病理学 | 第12-14页 |
·病原菌的致病机制 | 第14-15页 |
·玉米纹枯病的防治 | 第15页 |
·玉米纹枯病抗性机制研究 | 第15-18页 |
·玉米抗纹枯病生理学与生物化学研究 | 第15-16页 |
·玉米抗纹枯病的种质资源筛选和抗性QTL分子标记 | 第16-17页 |
·玉米纹枯病抗性分子生物学研究 | 第17-18页 |
2 植物抗病性研究 | 第18-31页 |
·植物抗病性概述 | 第18-20页 |
·植物抗病分子机制 | 第20-31页 |
·植物-病原物互作的遗传模式 | 第20-21页 |
·与病原菌亲和因子有关的抗互作模式(Vir/R模式) | 第20页 |
·与病原菌非亲和因子有关的互作模式(Avr/R模式) | 第20-21页 |
·病原物无毒基因(Avirulence gene) | 第21-22页 |
·植物抗病基因(Resistance gene) | 第22-24页 |
·植物防卫反应 | 第24-25页 |
·防卫反应信号传导 | 第25-31页 |
·活性氧信号分子(ROS) | 第26-27页 |
·一氧化氮(NO)信号分子 | 第27-29页 |
·水杨酸(SA)信号传导途径 | 第29-30页 |
·乙烯和茉莉酸信号传导途径 | 第30-31页 |
3 cDNA-AFLP技术原理及应用 | 第31-33页 |
4 研究目的与意义 | 第33-34页 |
第二部分 材料与方法 | 第34-42页 |
1.实验材料 | 第34页 |
·供试玉米纹枯病菌株及玉米材料 | 第34页 |
·菌株培养 | 第34页 |
·供试玉米材料种植、接种鉴定及取样 | 第34页 |
·用于提取RNA的材料的处理 | 第34页 |
·用于抗性生理生化检测材料的处理 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-42页 |
·cDNA-AFLP分离抗性相关基因 | 第34-40页 |
·RNA提取与cDNA合成 | 第35页 |
·接头与引物准备 | 第35-36页 |
·样品cDNA双酶切 | 第36-37页 |
·酶切样品与接头的连接 | 第37页 |
·cDNA片段的预扩增 | 第37页 |
·AFLP的选择性扩增 | 第37-38页 |
·制胶与电泳 | 第38-39页 |
·银染 | 第39页 |
·差异cDNA片段回收与克隆 | 第39页 |
·序列分析 | 第39-40页 |
·防卫酶系活性检测 | 第40-42页 |
·POD、CAT、SOD、APX及PAL粗酶液制备 | 第40页 |
·POD、CAT、SOD、APX及PAL活性分析 | 第40-42页 |
第三部分 结果与分析 | 第42-56页 |
1 病原菌培养 | 第42页 |
2 接菌后植株发病情况调查 | 第42页 |
3 RNA的提取和检测 | 第42-43页 |
4 cDNA-AFLP表达谱分析 | 第43-50页 |
·双链cDNA合成、双酶切与接头连接 | 第43-44页 |
·预扩增 | 第44页 |
·选择性扩增 | 第44-45页 |
·差异片断回收、克隆、测序 | 第45-46页 |
·测序结果生物信息学功能比对分析 | 第46-50页 |
5 防卫酶系时空动态分析 | 第50-56页 |
·过氧化物酶(POD)活性变化分析 | 第50-51页 |
·过氧化氢酶(CAT)活性变化分析 | 第51-52页 |
·超氧化物酶(SOD)活性变化分析 | 第52-53页 |
·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化分R析 | 第53-54页 |
·抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性变化分析 | 第54-56页 |
第四部分 讨论与结论 | 第56-64页 |
1 讨论 | 第56-62页 |
·cDNA-AFLP技术的利用 | 第56-57页 |
·玉米抗纹枯病分子机制初探 | 第57-61页 |
·蛋白质可逆磷酸化在植物-病原物互作中的作用 | 第57-59页 |
·过敏反应与细胞衰老在纹枯病诱导的抗性机制中的作用 | 第59-60页 |
·植物呼吸与抗病防御反应 | 第60页 |
·通过cDNA-AFLP获得的其他抗病相关基因 | 第60-61页 |
·POD、CAT、SOD、APX和PAL与玉米纹枯病抗性的时空动态讨论 | 第61-62页 |
2 结论与展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
附录 | 第72-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第77页 |