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副溶血弧菌海产品分离株的致病性和主要毒力基因结构分析

Dedication第1-5页
Acknowledgements第5-7页
Certification第7-8页
Source of projects第8-9页
Table of contents第9-13页
Abstract第13-17页
Abstract(Chinese)第17-20页
Introduction第20-23页
Part Ⅰ Literature review第23-57页
 Chapter Ⅰ Vibrio parahaemolyticus as a foodborne pathogen第24-40页
   ·Biological and pathogenic features第25-27页
     ·General characteristics of Vibrio parahaemolyticus第25页
     ·Antigenic structures第25-26页
     ·Major virulence factors第26-27页
   ·Distribution第27-28页
     ·In marine environments第27-28页
     ·In seafoods第28页
   ·Detection of Vibrio parahaemolyticus第28-32页
     ·Conventional method第28-30页
     ·Polymerase chain reaction(PCR)第30-31页
     ·DNA hybridization第31-32页
   ·Incidence of foodborne Vibrio parahaemolyticus infections第32-34页
     ·Incidence in Asia第32页
     ·In cidence in the United States第32-33页
     ·Incidence in European and African countries第33-34页
   ·Emerging of new pandemic clone of Vibrio parahaemolyticus第34页
   ·Conclusion第34页
  References第34-40页
 Chapter Ⅱ Genome structures and molecular typing of Vibrio parahaemolyticus第40-57页
   ·Genome structures of Vibrio parahaemolyticus第40-47页
     ·Major virulence genes第42-45页
     ·Virulence associated genes第45-47页
   ·Molecular typing of Vibrio parahaemolyticus第47-51页
     ·Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE)第47-49页
     ·Restriction fragment 1 ength polymorphism (RFLP)第49页
     ·Ribotyping)第49-50页
     ·Random amplified polymorphism DNA (RAPD)-PCR第50-51页
     ·Enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC)-PCR第51页
     ·Multi locus sequence typing (MLST)第51页
   ·Conclusion第51-52页
  References第52-57页
Part Ⅱ Experimental section第57-129页
 Chapter Ⅲ Prevalence of Vibrio parahaemolyticus in seafoods in Zhejiang province第58-68页
  Abstract第58页
   ·Introduction第58-59页
   ·Materials第59页
     ·Bacterial strains第59页
     ·Culture medium and reagents第59页
   ·Methods第59-63页
     ·Collection and transportation of samples第59-61页
     ·Preliminary identification of Vibrio parahaemolyticus第61页
     ·Identification of Vibrio parahaemolyticus by duplex PCR第61-63页
   ·Results第63-65页
   ·Discussion第65-66页
  References第66-68页
 Chapter Ⅳ Molecular typing of Vibrio parahaemolyticus isolates from clinical and seafood by pulse-fieldgelelectrophoresis第68-80页
  Abstract第68页
   ·Introduction第68-69页
   ·Materials第69-71页
     ·Bacterial strains and culture condition第69页
     ·Reagents第69-71页
     ·Instruments第71页
   ·Methods第71-75页
     ·Preparation of DNA into agarose第71-72页
     ·Genomic DNA extraction第72-73页
     ·Separation of DNA fragments第73-75页
   ·Results第75-76页
   ·Discussion第76-78页
  References第78-80页
 Chapter Ⅴ Occurrence of pandemic clones of Vibrio parahaemolyticus isolates第80-96页
  Abstract第80页
   ·Introduction第80-81页
   ·Materials第81-83页
     ·Bacterial strains and culture condition第81-82页
     ·Culture medium and reagents第82-83页
   ·Methods第83-85页
     ·Determination of Kanagawa phenomenon第83页
     ·Determination of urease production第83-84页
     ·Detection of tdh and trh genes第84页
     ·Detection of virulence associated genes第84-85页
     ·DNA sequencing of partial toxRS gene fragments第85页
     ·Serotyping第85页
   ·Results第85-90页
     ·Kanagawa phenomenon phenotype第85-86页
     ·Urease production第86-87页
     ·Prevalence of virulence and virulence associated genes第87页
     ·Nucleotide sequence analysis第87-90页
     ·Serotypes第90页
   ·Discussion第90-93页
  References第93-96页
 Chapter Ⅵ Comparison of pathogenicity of selected Vibrio parahaemolyticus isolates第96-113页
  Abstract第96页
   ·Introduction第96-97页
   ·Materials第97-98页
     ·Bacterial strains and culture condition第97-98页
     ·Reagents第98页
     ·Animals and cell lines第98页
   ·Methods第98-102页
     ·Enteropathogenicity assay第98-99页
     ·Virulence to mice第99-100页
     ·Adhesion assay第100-101页
     ·Cytotoxicity assay第101-102页
     ·Statistical analysis第102页
   ·Results第102-108页
     ·Enteropathogenicity in suckling mice第102-104页
     ·Virulence to mice第104-105页
     ·Adherence to HeLa and Caco-2 cells第105-106页
     ·Cytotoxic activity in HeLa cells第106-108页
   ·Discussion第108-109页
  References第109-113页
 Chapter Ⅷ Genetic characterization of tdh-adjacent loci in tdh-positive Vibrio parahaemolyticus isolates from seafoods第113-129页
  Abstract第113页
   ·Introduction第113-114页
   ·Materials第114-115页
     ·Bacterial strains and culture condition第114-115页
     ·Reagents第115页
   ·Methods第115-120页
     ·Preparation of genomic DNA第115-117页
     ·Detection of full-lengh tdh gene and tdh-adjacent loci第117页
     ·DNA sequencing of full-lengh tdh gene第117页
     ·DNA sequencing of tdh-adjacent loci第117-118页
     ·Amplification of 5'and 3'end regions of tdh gene第118-120页
   ·Results第120-125页
     ·Distribution of different agments in tdh-adjacent locus第120-121页
     ·Full-lengh tdh sequence analysis第121-123页
     ·Sequence analysis of tdh-adjacent locus第123-125页
   ·Discussion第125-127页
  Refernces第127-129页
Conclusions and perspectives第129-130页
攻读博士期间的发表-已投稿或者撰稿的学术论文第130页

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