| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 综述：SUMO化修饰及其生物学功能 | 第11-42页 |
| 1.蛋白质的翻译后修饰 | 第12-13页 |
| 2.SUMO是一类泛素家族的修饰蛋白质 | 第13-17页 |
| 3.SUMO化修饰 | 第17-25页 |
| ·SUMO化修饰的生化反应过程及酶 | 第18-20页 |
| ·SUMO化中底物的选择机制 | 第20-23页 |
| ·对SUMO化修饰的调控 | 第23-24页 |
| ·SUMO化与泛素化过程的异同之处 | 第24-25页 |
| 4.SUMO化的生物学功能 | 第25-34页 |
| ·调节蛋白质的核质运输 | 第25-26页 |
| ·调节蛋白质在细胞内的定位 | 第26-28页 |
| ·转录活性调控 | 第28-29页 |
| ·拮抗泛素化 | 第29-30页 |
| ·细胞周期调控 | 第30-31页 |
| ·维持基因组完整性 | 第31-33页 |
| ·信号转导调控 | 第33-34页 |
| 5.SUMO化修饰对靶蛋白的调控机理 | 第34-35页 |
| ·与泛素化竞争以提高蛋白质稳定性 | 第34页 |
| ·调节蛋白质—蛋白质相互作用 | 第34页 |
| ·改变靶蛋白构象从而改变其功能 | 第34-35页 |
| 6.总结 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 第二章 SUMO-3 C47S的溶液结构测定及其与SUMO化路径中的缀合酶Ubc9的相互作用研究 | 第42-98页 |
| 第一部分：引言 | 第42-44页 |
| 第二部分：材料和方法 | 第44-64页 |
| 1.人SUMO-3 C47S蛋白基因的克隆 | 第44-47页 |
| ·目标基因的选取与获得 | 第44-45页 |
| ·PCR产物连入pMD 18-T载体进行目的片段的扩增 | 第45页 |
| ·载体pET-22b(+)的中量制备 | 第45-46页 |
| ·pET-22b(+)与pMD 18-T重组质粒的酶切,回收及pET-22b(+)与目标基因的连接 | 第46页 |
| ·将47位的Cys突变成Ser | 第46-47页 |
| 2.人SUMO-3 C47S蛋白质的表达与纯化 | 第47-48页 |
| 3.人SUMO-3 C47S蛋白质的稳定性研究 | 第48页 |
| 4.人Ubc9蛋白质的表达与纯化 | 第48-49页 |
| 5.蛋白质浓度的测定 | 第49-50页 |
| 6.NMR波谱解析人SUMO-3 C47S蛋白质的三维溶液空间结构 | 第50-60页 |
| ·~(15)N-标记和~(15)N,~(13)C双标记SUMO-3 C47S蛋白质的生产 | 第50页 |
| ·NMR实验与数据变换 | 第50-54页 |
| ·主链顺序认证及侧链化学位移的获得 | 第54-57页 |
| ·二级结构的确定 | 第57页 |
| ·三维结构计算 | 第57-60页 |
| 7.化学位移干扰实验 | 第60页 |
| 8.人SUMO-3 C47S与Ubc9相互作用时的复合物结构计算 | 第60-64页 |
| ·AIRs的定义 | 第61-62页 |
| ·HADDOCK计算 | 第62-63页 |
| ·数据分析 | 第63-64页 |
| 第三部分：结果和讨论 | 第64-95页 |
| 1.人SUMO-3 C47S蛋白基因的克隆 | 第64页 |
| 2.人SUMO-3 C47S蛋白质的表达和纯化 | 第64-66页 |
| 3.人SUMO-3 C47S蛋白质的稳定性研究 | 第66-67页 |
| 4.人Ubc9蛋白质的表达与纯化 | 第67-68页 |
| 5.NMR波谱解析人SUMO-3 C47S蛋白质的三维溶液结构 | 第68-81页 |
| ·SUMO-3 C47S化学位移的认证和二级结构预测 | 第68-74页 |
| ·SUMO-3 C47S结构计算 | 第74-77页 |
| ·SUMO-3 C47S的溶液结构 | 第77-78页 |
| ·SUMO-3 C47S与同源蛋白的序列和结构比较 | 第78-81页 |
| 6.SUMO-3 C47S的化学位移干扰实验 | 第81-83页 |
| 7.SUMO-3 C47S同Ubc9的相互作用表面 | 第83-85页 |
| 8.SUMO-3 C47S同Ubc9的复合物模型 | 第85-90页 |
| 9.复合物结构同自由态结构的比较 | 第90-92页 |
| 10.SUMO-E2相互作用时的蛋白质定向机制 | 第92-93页 |
| 11.总结 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 发表论文 | 第99页 |
| 学术会议 | 第99-131页 |
