中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
缩略词 | 第16-18页 |
前言 | 第18-72页 |
1. 人乳头瘤病毒及其体外感染模型的研究进展 | 第18-32页 |
·人乳头瘤病毒的概况 | 第18-19页 |
·人乳头瘤病毒的分子生物学特点 | 第19-24页 |
·人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展 | 第24-25页 |
·人乳头瘤病毒体外感染模型的研究进展 | 第25-32页 |
2. 昆虫细胞-杆状病毒表达系统 | 第32-54页 |
·杆状病毒的生物学特性 | 第32-41页 |
·昆虫细胞-杆状病毒表达系统的研究进展 | 第41-54页 |
3. 杆状病毒作为哺乳动物细胞基因转移载体的研究进展 | 第54-70页 |
·对杆状病毒与非宿主细胞关系的认识 | 第54-57页 |
·杆状病毒作为哺乳动物细胞基因转移载体的发展及初步应用 | 第57-68页 |
·杆状病毒载体与其它哺乳动物细胞病毒载体系统的比较 | 第68-70页 |
4. 本论文研究的思路、目的和意义 | 第70-72页 |
材料与方法 | 第72-91页 |
1. 材料 | 第72-78页 |
·主要仪器 | 第72-73页 |
·菌株、质粒、细胞株、病毒株 | 第73-75页 |
·试剂 | 第75页 |
·常用溶液与培养基配制 | 第75-78页 |
2. 方法 | 第78-91页 |
·分子生物学实验方法 | 第78-81页 |
·常规细胞生物学实验方法 | 第81-84页 |
·重组杆状病毒相关实验方法 | 第84-87页 |
·哺乳动物重组病毒实验方法 | 第87-88页 |
·免疫检测实验方法 | 第88-90页 |
·计算机辅助设计与分析 | 第90-91页 |
结果与分析 | 第91-143页 |
第一部分 杆状病毒对哺乳动物细胞基因转移的研究 | 第91-120页 |
1. 重组杆状病毒上清转导法的建立 | 第91-105页 |
·转移载体与重组杆状病毒的构建 | 第91-94页 |
·不同启动子引导的EGFP在昆虫细胞中的表达 | 第94-96页 |
·杆状病毒对哺乳动物细胞的基因转移 | 第96-100页 |
·应用病毒上清转导法对不同哺乳动物细胞进行基因转移 | 第100-104页 |
·杆状病毒上清转导法的初步应用 | 第104-105页 |
2. 重组杆状病毒上清转导法的进一步优化 | 第105-120页 |
·不同的稀释缓冲液和转导温度对基因转移和表达效率的影响 | 第106-110页 |
·丁酸钠对杆状病毒转导哺乳动物细胞的影响 | 第110-111页 |
·在杆状病毒对哺乳动物细胞基因转移中引入离心方法 | 第111-116页 |
·辅助感染VV-T7RP对报告基因表达的增强 | 第116-120页 |
第二部分 应用重组杆状病毒建立HPV16假病毒体外感染模型 | 第120-130页 |
1. 转移载体和重组杆状病毒的构建 | 第120-122页 |
2. HPV16假病毒的获得与鉴定 | 第122-125页 |
3. HPV16假病毒中和实验的建立 | 第125-127页 |
4. 应用HPV16假病毒筛选中和单抗 | 第127-128页 |
5. HPV16 VLP免疫小鼠多抗血清中和能力的检验 | 第128-130页 |
第三部分 快速高灵敏度测定重组杆状病毒滴度的方法 | 第130-143页 |
1. 设计思路 | 第130页 |
2. 转移载体和重组杆状病毒的构建 | 第130-132页 |
3. 不同类型表达元件表达活性的鉴定 | 第132-134页 |
4. 在哺乳动物细胞中快速测定重组杆状病毒滴度方法的建立和评估 | 第134-143页 |
讨论 | 第143-153页 |
1. 应用重组杆状病毒在哺乳动物细胞中构建HPV16假病毒 | 第143-144页 |
2. 重组杆状病毒对哺乳动物细胞快速、高效基因转移方法的建立 | 第144-146页 |
3. 对影响重组杆状病毒转导效率的一些环境因素的探讨 | 第146-148页 |
4. 重组杆状病毒对不同哺乳动物细胞的进入能力 | 第148-149页 |
5. 杆状病毒转导哺乳动物细胞的应用策略 | 第149-151页 |
6. 快速高灵敏度测定重组杆状病毒滴度方法的建立 | 第151-153页 |
小结与展望 | 第153-155页 |
参考文献 | 第155-174页 |
致谢 | 第174-175页 |
附录 | 第175-176页 |
一、在校期间发表论文 | 第175-176页 |
二、在校期间获得奖励 | 第176页 |