| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1.前言 | 第8-22页 |
| ·马铃薯Y病毒属病毒各功能蛋白的研究进展 | 第8-20页 |
| ·P1蛋白 | 第8-9页 |
| ·HC-Pro | 第9-11页 |
| ·P3和6K1蛋白 | 第11-12页 |
| ·CI蛋白 | 第12-14页 |
| ·6K2 | 第14页 |
| ·NIa | 第14-16页 |
| ·NIb蛋白 | 第16-17页 |
| ·外壳蛋白(CP) | 第17-20页 |
| ·番木瓜环斑病毒研究进展 | 第20-21页 |
| ·分子生物学研究 | 第20页 |
| ·克隆和转基因研究 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2.材料与方法 | 第22-29页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·病毒分离物 | 第22页 |
| ·载体和菌株 | 第22-23页 |
| ·试剂及酶类 | 第23页 |
| ·试验动物 | 第23页 |
| ·供试仪器 | 第23页 |
| ·引物 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·RNA的提取 | 第24页 |
| ·RNA的分析和定量 | 第24页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·克隆操作 | 第25-26页 |
| ·电泳及DNA片段的回收 | 第25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
| ·HC-Pro、NIb、CP基因的原核表达 | 第26-27页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第26页 |
| ·克隆子序列的测定及系统发育树的建立 | 第26页 |
| ·生物信息学分析 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第27页 |
| ·蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
| ·原核表达的HC-Pro、NIb、CP蛋白的抗血清制备 | 第27-29页 |
| ·抗原的制备 | 第27页 |
| ·免疫方案 | 第27页 |
| ·抗血清分离及保存 | 第27页 |
| ·间接ELISA测定抗血清效价 | 第27-28页 |
| ·Western blot检测抗血清的特异性 | 第28-29页 |
| 3.结果与分析 | 第29-48页 |
| ·PRSV RNA的提取 | 第29页 |
| ·HC-Pro、NIb和CP基因的RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·HC-Pro、NIb和CP基因的克隆和酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·HC-Pro、NIb和CP基因的原核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·HE-Pro、NIb和CP基因的序列测定及结果分析 | 第33-34页 |
| ·系统进化树的构建 | 第34-37页 |
| ·生物信息学分析 | 第37-44页 |
| ·蛋白理化参数预测与分析 | 第37页 |
| ·蛋白结构及功能域预测与分析 | 第37-44页 |
| ·HC-Pro、NIb和CP在BL21(DE3)中的表达 | 第44-46页 |
| ·抗血清的制备与效价测定 | 第46页 |
| ·Western-blot | 第46-48页 |
| 4 结论与讨论 | 第48-51页 |
| ·原核表达 | 第48页 |
| ·HC-Pro、NIb和CP蛋白的生物信息学 | 第48页 |
| ·PRSV-P起源探讨 | 第48-49页 |
| ·HC-Pro蛋白作为PTGS抑制蛋白的功能与应用前景探讨 | 第49-51页 |
| 小结 | 第51页 |
| 研究展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-64页 |
| 附录1 本论文中的缩写词及其中英文对照 | 第64-66页 |
| 附录2 测序序列 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
