| 摘 要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第5-6页 |
| 缩略词表(续) | 第6-7页 |
| 目 录 | 第7-9页 |
| 第一章 动物冠状病毒研究进展 | 第9-24页 |
| 1 动物冠状病毒概述 | 第9页 |
| 2 冠状病毒的一般生物学特性 | 第9-12页 |
| ·冠状病毒的分类地位及种类 | 第9-10页 |
| ·冠状病毒的基本特性 | 第10-11页 |
| ·冠状病毒的培养特性 | 第11页 |
| ·冠状病毒成员的血清分群状况 | 第11-12页 |
| 3 冠状病毒的分子生物学研究进展 | 第12-18页 |
| ·冠状病毒的基因组结构特点 | 第12-13页 |
| ·病毒的侵入过程 | 第13-14页 |
| ·病毒基因在宿主细胞内的表达，蛋白质的加工和成熟 | 第14-15页 |
| ·病毒颗粒的组装和释放 | 第15-16页 |
| ·冠状病毒全长cDNA 感染性克隆 | 第16-18页 |
| 4 动物冠状病毒流行病学 | 第18-19页 |
| 5 动物冠状病毒病的主要临床表现 | 第19-21页 |
| 6 动物冠状病毒病的诊断方法 | 第21-22页 |
| 7 动物冠状病毒防制 | 第22-24页 |
| 第二章 动物冠状病毒通用 RT-PCR 方法的建立及基因克隆分析 | 第24-35页 |
| 1 材料 | 第24-27页 |
| ·动物冠状病毒毒株 | 第24-25页 |
| ·菌种和质粒 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·主要溶液的配制 | 第26-27页 |
| ·通用引物 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-30页 |
| ·动物冠状病毒的纯化 | 第27页 |
| ·病毒 RNA 提取 | 第27页 |
| ·cDNA 的合成 | 第27-28页 |
| ·通用 PCR 反应的建立 | 第28页 |
| ·通用 PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第28页 |
| ·特异性试验 | 第28页 |
| ·敏感性试验 | 第28页 |
| ·通用性试验 | 第28页 |
| ·重复性试验 | 第28页 |
| ·通用 PCR 扩增产物的纯化和回收 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·PCR 产物与pGEM-T-easy 克隆载体的连接和转化 | 第29页 |
| ·阳性重组质粒的 PCR 鉴定 | 第29-30页 |
| ·不同冠状病毒基因克隆的序列测定 | 第30页 |
| ·冠状病毒不同基因片段克隆的核苷酸序列同源性比较以及进化树分析 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-32页 |
| 4 讨论 | 第32-35页 |
| 第三章 动物冠状病毒生物芯片的应用 | 第35-45页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-39页 |
| 3 结果 | 第39-43页 |
| ·接种冠状病毒的动物临床症状 | 第39页 |
| ·应用基因芯片对动物回归实验攻毒的组织样品检测 | 第39-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| ·基因芯片诊断技术与其他常规诊断方法的比较 | 第43页 |
| ·动物回归实验 | 第43-44页 |
| ·冠状病毒基因芯片的检测 | 第44-45页 |
| 第四章 犬冠状病毒 Tn449 株纤突蛋白基因的克隆、序列分析及表达载体的构建 | 第45-54页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| 2 方法 | 第46-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-51页 |
| ·犬冠状病毒 S 基因RT-PCR 扩增及鉴定 | 第49页 |
| ·CCV S 基因重组质粒PCR 鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组质粒序列测定 | 第50页 |
| ·序列分析 | 第50-51页 |
| ·CCV S 基因表达质粒的PCR 鉴定和酶切鉴定 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·CCV S 基因的变异研究 | 第51-52页 |
| ·CCV S 基因研究意义 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录一 通用引物扩增片断克隆测序结果 | 第61-63页 |
| 附录二 基因芯片对不同动物冠状病毒攻毒阳性组织样品部分检测的结果 | 第63-65页 |
| 附录三 CCV S 基因克隆测序结果及表达载体测序结果 | 第65-67页 |
| 个 人 简 介 | 第67-68页 |
| 导师简介 | 第68-69页 |
