| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-25页 |
| ·单纯疱疹病毒Ⅱ型的分子生物学研究进展 | 第12-13页 |
| ·病毒形态和结构 | 第12页 |
| ·基因组结构 | 第12-13页 |
| ·生物学性状 | 第13页 |
| ·单纯疱疹病毒Ⅱ型感染及其治疗现状 | 第13-16页 |
| ·感染特性 | 第13-14页 |
| ·流行特点及临床表现 | 第14-15页 |
| ·HSV-2感染的治疗及存在问题 | 第15页 |
| ·疫苗一预防和治疗GH最有前途的手段之一 | 第15-16页 |
| ·HSV-2疫苗的研究现状 | 第16-21页 |
| ·灭、减活疫苗 | 第16-17页 |
| ·载体疫苗 | 第17页 |
| ·复制限制性突变疫苗 | 第17-18页 |
| ·亚单位疫苗 | 第18-19页 |
| ·DNA疫苗—最有优势的HSV-2疫苗 | 第19-21页 |
| ·HSV-2 DNA疫苗的研究进展 | 第21-23页 |
| ·本课题的研究意义及主要内容 | 第23-25页 |
| 第二章 CTL表位gD DNA疫苗的构建及表达 | 第25-48页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·主要的仪器和设备 | 第25页 |
| ·菌株、细胞、质粒和载体 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-38页 |
| ·COS-7细胞的复苏 | 第27页 |
| ·COS-7细胞的传代培养 | 第27页 |
| ·gD片段的扩增 | 第27-29页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第29页 |
| ·PCR产物(gD目的基因片段)的纯化 | 第29-30页 |
| ·PCR产物及载体的酶切 | 第30页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第30页 |
| ·酶切产物连接 | 第30页 |
| ·连接产物(pVAX-gD)的双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·CTL表位双链DNA的合成 | 第31页 |
| ·CTL表位和重组质粒pVAX-gD的连接 | 第31-32页 |
| ·生组质粒pVAX-gD-CTL转化感受态细胞及质粒的抽提 | 第32-33页 |
| ·重组质粒pVAX-gD-CTL的鉴定 | 第33-34页 |
| ·生组质粒pVAX-gD-CTL转染COS-7细胞 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34-36页 |
| ·免疫组化 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE和Western-blotting | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-45页 |
| ·CTL表位重组DNA疫苗的构建 | 第38-41页 |
| ·RT-PCR鉴定gD转录 | 第41-43页 |
| ·免疫组化 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE和Western-blot结果 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·pVAX1-DNA疫苗的理想载体 | 第45-46页 |
| ·脂质体介导转染 | 第46页 |
| ·优势片段联合克隆 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 CTL表位gD DNA疫苗免疫学性质研究 | 第48-63页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料与设备 | 第48-49页 |
| ·主要仪器设备 | 第48页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·小鼠眼眶动脉及静脉丛采血 | 第49页 |
| ·免疫方法 | 第49页 |
| ·间接ELISA检测血清IgG | 第49-50页 |
| ·间接ELISA检测血清INF-γ | 第50页 |
| ·间接ELISA检测血清IL-4 | 第50页 |
| ·脾细胞悬液的制备 | 第50-51页 |
| ·MTT法测脾淋巴细胞增殖 | 第51页 |
| ·CD4+、CD8+T细胞亚群测定 | 第51页 |
| ·CTL活性测定 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-59页 |
| ·免疫小鼠IgG检测 | 第52-53页 |
| ·免疫小鼠INF-γ检测 | 第53-54页 |
| ·免疫小鼠IL-4检测 | 第54-55页 |
| ·脾淋巴胞增殖测定 | 第55-56页 |
| ·CD4+及CD8+T细胞亚群分析 | 第56-58页 |
| ·CTL活性测定 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·小鼠免疫时间和剂量的选择 | 第59-60页 |
| ·CTL活性检测机理 | 第60页 |
| ·重组DNA疫苗(pVAX-gD-CTL)优势 | 第60-61页 |
| ·本章小结 | 第61-63页 |
| 结论与展望 | 第63-66页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 创新之处 | 第64页 |
| 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 英文缩略词表 | 第72-74页 |
| 攻读学位期间成果及论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 原创性声明 | 第76页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第76页 |
