1 引言 | 第1-12页 |
2 材料与方法 | 第12-21页 |
·材料 | 第12-14页 |
·试验材料 | 第12页 |
·主要仪器与设备 | 第12页 |
·主要试剂 | 第12页 |
·所用引物 | 第12-14页 |
·植原体PCR检测所用引物 | 第12页 |
·引物和接头序列 | 第12-14页 |
·试验方法 | 第14-21页 |
·材料准备 | 第14页 |
·植原体 PCR检测 | 第14页 |
·RNA提取及鉴定 | 第14-16页 |
·创造无菌、无 RNase的环境条件 | 第14-15页 |
·RNA的提取 | 第15页 |
·RNA的纯化 | 第15-16页 |
·RNA的纯度、完整性及浓度检测 | 第16页 |
·引物和接头的配制 | 第16-17页 |
·引物的准备 | 第16页 |
·接头的准备 | 第16-17页 |
·cDNA片段的获得 | 第17-18页 |
·逆转录体系 | 第17页 |
·cDNA第二链的合成 | 第17-18页 |
·提纯cDNA片断 | 第18页 |
·AFLP体系 | 第18-19页 |
·聚丙烯酸氨凝胶电泳及银染 | 第19-21页 |
3 结果与分析 | 第21-32页 |
·嫁接后田间表观症状的观察 | 第21页 |
·植原体PCR检测 | 第21-22页 |
·RNA的提取 | 第22-24页 |
·用紫外分光光度计检测提取的总RNA | 第23页 |
·用1.0%琼脂糖检测提取的总RNA | 第23-24页 |
·RNA的纯化结果 | 第24-25页 |
·枣的抗病基因双链cDNA的合成 | 第25-26页 |
·枣cDNA-AFLP分析最佳反应体系的建立 | 第26-29页 |
·酶切、链接体系 | 第26页 |
·预扩体系 | 第26-27页 |
·选择性扩增体系 | 第27-29页 |
·模板cDNA浓度对AFLP选择性扩增结果的影响 | 第27页 |
·TaqDNA聚合酶浓度对AFLP选择性扩增结果的影响 | 第27-28页 |
·dNTP浓度对 AFLP选择性扩增结果的影响 | 第28-29页 |
·抗枣疯病基因的cDNA.AFLP分析 | 第29-32页 |
·不同的引物组合的筛选 | 第29-30页 |
·引物筛选 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
·关于枣双链cDNA的合成方法 | 第32页 |
·cDNA第一链的合成策略 | 第32页 |
·cDNA第二条链的合成策略 | 第32页 |
·cDNA一AFLP试验过程中应注意的问题 | 第32-33页 |
·cDNA一AFLP技术是克隆抗病基因的有效手段 | 第33-34页 |
·关于抗枣疯病种质的抗病机制 | 第34页 |
·下一步工作 | 第34-35页 |
5 论论 | 第35-36页 |
6 参考文献 | 第36-42页 |
7 附录 | 第42-45页 |
8 图版 | 第45-46页 |
9 在读期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
10 作者简历 | 第47-48页 |
11 致谢 | 第48页 |