Pima90-53细菌人工染色体（BAC）文库构建及抗黄萎病相关基因筛选
| 1 引言 | 第1-12页 |
| 2 材料和方法 | 第12-23页 |
| ·材料 | 第12页 |
| ·供试材料 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12页 |
| ·试验方法 | 第12-23页 |
| ·高分子量基因组DNA的提取 | 第12-13页 |
| ·部分酶切最佳酶量的确定和片段选择 | 第13页 |
| ·连接、转化及保存 | 第13-14页 |
| ·BAC克隆插入片段大小的检测 | 第14页 |
| ·BAC克隆稳定性分析 | 第14-15页 |
| ·BAC克隆的鉴定 | 第15-16页 |
| ·检查BAC文库是否含有细胞器DNA的污染 | 第16-17页 |
| ·与纤维发育有关基因的筛选 | 第17-18页 |
| ·黄萎病抗性相关基因的筛选 | 第18-19页 |
| ·黄萎病抗性相关基因的亚克隆文库构建 | 第19-22页 |
| ·黄萎病抗性相关基因的亚克隆的序列测定及分析 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-36页 |
| ·海岛棉Pima90-53 BAC文库的构建 | 第23-24页 |
| ·DNA包埋胶块的质量与浓度 | 第23页 |
| ·最佳酶用量的确定 | 第23页 |
| ·大量酶切后DNA片段的两次选择 | 第23-24页 |
| ·连接与转化 | 第24页 |
| ·Pima90-53 BAC文库的分析、评价 | 第24-29页 |
| ·BAC克隆插入片段的大小及空载率 | 第24-26页 |
| ·BAC克隆稳定性的检测 | 第26页 |
| ·BAC克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·BAC文库中细胞器DNA污染的检测 | 第27-28页 |
| ·与纤维发育有关基因的筛选 | 第28-29页 |
| ·抗黄萎病相关基因的筛选与序列分析 | 第29-36页 |
| ·BAC文库的筛选和阳性克隆的获得 | 第29-30页 |
| ·阳性克隆的分析 | 第30页 |
| ·亚克隆文库的构建 | 第30-32页 |
| ·黄萎病抗性相关基因亚克隆的筛选及序列测定 | 第32页 |
| ·亚克隆序列的拼接组装与序列分析 | 第32-36页 |
| 4 讨论 | 第36-43页 |
| ·影响BAC文库质量的几个关键性因素的探讨 | 第36-38页 |
| ·高密度尼龙膜制备过程中需要注意的问题 | 第38页 |
| ·基因组DNA克隆基因的优点 | 第38-39页 |
| ·目标基因的获得与鉴定 | 第39-40页 |
| ·BAC文库的应用 | 第40-43页 |
| ·用于构建全基因组的物理图谱 | 第40页 |
| ·基因的图位克隆 | 第40-41页 |
| ·基因组测序 | 第41页 |
| ·BAC与比较基因组研究 | 第41页 |
| ·BAC作为探针用于荧光原位杂交 | 第41页 |
| ·光学作图 | 第41-42页 |
| ·SSR引物开发 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 6 参考文献 | 第44-51页 |
| 发表论文 | 第51-52页 |
| 作者简历 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录：主要试剂配方 | 第54-59页 |
