| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 质粒、插图和附表清单 | 第12-15页 |
| 缩略词 | 第15-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-41页 |
| ·禽流感研究进展 | 第17-35页 |
| ·禽流感的流行与危害 | 第17-20页 |
| ·禽流感病毒 | 第20-28页 |
| ·禽流感诊断方法研究进展 | 第28-30页 |
| ·禽流感疫苗 | 第30-33页 |
| ·禽流感的公共卫生意义 | 第33-35页 |
| ·粘膜免疫研究进展 | 第35-41页 |
| ·粘膜免疫效应简述 | 第35-37页 |
| ·粘膜免疫佐剂 | 第37-40页 |
| ·粘膜免疫展望 | 第40-41页 |
| 第2章 H9N2亚型禽流感病毒HA和M2蛋白的表达 | 第41-72页 |
| ·研究的目的与意义 | 第41-42页 |
| ·材料与方法 | 第42-54页 |
| ·材料 | 第42-46页 |
| ·方法 | 第46-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-67页 |
| ·全长HA基因和HA1基因的扩增 | 第54页 |
| ·M2基因跨膜区的缺失突变 | 第54-55页 |
| ·重组质粒pMT-HA和pMT-HA1的序列测定 | 第55-58页 |
| ·重组质粒pMT-M2和pMT-sM2的序列测定 | 第58-59页 |
| ·重组表达质粒pKG-HA1、pKG-sM2和pKG-HA1-sM2的构建 | 第59-62页 |
| ·融合蛋白GST-HA1、GST-sM2、GST-HA1-sM2的表达和活性检测 | 第62-66页 |
| ·融合蛋白特异性的ELISA检测 | 第66-67页 |
| ·免疫小鼠抗体检测 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·M2基因的克隆与表达 | 第67-69页 |
| ·HA1基因的克隆与表达 | 第69-70页 |
| ·HA1和sM2基因的融合表达 | 第70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 第3章 禽流感病毒M2蛋白和HA1蛋白粘膜免疫研究 | 第72-90页 |
| ·研究的目的与意义 | 第72页 |
| ·材料与方法 | 第72-76页 |
| ·材料 | 第72-74页 |
| ·方法 | 第74-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-87页 |
| ·CTB基因的PCR扩增与重组质粒的酶切鉴定 | 第76-77页 |
| ·重组质粒pKG-CTB-sM2的鉴定 | 第77-78页 |
| ·重组质粒pKG-CTB-HA1的鉴定 | 第78-79页 |
| ·融合蛋白GST-CTB、GST-CTB-sM2和GST-CTB-HA1的表达 | 第79-81页 |
| ·免疫前后血清IgG抗体的ELISA检测 | 第81页 |
| ·免疫前后血清IgA抗体的ELISA检测 | 第81-84页 |
| ·免疫前后鼻腔洗液中sIgA抗体的ELISA检测 | 第84页 |
| ·免疫前后气管洗液中sIgA抗体的ELISA检测 | 第84-85页 |
| ·免疫前后肠洗液中sIgA抗体的ELISA检测 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·关于粘膜免疫与禽类粘膜免疫系统 | 第87页 |
| ·禽流感与粘膜免疫防护 | 第87-88页 |
| ·HA1和M2蛋白诱发的粘膜免疫应答 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 第4章 N-P-ELISA抗体检测方法的建立 | 第90-102页 |
| ·研究目的与意义 | 第90页 |
| ·材料与方法 | 第90-94页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-94页 |
| ·结果与分析 | 第94-99页 |
| ·酶标抗体的制备及工作浓度测定 | 第94页 |
| ·NP-EHSA最佳反应条件的确定 | 第94-95页 |
| ·间接NP-ELISA判定标准的确定 | 第95页 |
| ·血清样品单一稀释度ET直线方程的建立 | 第95-96页 |
| ·比较试验 | 第96-97页 |
| ·特异性试验 | 第97-98页 |
| ·重复性试验 | 第98页 |
| ·敏感性试验 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| ·NP-ELISA的优点 | 第99-100页 |
| ·NP-ELISA的灵敏性 | 第100-101页 |
| ·结果判定的直观性 | 第101页 |
| ·小结 | 第101-102页 |
| 第5章 禽流感病毒单克隆抗体的研制及其抗蛋白抗原分析 | 第102-115页 |
| ·研究目的意义 | 第102页 |
| ·材料与方法 | 第102-107页 |
| ·材料 | 第102-103页 |
| ·方法 | 第103-107页 |
| ·结果 | 第107-111页 |
| ·病毒纯化 | 第107-108页 |
| ·细胞融合 | 第108页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第108页 |
| ·单克隆抗体的生产 | 第108页 |
| ·效价测定及特异性鉴定 | 第108-109页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第109页 |
| ·染色体数的检测 | 第109页 |
| ·纯化病毒和细胞感染病毒的抗原分析 | 第109-110页 |
| ·单抗识别蛋白多肽分析 | 第110-111页 |
| ·讨论 | 第111-114页 |
| ·动物免疫 | 第111-112页 |
| ·细胞融合 | 第112页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第112页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆 | 第112-113页 |
| ·关于饲养细胞 | 第113页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第113页 |
| ·病毒裂解产生的多肽 | 第113页 |
| ·单抗识别的蛋白抗原分析 | 第113-114页 |
| ·小结 | 第114-115页 |
| 第6章 总结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-131页 |
| 研究生期间发表的主要论文 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
