| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-40页 |
| ·金属硫蛋白概述 | 第12-19页 |
| ·金属硫蛋白的一般特点 | 第12页 |
| ·金属硫蛋白的分类 | 第12-13页 |
| ·金属硫蛋白的结构 | 第13-14页 |
| ·金属硫蛋白的生物学功能 | 第14-19页 |
| ·植物金属硫蛋白的研究进展 | 第19-23页 |
| ·植物 MT 的主要特性 | 第19页 |
| ·植物 MT 的分类 | 第19-20页 |
| ·植物 MT 基因的表达 | 第20-22页 |
| ·植物MT 的功能 | 第22-23页 |
| ·植物组织特异性表达的研究 | 第23-33页 |
| ·启动子的一般特点 | 第23-24页 |
| ·启动子的类型 | 第24-32页 |
| ·特异性启动子的应用 | 第32-33页 |
| ·转金属硫蛋白基因植物研究与进展 | 第33-34页 |
| ·RNA 干涉的研究进展 | 第34-38页 |
| ·RNAi 概述 | 第34-35页 |
| ·RNAi 作用机理 | 第35-36页 |
| ·RNAi 技术 | 第36页 |
| ·RNAi 的应用 | 第36-38页 |
| ·立题意义及主要的技术路线 | 第38-40页 |
| ·立题意义 | 第38-39页 |
| ·主要的技术路线 | 第39-40页 |
| 第二章 转金属硫蛋白基因的特异表达系统的构建 | 第40-55页 |
| ·前言 | 第40-41页 |
| ·AtSTP3 绿色组织特异表达启动子 | 第40页 |
| ·rbcS 绿色组织特异表达启动子 | 第40-41页 |
| ·材料与方法 | 第41-46页 |
| ·植物材料与动物材料 | 第41页 |
| ·菌株与质粒 | 第41页 |
| ·试剂与酶 | 第41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| ·小鼠总 RNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·克隆小鼠金属硫蛋白基因（MT） | 第42页 |
| ·拟南芥总 DNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·克隆 AtSTP3 启动子 | 第43页 |
| ·水稻总 DNA 的提取 | 第43页 |
| ·克隆RbcS 启动子 | 第43-44页 |
| ·表达载体构建 | 第44-45页 |
| ·农杆菌真空渗透法Agroinfiltration 研究GUS 瞬间表达情况 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·克隆小鼠金属硫蛋白基因(m MT) | 第46-47页 |
| ·克隆 AtSTP3 启动子 | 第47-49页 |
| ·克隆rbcS 启动子 | 第49-51页 |
| ·表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·两个启动子表达系统的 GUS 瞬间表达结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·从小鼠中克隆金属硫蛋白基因及序列分析 | 第53页 |
| ·从水稻中克隆启动子及序列分析 | 第53页 |
| ·两个特异表达启动子瞬时表达的活性 | 第53-54页 |
| ·所构建系统的应用价值 | 第54页 |
| ·总结 | 第54-55页 |
| 第三章 应用农杆菌介导的方法进行水稻遗传转化 | 第55-76页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-65页 |
| ·植物材料 | 第55-56页 |
| ·菌株与质粒 | 第56页 |
| ·试剂与酶 | 第56页 |
| ·仪器及设备 | 第56-57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·转基因植物的获得 | 第57-59页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第59页 |
| ·GUS 活性定量测定 | 第59-61页 |
| ·转基因水稻的分子检测 | 第61-65页 |
| ·结果 | 第65-74页 |
| ·含pCAMBIA1301 质粒农杆菌的获得 | 第65-66页 |
| ·转基因植株的获得 | 第66-68页 |
| ·两个启动子转基因材料的 GUS 组织化学染色检测结果 | 第68-69页 |
| ·两个启动子转基因材料的GUS活性定量检测结果 | 第69-70页 |
| ·转基因水稻的PCR 检测 | 第70-72页 |
| ·转m MT基因植株的 Southern blot检测 | 第72-73页 |
| ·转mMT 基因植株的Northern blot 检测 | 第73页 |
| ·转m MT 基因植株的 Western blot 检测 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·添加 AS 对水稻转化效率的影响 | 第74页 |
| ·rbcS 启动子的克隆及特异表达 | 第74页 |
| ·转基因植株Southern blot 结果 | 第74-75页 |
| ·转基因沉默 | 第75页 |
| ·总结 | 第75-76页 |
| 第四章 水稻金属硫蛋白基因RNAi 表达系统的构建及遗传转化 | 第76-90页 |
| ·前言 | 第76页 |
| ·材料与方法 | 第76-81页 |
| ·植物材料 | 第76页 |
| ·菌株与质粒 | 第76-77页 |
| ·试剂与酶 | 第77页 |
| ·克隆水稻金属硫蛋白基因 | 第77-78页 |
| ·水稻金属硫蛋白基因的融合 | 第78-79页 |
| ·表达载体构建 | 第79-80页 |
| ·转基因植物的获得 | 第80页 |
| ·转基因水稻的分子检测 | 第80-81页 |
| ·结果 | 第81-87页 |
| ·克隆水稻金属硫蛋白rMT1a 基因 | 第81-82页 |
| ·克隆水稻金属硫蛋白rMT2a 基因 | 第82-83页 |
| ·克隆水稻金属硫蛋白rMT3a 基因 | 第83页 |
| ·融合水稻金属硫蛋白基因 | 第83-84页 |
| ·含pJawoh18RNAi, pJRrMT1a ﹑pJRrMT2a﹑pJRrMT3a and pJRrMT123a质粒农杆菌的获得 | 第84-85页 |
| ·转基因植株的获得 | 第85-86页 |
| ·转基因植株的 PCR 检测 | 第86页 |
| ·转基因植株的 Southern blot 检测 | 第86-87页 |
| ·转基因植株的RT-PCR 检测 | 第87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·从水稻中克隆金属硫蛋白基因及序列分析 | 第87-88页 |
| ·转基因植株的PCR 检测结果 | 第88页 |
| ·转基因植株的 Southern blot 结果 | 第88页 |
| ·转基因植株的半定量RT-PCR 检测结果 | 第88-89页 |
| ·总结 | 第89-90页 |
| 第五章 转基因水稻 T1 代性状分析及对重金属抗性的研究 | 第90-101页 |
| ·前言 | 第90-91页 |
| ·重金属的污染及治理方法 | 第90-91页 |
| ·利用植物基因工程的方法提高植物对重金属的抗性 | 第91页 |
| ·利用植物基因工程的方法减少农产品中重金属的含量 | 第91页 |
| ·材料与方法 | 第91-92页 |
| ·植物材料 | 第91-92页 |
| ·仪器与试剂 | 第92页 |
| ·转mMT 基因 T_1 代种子抗嘲霉素萌发实验 | 第92页 |
| ·转水稻金属硫蛋白基因 RNA 干涉的水稻种子抗除草剂萌发实验 | 第92页 |
| ·转基因种子抗重金属萌发实验 | 第92页 |
| ·转基因植株抗重金属实验 | 第92页 |
| ·不同启动子引导的mMT 转基因水稻组织中 Cd~(2+)分布 | 第92页 |
| ·转水稻金属硫蛋白基因 RNA 干涉的水稻组织中 Cd~(2+)分布 | 第92页 |
| ·结果 | 第92-98页 |
| ·转mMT 基因水稻T_1 代种子抗嘲霉素实验结果 | 第92-94页 |
| ·转水稻金属硫蛋白基因 RNA 干涉的水稻种子抗除草剂萌发实验 | 第94-95页 |
| ·转基因种子抗重金属萌发实验结果 | 第95-96页 |
| ·转基因水稻植株对重金属抗性的研究结果 | 第96-97页 |
| ·转mMT 基因水稻组织中Cd~(2+)含量及分布 | 第97页 |
| ·转水稻金属硫蛋白基因RNA 干涉的水稻组织中Cd~(2+)含量及分布 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-99页 |
| ·各个表达系统转基因水稻种子对抗生素萌发实验结果分析 | 第98页 |
| ·各个表达系统转基因水稻对重金属抗性的差异分析 | 第98页 |
| ·转基因水稻对环境治理的意义 | 第98-99页 |
| ·转基因水稻对食品安全的意义 | 第99页 |
| ·总结 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 附录Ⅰ 缩写 | 第117-119页 |
| 附录Ⅱ:克隆载体构建流程 | 第119-125页 |
| 博士期间已发表与待发表的论文 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
