摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展 | 第11-36页 |
·猪瘟的研究进展 | 第11-18页 |
·猪瘟概述 | 第11-12页 |
·猪瘟的流行和分布 | 第12-13页 |
·猪瘟的临床症状和致病机理 | 第13-15页 |
·猪瘟的检测 | 第15-16页 |
·猪瘟的防控 | 第16页 |
·猪瘟的传统疫苗 | 第16-18页 |
·猪瘟病毒的病原学特征及研究进展 | 第18-29页 |
·猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第18-19页 |
·猪瘟病毒的基因组结构及研究进展 | 第19-22页 |
·猪瘟病毒的侵入及复制 | 第22-23页 |
·猪瘟病毒的编码蛋白及其功能 | 第23-26页 |
·猪瘟病毒的抗原性 | 第26-27页 |
·猪瘟病毒的进化和遗传分型 | 第27-29页 |
·猪瘟病毒的增殖及细胞培养 | 第29-36页 |
·猪瘟病毒的入侵及增殖 | 第29-31页 |
·猪瘟病毒对宿主细胞的致病机理 | 第31-32页 |
·猪瘟病毒的细胞培养 | 第32-36页 |
第二章 猪瘟病毒免疫的细胞学研究进展 | 第36-47页 |
·CSFV 与宿主细胞的相互关系 | 第36-37页 |
·CSFV 的免疫反应机制 | 第37-45页 |
·抗体在抗 CSFV 感染中的作用 | 第37-39页 |
·抗 CSFV 的细胞免疫 | 第39-45页 |
·CSFV 的分子生物学及其免疫学性质 | 第45-47页 |
第三章 新型猪瘟疫苗的研究和应用前景 | 第47-52页 |
·CSFV 基因缺失型弱毒疫苗 | 第47-48页 |
·CSFV 亚单位疫苗 | 第48-49页 |
·CSFV 活载体重组疫苗 | 第49-50页 |
·CSFV DNA 疫苗 | 第50-51页 |
·CSFV 全长感染性cDNA 标记疫苗 | 第51-52页 |
第四章 猪瘟病毒石门株 E2 基因的克隆与序列分析 | 第52-77页 |
·材料 | 第52-53页 |
·毒株 | 第52-53页 |
·引物的设计与合成 | 第53页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·方法 | 第53-57页 |
·RNA 提取 | 第53-54页 |
·RT-PCR 和nPCR | 第54-55页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第55页 |
·纯化回收 DNA 片段 | 第55页 |
·纯化产物与pGEM-T Easy 连接 | 第55页 |
·新鲜感受态细胞的制备(CaCl2 法) | 第55-56页 |
·连接产物的转化 | 第56页 |
·重组质粒的提取 | 第56-57页 |
·重组质粒的鉴定 | 第57页 |
·计算机分析 | 第57页 |
·结果 | 第57-76页 |
·PCR 扩增结果 | 第57-58页 |
·质粒 PCR 及酶切鉴定结果 | 第58页 |
·石门株 E2 基因的核苷酸和相应的氨基酸序列 | 第58-74页 |
·核苷酸和氨基酸序列同源性比较 | 第74-75页 |
·石门株与其他猪瘟毒株的系统关系分析 | 第75-76页 |
·讨论 | 第76页 |
·石门株 CSFV E2 基因核苷酸序列及氨基酸序列的同源性 | 第76页 |
·3 株 CSFV E2 糖蛋白抗原区氨基酸的变异 | 第76页 |
·石门株 CSFV E2 糖蛋白的信号肽序列的分析 | 第76页 |
·小结 | 第76-77页 |
第五章 逆转录病毒载体介导的猪瘟石门株E2 基因在PK-15 细胞中的表达及动物免疫试验 | 第77-96页 |
·材料 | 第77-79页 |
·主要试剂 | 第77-79页 |
·细胞系 | 第79页 |
·实验动物 | 第79页 |
·质粒 | 第79页 |
·载体和菌株 | 第79页 |
·培养基 | 第79页 |
·主要仪器 | 第79页 |
·方法 | 第79-83页 |
·逆转录病毒表达质粒的构建 | 第79-81页 |
·逆转录病毒假病毒制备 | 第81页 |
·逆转录病毒假病毒侵染 PK-15 细胞及抗性筛选表达细胞 | 第81页 |
·FACS 分析筛选膜表面表达 E2 蛋白的 PK-15 细胞 | 第81-82页 |
·阳性细胞克隆的荧光染色鉴定 | 第82页 |
·表达 E2 囊膜蛋白的 PK-15 细胞免疫 Balb/c 小鼠 | 第82页 |
·小鼠采血及血清分离 | 第82页 |
·小鼠血清抗体的检测 | 第82页 |
·表达猪瘟病毒石门株 E2 蛋白的 PK-15 细胞免疫猪 | 第82页 |
·免疫猪血清抗体的检测及比较 | 第82-83页 |
·动物攻毒试验 | 第83页 |
·结果 | 第83-94页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定结果 | 第83页 |
·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第83-84页 |
·猪瘟病毒石门株 E2 基因的核苷酸和相应的氨基酸序列 | 第84页 |
·嘌呤霉素筛选假病毒感染的 PK-15 细胞 | 第84-85页 |
·FACS 分析检测表达 E2 囊膜蛋白的 PK-15 细胞 | 第85页 |
·阳性细胞克隆的荧光染色鉴定 | 第85-86页 |
·免疫小鼠血清抗体的 ELISA 检测 | 第86页 |
·免疫猪血清抗体的 ELISA 检测 | 第86页 |
·动物攻毒试验结果 | 第86-94页 |
·讨论 | 第94-95页 |
·小结 | 第95-96页 |
结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
作者简介 | 第113页 |