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人乳铁蛋白在山羊乳腺上皮细胞中的表达及核移植研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 人乳铁蛋白的研究进展第10-14页
   ·分布及含量第10页
   ·结构及特性第10-11页
   ·乳铁蛋白的代谢第11页
   ·生物学功能第11-13页
     ·参与铁代谢第11页
     ·参与机体抗病第11-12页
     ·免疫调节中的作用第12页
     ·细胞繁殖中的作用第12页
     ·对基因表达的调控第12页
     ·抗肿瘤作用第12页
     ·抗氧化活性第12页
     ·其它功能第12-13页
   ·国外Lf 的应用情况第13页
   ·乳铁蛋白的应用前景第13-14页
第二章 动物乳腺生物反应器的研究进展第14-24页
   ·动物乳腺生物反应器研究现状第14-15页
   ·与乳腺组织特异性表达有关的调控组件第15-18页
     ·“milk box”的调节第15-16页
     ·胰岛素、糖皮质激素和催乳素的诱导调节第16页
     ·内含子对基因表达的影响第16-17页
     ·具有染色体变构和开放功能的组件第17页
     ·与转录翻译有关的组件第17-18页
   ·乳腺特异性表达目的基因的选择第18页
   ·乳腺特异性表达载体有效性的检测系统第18-19页
     ·离体组织培养细胞法第19页
     ·体外泌乳系统法第19页
     ·DNA 直接注射法第19页
     ·脂质体包埋法第19页
     ·逆转录病毒介导法第19页
   ·转基因动物实验的常用方法第19-21页
     ·受精卵原核显微注射第20页
     ·精子转导法第20页
     ·胚胎反转录病毒感染法第20页
     ·胚胎干细胞介导法第20-21页
     ·体细胞核移植法第21页
     ·基因打靶技术第21页
   ·动物乳腺生物反应器面临的机遇和挑战第21-24页
第三章 人乳铁蛋白转染体外养山羊乳腺上皮细胞第24-31页
   ·材料第24页
     ·质粒和菌种第24页
     ·主要试剂第24页
   ·方法第24-27页
     ·载体pBLM-C_1质粒DNA 的制备及纯化第24-25页
     ·山羊乳腺上皮细胞的培养第25页
     ·转染细胞的准备第25-26页
     ·G418 对山羊乳腺上皮细胞的最小致死量测定第26页
     ·脂质体/DNA 的准备第26页
     ·培养的乳腺上皮细胞的转染第26页
     ·G418 筛选及PCR 检测第26-27页
   ·结果第27-28页
     ·质粒 DNA 的分光光度计检测结果第27页
     ·山羊乳腺上皮细胞的体外培养第27-28页
     ·G418 对山羊乳腺上皮细胞最小致死量的确定第28页
     ·脂质体转染山羊乳腺上皮细胞结果第28页
     ·转染细胞PCR 检测结果第28页
   ·讨论第28-30页
   ·结论第30-31页
第四章 转人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞诱导表达及产物检测第31-37页
   ·材料第31页
   ·方法第31-33页
     ·LTF 在山羊乳腺上皮细胞中的诱导表达及产物处理第31-32页
     ·诱导产物的检测第32-33页
   ·结果第33-34页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果第33页
     ·Western blot 结果第33-34页
   ·讨论第34-36页
   ·结论第36-37页
第五章 转人乳铁蛋白基因山羊克隆胚的发育第37-42页
   ·材料第37-38页
     ·试剂第37页
     ·仪器设备第37-38页
   ·方法第38-39页
     ·卵母细胞的采集第38页
     ·卵母细胞体外成熟及去核第38页
     ·供体细胞的准备第38页
     ·核移植第38页
     ·克隆胚的激活及体外培养第38-39页
     ·试验数据处理第39页
     ·克隆胚外源基因的检测第39页
   ·结果第39-40页
     ·转基因克隆胚的体外发育情况第39-40页
     ·克隆胚外源基因的检测第40页
   ·讨论第40-41页
   ·结论第41-42页
全文结论第42-43页
参考文献第43-50页
致谢第50页
作者简介第50页

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