致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略语表 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-32页 |
引言 | 第16页 |
1 双生病毒的分类与命名 | 第16-20页 |
·双生病毒的分类 | 第16-17页 |
·双生病毒的命名 | 第17-18页 |
·双生病毒系统进化关系 | 第18-20页 |
2 双生病毒的基因组结构和功能及其侵染过程 | 第20-28页 |
·双生病毒的基因组结构和功能 | 第20-26页 |
·Begomovirus病毒的基因组结构和功能 | 第20-22页 |
·双生病毒其它三个属病毒的基因组结构和功能 | 第22页 |
·双生病毒伴随的小分子DNA | 第22-25页 |
·双生病毒的基因组重组是基因组突变中常见的类型 | 第25-26页 |
·双生病毒的侵染过程 | 第26-28页 |
·双生病毒的复制 | 第26-27页 |
·双生病毒的转录 | 第27-28页 |
·双生病毒的移动 | 第28页 |
·包壳和传毒 | 第28页 |
3 双生病毒的致病相关因子 | 第28-31页 |
·C4 | 第30页 |
·C2/AC2 | 第30页 |
·BC1和BV1 | 第30-31页 |
·卫星DNAβ的βC1 | 第31页 |
4 立题依据 | 第31-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-43页 |
1 材料 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·病毒侵染性克隆 | 第32页 |
·菌株和质粒 | 第32页 |
·试剂 | 第32页 |
·常用缓冲液的配制 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-43页 |
·PCR技术 | 第33页 |
·PCR产物纯化 | 第33-34页 |
·DNA克隆技术 | 第34-36页 |
·连接 | 第34-35页 |
·感受态细胞制备 | 第35页 |
·转化 | 第35-36页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第36-37页 |
·质粒微量提取试剂盒 | 第36页 |
·PCR鉴定 | 第36-37页 |
·酶切鉴定 | 第37页 |
·序列测定与分析 | 第37页 |
·植物总DNA提取和Southern分析 | 第37-43页 |
·总DNA提取(CTAB法) | 第37-38页 |
·Southern分析 | 第38-43页 |
第三章 实验结果 | 第43-88页 |
第一节 云南几种作物和杂草上双生病毒的PCR快速检测 | 第43-51页 |
1 材料与方法 | 第43-47页 |
·毒源 | 第43页 |
·植物总DNA的抽提及纯化 | 第43-45页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定、分析 | 第45-47页 |
2 结果与分析 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-51页 |
第二节 侵染刺茄的中国番茄黄化曲叶病毒及其卫星分子的全基因组结构 | 第51-58页 |
1 材料和方法 | 第51-53页 |
·毒源 | 第51-52页 |
·总DNA提取 | 第52页 |
·PCR扩增,克隆和序列测定 | 第52页 |
·序列分析 | 第52-53页 |
2 结果 | 第53-57页 |
·Y322病毒基因组DNA-A结构 | 第53-54页 |
·Y322 DNA-A与其它双生病毒的同源性比较 | 第54-55页 |
·Y322伴随的DNAβ分子结构以及与其它DNAβ的同源性比较 | 第55-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
第三节 侵染云南烟草和番茄的中国番茄黄化曲叶病毒的全基因组结构 | 第58-69页 |
1 材料与方法 | 第58-60页 |
·毒源 | 第58页 |
·植物总DNA提取 | 第58页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定 | 第58-59页 |
·DNA-B组分的寻找方法 | 第59页 |
·序列分析 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-64页 |
·病毒基因组DNA-A结构 | 第60-61页 |
·病毒分离物DNA-A与其它双生病毒的比较及分子进化分析 | 第61-62页 |
·分离物中DNA-B组分的检测 | 第62-63页 |
·病毒基因组DNAβ分子克隆和序列分析 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-69页 |
第四节 云南作物和杂草伴随的DNAβ的基因组结构及其变异分析 | 第69-78页 |
1 材料与方法 | 第69-71页 |
·毒源 | 第69页 |
·植物总DNA的抽提及纯化 | 第69页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定、分析 | 第69-71页 |
2 结果与分析 | 第71-76页 |
·与云南几种作物和杂草伴随的DNAβ的分子鉴定 | 第71-72页 |
·DNAβ的分子结构特征 | 第72页 |
·DNAβ的序列比较分析 | 第72-74页 |
·27个DNAβ的结构变异分析 | 第74-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
第五节 TYLCCNV伴随的DNAβ的侵染性差异 | 第78-88页 |
1 材料与方法 | 第78-80页 |
·毒源 | 第78-79页 |
·TYLCCNVDNA-A和DNAβ侵染性克隆的构建和转化 | 第79页 |
·农杆菌介导的植株接种 | 第79-80页 |
·病毒的Southern印迹检测 | 第80页 |
2 结果与分析 | 第80-81页 |
3 讨论 | 第81-88页 |
参考文献 | 第88-96页 |
附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第96-97页 |
附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第97-99页 |
附录C EMBL登陆基因 | 第99-102页 |