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云南省几种作物及杂草上双生病毒及伴随的DNAβ的分子鉴定

致谢第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-14页
缩略语表第14-16页
第一章 文献综述第16-32页
 引言第16页
 1 双生病毒的分类与命名第16-20页
   ·双生病毒的分类第16-17页
   ·双生病毒的命名第17-18页
   ·双生病毒系统进化关系第18-20页
 2 双生病毒的基因组结构和功能及其侵染过程第20-28页
   ·双生病毒的基因组结构和功能第20-26页
     ·Begomovirus病毒的基因组结构和功能第20-22页
     ·双生病毒其它三个属病毒的基因组结构和功能第22页
     ·双生病毒伴随的小分子DNA第22-25页
     ·双生病毒的基因组重组是基因组突变中常见的类型第25-26页
   ·双生病毒的侵染过程第26-28页
     ·双生病毒的复制第26-27页
     ·双生病毒的转录第27-28页
     ·双生病毒的移动第28页
     ·包壳和传毒第28页
 3 双生病毒的致病相关因子第28-31页
   ·C4第30页
   ·C2/AC2第30页
   ·BC1和BV1第30-31页
   ·卫星DNAβ的βC1第31页
 4 立题依据第31-32页
第二章 材料与方法第32-43页
 1 材料第32-33页
   ·植物材料第32页
   ·病毒侵染性克隆第32页
   ·菌株和质粒第32页
   ·试剂第32页
   ·常用缓冲液的配制第32-33页
 2 方法第33-43页
   ·PCR技术第33页
   ·PCR产物纯化第33-34页
   ·DNA克隆技术第34-36页
     ·连接第34-35页
     ·感受态细胞制备第35页
     ·转化第35-36页
   ·重组质粒的提取与鉴定第36-37页
     ·质粒微量提取试剂盒第36页
     ·PCR鉴定第36-37页
     ·酶切鉴定第37页
     ·序列测定与分析第37页
   ·植物总DNA提取和Southern分析第37-43页
     ·总DNA提取(CTAB法)第37-38页
     ·Southern分析第38-43页
第三章 实验结果第43-88页
 第一节 云南几种作物和杂草上双生病毒的PCR快速检测第43-51页
  1 材料与方法第43-47页
   ·毒源第43页
   ·植物总DNA的抽提及纯化第43-45页
   ·PCR扩增、克隆和序列测定、分析第45-47页
  2 结果与分析第47-48页
  3 讨论第48-51页
 第二节 侵染刺茄的中国番茄黄化曲叶病毒及其卫星分子的全基因组结构第51-58页
  1 材料和方法第51-53页
   ·毒源第51-52页
   ·总DNA提取第52页
   ·PCR扩增,克隆和序列测定第52页
   ·序列分析第52-53页
  2 结果第53-57页
   ·Y322病毒基因组DNA-A结构第53-54页
   ·Y322 DNA-A与其它双生病毒的同源性比较第54-55页
   ·Y322伴随的DNAβ分子结构以及与其它DNAβ的同源性比较第55-57页
  3 讨论第57-58页
 第三节 侵染云南烟草和番茄的中国番茄黄化曲叶病毒的全基因组结构第58-69页
  1 材料与方法第58-60页
   ·毒源第58页
   ·植物总DNA提取第58页
   ·PCR扩增、克隆和序列测定第58-59页
   ·DNA-B组分的寻找方法第59页
   ·序列分析第59-60页
  2 结果与分析第60-64页
   ·病毒基因组DNA-A结构第60-61页
   ·病毒分离物DNA-A与其它双生病毒的比较及分子进化分析第61-62页
   ·分离物中DNA-B组分的检测第62-63页
   ·病毒基因组DNAβ分子克隆和序列分析第63-64页
  3 讨论第64-69页
 第四节 云南作物和杂草伴随的DNAβ的基因组结构及其变异分析第69-78页
  1 材料与方法第69-71页
   ·毒源第69页
   ·植物总DNA的抽提及纯化第69页
   ·PCR扩增、克隆和序列测定、分析第69-71页
  2 结果与分析第71-76页
   ·与云南几种作物和杂草伴随的DNAβ的分子鉴定第71-72页
   ·DNAβ的分子结构特征第72页
   ·DNAβ的序列比较分析第72-74页
   ·27个DNAβ的结构变异分析第74-76页
  3 讨论第76-78页
 第五节 TYLCCNV伴随的DNAβ的侵染性差异第78-88页
  1 材料与方法第78-80页
   ·毒源第78-79页
   ·TYLCCNVDNA-A和DNAβ侵染性克隆的构建和转化第79页
   ·农杆菌介导的植株接种第79-80页
   ·病毒的Southern印迹检测第80页
  2 结果与分析第80-81页
  3 讨论第81-88页
参考文献第88-96页
附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器第96-97页
附录B 常用缓冲液及培养基配方第97-99页
附录C EMBL登陆基因第99-102页

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