摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一部分 水稻E类MADS-box 基因在花发育中的作用 | 第11-68页 |
1. 文献综述和立题意义 | 第12-26页 |
·MADS-box 基因研究进展 | 第12-19页 |
·MADS-box 基因的类型及其结构特点 | 第12-13页 |
·花发育的ABCDE 模型 | 第13-17页 |
·经典的ABC 模型 | 第14-15页 |
·D 功能基因的发现 | 第15页 |
·ABCDE 模型 | 第15-17页 |
·E 类功能基因的研究进展 | 第17-19页 |
·水稻花发育中MADS-box 基因的克隆及功能分析 | 第19-25页 |
·水稻花的结构特点 | 第19页 |
·水稻花发育中MADS-box 基因的克隆及功能分析 | 第19-21页 |
·R NAi 技术能够有效地敲除目的基因 | 第21页 |
·RNA 沉默现象的发现 | 第21-22页 |
·RNA 沉默机理 | 第22-24页 |
·RNAi 技术是研究基因功能的有效手段 | 第24-25页 |
·RNAi 技术和反义技术的区别 | 第25页 |
·本研究的目的、意义及技术路线 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-41页 |
·实验材料和试剂 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26-27页 |
·菌种 | 第27页 |
·载体 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-41页 |
·水稻幼穗总RNA 的提取 | 第27-28页 |
·mRNA 的分离 | 第28页 |
·cDNA 文库的构建 | 第28-32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 | 第32页 |
·RT-PCR | 第32-33页 |
·原位杂交 | 第33-36页 |
·农杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 | 第36-37页 |
·水稻愈伤组织的诱导与遗传转化 | 第37-38页 |
·水稻分化苗的GUS 染色鉴定 | 第38页 |
·水稻基因组DNA 的提取(CTAB 法) | 第38页 |
·转基因植株的Southern 鉴定 | 第38-39页 |
·Northern 杂交 | 第39-40页 |
·石蜡切片 | 第40-41页 |
·扫描电镜观察 | 第41页 |
3 结果与分析 | 第41-62页 |
·水稻幼穗cDNA 文库的构建 | 第41-42页 |
·克隆筛选cDNA 文库的探针模板 | 第42-43页 |
·从水稻基因组扩增MADS-box 保守区序列 | 第42页 |
·RT-PCR 克隆OsMAD58 基因 | 第42-43页 |
·从水稻cDNA 文库筛选MADS-box 基因 | 第43页 |
·水稻E 类MADS-box 基因的原位表达分析 | 第43-45页 |
·RNAi 载体构建及基因转化 | 第45-50页 |
·E 类基因沉默导致抽穗期延长或不抽穗 | 第50-51页 |
·突变表型分析 | 第51-58页 |
·解剖镜观察突变小穗 | 第51-55页 |
·扫描电镜观察突变心皮 | 第55-57页 |
·石蜡切片观察突变心皮的内部结构 | 第57-58页 |
·水稻转基因植株的 Southern 分析 | 第58-59页 |
·RT-PCR 和Northern 杂交检测E 类基因在转基因植株中的表达 | 第59-62页 |
4 讨论 | 第62-67页 |
·水稻中E 类基因的功能既有分化又存在着冗余 | 第62-63页 |
·水稻四轮花器官的正常发育需要E 类基因的参与 | 第63-64页 |
·水稻中的E 类基因控制胚珠的发育 | 第64-65页 |
·水稻中的E 类基因具有小花分生组织决定性 | 第65-66页 |
·水稻E 类基因影响抽穗期 | 第66-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
第二部分 玉米MADS-box 基因ZAG2 转录调控区的研究 | 第68-84页 |
1 前言 | 第69-73页 |
·真核生物主要的转录调控元件 | 第69-70页 |
·研究转录调控的一般方法 | 第70页 |
·花器官特征基因的调控研究 | 第70-72页 |
·玉米ZAG2 基因的表达方式 | 第72-73页 |
·本研究的目的和意义 | 第73页 |
2 材料和方法 | 第73页 |
3 结果与分析 | 第73-82页 |
·玉米ZAG2 基因翻译起始点上游序列的结构特点 | 第73-77页 |
·ZAG2 调控元件与报告基因GUS 的融合构建 | 第77-80页 |
·转基因植株的GUS 染色 | 第80-82页 |
·PCR 鉴定阳性植株 | 第80页 |
·GUS 在转基因植株中的着色方式 | 第80-82页 |
4 讨论 | 第82-83页 |
·翻译起始点上游的序列不足以使ZAG2 基因正常表达 | 第82页 |
·两个构建着色方式不同的可能原因 | 第82-83页 |
5 结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-98页 |
致谢 | 第98-99页 |