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MADS-box基因在单子叶植物花发育中的功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略词表第7-11页
第一部分 水稻E类MADS-box 基因在花发育中的作用第11-68页
 1. 文献综述和立题意义第12-26页
   ·MADS-box 基因研究进展第12-19页
     ·MADS-box 基因的类型及其结构特点第12-13页
     ·花发育的ABCDE 模型第13-17页
       ·经典的ABC 模型第14-15页
       ·D 功能基因的发现第15页
       ·ABCDE 模型第15-17页
     ·E 类功能基因的研究进展第17-19页
   ·水稻花发育中MADS-box 基因的克隆及功能分析第19-25页
     ·水稻花的结构特点第19页
     ·水稻花发育中MADS-box 基因的克隆及功能分析第19-21页
     ·R NAi 技术能够有效地敲除目的基因第21页
     ·RNA 沉默现象的发现第21-22页
     ·RNA 沉默机理第22-24页
     ·RNAi 技术是研究基因功能的有效手段第24-25页
     ·RNAi 技术和反义技术的区别第25页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第25-26页
 2 材料与方法第26-41页
   ·实验材料和试剂第26-27页
     ·植物材料第26-27页
     ·菌种第27页
     ·载体第27页
     ·主要试剂第27页
   ·实验方法第27-41页
     ·水稻幼穗总RNA 的提取第27-28页
     ·mRNA 的分离第28页
     ·cDNA 文库的构建第28-32页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化第32页
     ·RT-PCR第32-33页
     ·原位杂交第33-36页
     ·农杆菌感受态细胞的制备及质粒转化第36-37页
     ·水稻愈伤组织的诱导与遗传转化第37-38页
     ·水稻分化苗的GUS 染色鉴定第38页
     ·水稻基因组DNA 的提取(CTAB 法)第38页
     ·转基因植株的Southern 鉴定第38-39页
     ·Northern 杂交第39-40页
     ·石蜡切片第40-41页
     ·扫描电镜观察第41页
 3 结果与分析第41-62页
   ·水稻幼穗cDNA 文库的构建第41-42页
   ·克隆筛选cDNA 文库的探针模板第42-43页
     ·从水稻基因组扩增MADS-box 保守区序列第42页
     ·RT-PCR 克隆OsMAD58 基因第42-43页
   ·从水稻cDNA 文库筛选MADS-box 基因第43页
   ·水稻E 类MADS-box 基因的原位表达分析第43-45页
   ·RNAi 载体构建及基因转化第45-50页
   ·E 类基因沉默导致抽穗期延长或不抽穗第50-51页
   ·突变表型分析第51-58页
     ·解剖镜观察突变小穗第51-55页
     ·扫描电镜观察突变心皮第55-57页
     ·石蜡切片观察突变心皮的内部结构第57-58页
   ·水稻转基因植株的 Southern 分析第58-59页
   ·RT-PCR 和Northern 杂交检测E 类基因在转基因植株中的表达第59-62页
 4 讨论第62-67页
   ·水稻中E 类基因的功能既有分化又存在着冗余第62-63页
   ·水稻四轮花器官的正常发育需要E 类基因的参与第63-64页
   ·水稻中的E 类基因控制胚珠的发育第64-65页
   ·水稻中的E 类基因具有小花分生组织决定性第65-66页
   ·水稻E 类基因影响抽穗期第66-67页
 5 结论第67-68页
第二部分 玉米MADS-box 基因ZAG2 转录调控区的研究第68-84页
 1 前言第69-73页
   ·真核生物主要的转录调控元件第69-70页
   ·研究转录调控的一般方法第70页
   ·花器官特征基因的调控研究第70-72页
   ·玉米ZAG2 基因的表达方式第72-73页
   ·本研究的目的和意义第73页
 2 材料和方法第73页
 3 结果与分析第73-82页
   ·玉米ZAG2 基因翻译起始点上游序列的结构特点第73-77页
   ·ZAG2 调控元件与报告基因GUS 的融合构建第77-80页
   ·转基因植株的GUS 染色第80-82页
     ·PCR 鉴定阳性植株第80页
     ·GUS 在转基因植株中的着色方式第80-82页
 4 讨论第82-83页
   ·翻译起始点上游的序列不足以使ZAG2 基因正常表达第82页
   ·两个构建着色方式不同的可能原因第82-83页
 5 结论第83-84页
参考文献第84-98页
致谢第98-99页

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