| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-21页 |
| 1、原位杂交技术的发展和应用 | 第10-15页 |
| 1．1 原位杂交技术的原理 | 第10页 |
| 1．2 原位杂交技术的发展历史 | 第10-13页 |
| 1．3 原位杂交技术的应用前景 | 第13-14页 |
| 1．3．1 PCR-ISH | 第13页 |
| 1．3．2 EM-ISH | 第13页 |
| 1．3．3 ISH-IHC | 第13-14页 |
| 1．3．4 双色ISH技术 | 第14页 |
| 1．4．RNA原位杂交的应用 | 第14-15页 |
| 2、vasa基因的表达及功能 | 第15-18页 |
| 2．1 概述 | 第15-16页 |
| 2．2 脊椎动物和非脊椎动物中的Vasa同源基因 | 第16-17页 |
| 2．3 vasa基因的表达及调控 | 第17-18页 |
| 3、nanos基因的表达及功能 | 第18-19页 |
| 3．1 概述 | 第18页 |
| 3．2 nanos基因的表达及功能 | 第18-19页 |
| 4、本研究的目的 | 第19-21页 |
| 材料和方法 | 第21-28页 |
| 一、实验材料 | 第21-22页 |
| 2．1．1 实验动物 | 第21页 |
| 2．1．2 质粒 | 第21页 |
| 2．1．3 菌株 | 第21页 |
| 2．1．4 药品试剂 | 第21页 |
| 2．1．5 常用试剂配方 | 第21-22页 |
| 二、实验方法 | 第22-28页 |
| 2．2．1 pGEM-vasa、pGEM-nanos质粒的大量提取 | 第22-23页 |
| 2．2．2 质粒载体的酶切线性化 | 第23页 |
| 2．2．3 地高辛标记探针的体外转录合成 | 第23-24页 |
| 2．2．4 盖玻片的准备 | 第24页 |
| 2．2．5 载玻片的准备 | 第24-25页 |
| 2．2．6 冷冻切片制备 | 第25页 |
| 2．2．7 切片的预处理 | 第25页 |
| 2．2．8 性腺组织切片的预杂交和原位杂交 | 第25-28页 |
| 结果 | 第28-33页 |
| 3．1 金鱼卵子发生中vasa RNA的原位杂交检测结果 | 第28页 |
| 3．2 金鱼精子发生中vasa RNA的原位杂交检测结果 | 第28-30页 |
| 3．3 斑马鱼卵子发生中nanosl mRNA的原位杂交检测结果 | 第30页 |
| 3．4 斑马鱼精子发生中nanosl mRNA的原位杂交检测结果 | 第30-33页 |
| 讨论 | 第33-38页 |
| (一)、Vasa基因的表达及其在配子发生中的功能分析 | 第33-35页 |
| 4．1．1 Vasa同源基因的表达调控和亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 4．1．2 VASA基因在生殖细胞发育过程中的地位与作用 | 第34页 |
| 4．1．3 Vasa基因在配子发生过程中的功能分析 | 第34-35页 |
| (二)、nsnos基因的表达及其在配子发生中的功能分析 | 第35-38页 |
| 4．2．1 nanos基因的表达及调控 | 第35-36页 |
| 4．2．2 nanos基因配子发生中的功能分析 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-50页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
