| 摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 理论分析 | 第11-31页 |
| 1 狂犬病病毒的基因结构及其功能 | 第11-18页 |
| ·狂犬病病毒形态、组成及基因结构 | 第11-12页 |
| ·病毒基因组的编码产物与功能 | 第12-18页 |
| ·狂犬病毒糖蛋白和核蛋白 | 第13页 |
| ·糖蛋白(GP)研究 | 第13-15页 |
| ·核蛋白(NP)研究 | 第15-18页 |
| 2 犬腺病毒载体构建的研究进展 | 第18-25页 |
| ·腺病毒载体的构建 | 第18-23页 |
| ·构建原理 | 第18-19页 |
| ·构建方法 | 第19-23页 |
| ·重组犬腺病毒载体的构建 | 第23-25页 |
| ·犬腺病毒及其基因组简介 | 第23页 |
| ·CAV-2特点 | 第23-24页 |
| ·重组CAV载体的构建 | 第24-25页 |
| 3 腺病毒载体应用概况及特点 | 第25-31页 |
| ·腺病毒载体应用的概况 | 第26-28页 |
| ·腺病毒载体的应用特点 | 第28-31页 |
| ·腺病毒载体转移基因的有效性 | 第28-29页 |
| ·腺病毒载体应用的安全性 | 第29-30页 |
| ·本研究的立题依据 | 第30-31页 |
| 第二章 试验研究 | 第31-54页 |
| 试验一 狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因的克隆及测序 | 第31-38页 |
| 1 材料方法 | 第31-35页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·菌株、病毒、细胞和质粒 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-35页 |
| ·感受态菌的制备、质粒的转化、质粒制备与纯化 | 第32-33页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·DNA操作 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第35页 |
| ·狂犬病病毒SRV_9株糖蛋白膜外区的克隆 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-37页 |
| ·T-PCR结果 | 第35-36页 |
| ·T载体克隆和测序 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 试验二 构建表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区的重组犬2型膝病毒 | 第38-47页 |
| 1 材料方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·菌株、病毒、细胞和质粒 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·细菌的培养和质粒的酶切、连接及转化 | 第38-39页 |
| ·表达盒和重组腺病毒基因组的构建 | 第39页 |
| ·转染MDCK细胞 | 第39页 |
| ·重组病毒基因组的提取 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-46页 |
| ·表达盒的构建 | 第40-41页 |
| ·重组犬2型腺病毒E3区 | 第41-42页 |
| ·重组犬2型腺病毒基因组的构建 | 第42页 |
| ·重组基因组的转染及新病毒的包装 | 第42-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 试验三 重组病毒的免疫研究 | 第47-54页 |
| 1 材料方法 | 第47-50页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·病毒、细胞与犬 | 第47页 |
| ·材料与试剂 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·ELISA法检测狂犬病病毒糖蛋白表达 | 第47-48页 |
| ·细胞的PAGE电泳 | 第48-49页 |
| ·Western blot分析 | 第49-50页 |
| ·免疫原性研究 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-53页 |
| ·RV糖蛋白膜外区的真核表达检测 | 第50-51页 |
| ·免疫原性分析 | 第51-53页 |
| ·遗传稳定性分析 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 第三章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64页 |