中文摘要 | 第1-6页 |
1. 前言 | 第6-24页 |
·与发育相关的基因家族 | 第6-10页 |
·HOX 基因家族 | 第7-8页 |
·SOX 基因家族 | 第8-10页 |
·DMRT 基因家庭 | 第10页 |
·mRNA 差异显示技术的研究进展 | 第10-19页 |
·mRNA 差异显示的基本原理与方法 | 第11-13页 |
·mRNA 差异显示技术的特点 | 第13-14页 |
·mRNA 差异显示技术的优点 | 第13页 |
·mRNA 差异显示技术的缺陷 | 第13-14页 |
·mRNA 差异显示技术的改进 | 第14-17页 |
·引物的改进 | 第14-16页 |
·PCR 反应条件的改进 | 第16页 |
·电泳及差异条带显示的改进 | 第16-17页 |
·mRNA 差异显示技术的应用现状 | 第17-19页 |
·卤虫分子生物学和分类学的研究现状 | 第19-22页 |
·卤虫分子生物学研究进展 | 第20页 |
·卤虫分类学研究进展 | 第20-22页 |
·甲壳动物胚胎学的研究 | 第22-23页 |
·研究意义 | 第23-24页 |
2. 材料与方法 | 第24-31页 |
·实验材料 | 第24页 |
·实验仪器 | 第24页 |
·实验试剂 | 第24-26页 |
·总RNA 提取及纯化试剂 | 第24-25页 |
·反转录及PCR 相关试剂 | 第25页 |
·核酸电泳试剂及硝酸银染料 | 第25-26页 |
·克隆试剂 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-31页 |
·卤虫卵孵化及培养条件 | 第26-27页 |
·总RNA 的提取 | 第27-28页 |
·RNA 的纯化 | 第28页 |
·反转录 | 第28-29页 |
·PCR 扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
·硝酸银染色和差异条带的回收纯化 | 第30页 |
·再扩增 | 第30页 |
·差异片段的克隆 | 第30-31页 |
·差异片段与pMD18-T Vector 的连接 | 第30页 |
·连接产物与E.coli 感受态细胞JM109 的转化 | 第30-31页 |
·差异片段的测序 | 第31页 |
·序列分析 | 第31页 |
3. 结果 | 第31-49页 |
·RNA 检测结果 | 第31页 |
·PCR 扩增结果 | 第31-32页 |
·差异条带再扩增结果 | 第32-36页 |
·序列结果及同源性比较分析 | 第36-49页 |
·ed1 序列及同源性比对结果 | 第36-38页 |
·序列ed1 克隆测序结果 | 第36-37页 |
·BLASTN 同源性比对结果 | 第37页 |
·BLASTX 同源性比对结果 | 第37-38页 |
·ed2 序列及同源性比对结果 | 第38-42页 |
·序列ed2 克隆测序结果 | 第38-39页 |
·BLASTN 同源性比对结果 | 第39页 |
·BLASTX 同源性比对结果 | 第39-40页 |
·基于反转录酶氨基酸序列构建的分子系统树 | 第40-42页 |
·ed3 序列及同源性比对结果 | 第42-46页 |
·序列ed3 克隆测序结果 | 第42-43页 |
·BLASTN 同源性比对结果 | 第43页 |
·BLASTX 同源性比对结果 | 第43-44页 |
·基于短串联重复序列构建的分子系统树 | 第44-46页 |
·ed4 序列及同源性比对结果 | 第46-49页 |
·序列ed4 克隆测序结果 | 第46页 |
·BLASTN 同源性比对结果 | 第46-47页 |
·BLASTX 同源性比对结果 | 第47-49页 |
4. 讨论 | 第49-54页 |
·两性生殖卤虫胚胎发育相关基因的分析 | 第49-52页 |
·富甘氨酸蛋白在卤虫胚胎发育过程中的重要作用 | 第49-50页 |
·卤虫可能存在某种反转录酶 | 第50页 |
·非翻译区的重复序列 | 第50-51页 |
·过氧化氢酶的抗氧化防御功能 | 第51-52页 |
·降低差异显示 PCR 假阳性和提高重复性的几种策略 | 第52-54页 |
·高质量的总 RNA 是降低假阳性率的前提 | 第52页 |
·引物的改进提高了 DDRT-PCR 的重复性 | 第52-53页 |
·选择最适的反转录和 PCR 退火温度 | 第53页 |
·设立重复对照降低假阳性率 | 第53-54页 |
5.结论 | 第54-56页 |
英文摘要 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
学位论文独创性声明 | 第64页 |