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中国两性生殖卤虫早期胚胎发育相关基因的研究

中文摘要第1-6页
1. 前言第6-24页
   ·与发育相关的基因家族第6-10页
     ·HOX 基因家族第7-8页
     ·SOX 基因家族第8-10页
     ·DMRT 基因家庭第10页
   ·mRNA 差异显示技术的研究进展第10-19页
     ·mRNA 差异显示的基本原理与方法第11-13页
     ·mRNA 差异显示技术的特点第13-14页
       ·mRNA 差异显示技术的优点第13页
       ·mRNA 差异显示技术的缺陷第13-14页
     ·mRNA 差异显示技术的改进第14-17页
       ·引物的改进第14-16页
       ·PCR 反应条件的改进第16页
       ·电泳及差异条带显示的改进第16-17页
     ·mRNA 差异显示技术的应用现状第17-19页
   ·卤虫分子生物学和分类学的研究现状第19-22页
     ·卤虫分子生物学研究进展第20页
     ·卤虫分类学研究进展第20-22页
   ·甲壳动物胚胎学的研究第22-23页
   ·研究意义第23-24页
2. 材料与方法第24-31页
   ·实验材料第24页
   ·实验仪器第24页
   ·实验试剂第24-26页
     ·总RNA 提取及纯化试剂第24-25页
     ·反转录及PCR 相关试剂第25页
     ·核酸电泳试剂及硝酸银染料第25-26页
     ·克隆试剂第26页
   ·实验方法第26-31页
     ·卤虫卵孵化及培养条件第26-27页
     ·总RNA 的提取第27-28页
     ·RNA 的纯化第28页
     ·反转录第28-29页
     ·PCR 扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳第29-30页
     ·硝酸银染色和差异条带的回收纯化第30页
     ·再扩增第30页
     ·差异片段的克隆第30-31页
       ·差异片段与pMD18-T Vector 的连接第30页
       ·连接产物与E.coli 感受态细胞JM109 的转化第30-31页
     ·差异片段的测序第31页
     ·序列分析第31页
3. 结果第31-49页
   ·RNA 检测结果第31页
   ·PCR 扩增结果第31-32页
   ·差异条带再扩增结果第32-36页
   ·序列结果及同源性比较分析第36-49页
     ·ed1 序列及同源性比对结果第36-38页
       ·序列ed1 克隆测序结果第36-37页
       ·BLASTN 同源性比对结果第37页
       ·BLASTX 同源性比对结果第37-38页
     ·ed2 序列及同源性比对结果第38-42页
       ·序列ed2 克隆测序结果第38-39页
       ·BLASTN 同源性比对结果第39页
       ·BLASTX 同源性比对结果第39-40页
       ·基于反转录酶氨基酸序列构建的分子系统树第40-42页
     ·ed3 序列及同源性比对结果第42-46页
       ·序列ed3 克隆测序结果第42-43页
       ·BLASTN 同源性比对结果第43页
       ·BLASTX 同源性比对结果第43-44页
       ·基于短串联重复序列构建的分子系统树第44-46页
     ·ed4 序列及同源性比对结果第46-49页
       ·序列ed4 克隆测序结果第46页
       ·BLASTN 同源性比对结果第46-47页
       ·BLASTX 同源性比对结果第47-49页
4. 讨论第49-54页
   ·两性生殖卤虫胚胎发育相关基因的分析第49-52页
     ·富甘氨酸蛋白在卤虫胚胎发育过程中的重要作用第49-50页
     ·卤虫可能存在某种反转录酶第50页
     ·非翻译区的重复序列第50-51页
     ·过氧化氢酶的抗氧化防御功能第51-52页
   ·降低差异显示 PCR 假阳性和提高重复性的几种策略第52-54页
     ·高质量的总 RNA 是降低假阳性率的前提第52页
     ·引物的改进提高了 DDRT-PCR 的重复性第52-53页
     ·选择最适的反转录和 PCR 退火温度第53页
     ·设立重复对照降低假阳性率第53-54页
5.结论第54-56页
英文摘要第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
学位论文独创性声明第64页

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