中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一部分 目的基因GDNF及pIRES2-EGFP的克隆及测序 | 第11-19页 |
(一) 从人神经胶质细胞瘤组织中提取总RNA,反转录cDNA,PCR目的基因片段 | 第11-14页 |
(二) 目的基因片段GDNF和EGFP的纯化回收 | 第14页 |
(三) 制备感受态细胞 | 第14-15页 |
(四) 与T载体连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆 | 第15-17页 |
(五) 小量抽提质粒,并测量浓度 | 第17-18页 |
(六) 目的基因片段GDNF和pIRES2-EGFP测序 | 第18-19页 |
第二部分 pLXSN-IRES2—EGFP-GDNF双表达载体的构建 | 第19-26页 |
(一) pLXSN质粒的双酶切,GDNF及pIRES2—EGFP质粒的酶切 | 第19-21页 |
(二) pLXSN、IRES2—EGFP基因片段的连接,酶切鉴定阳性克隆 | 第21-22页 |
(三) 中量抽提pLXSN-IRES2-EGFP质粒,并测量浓度和纯度 | 第22-23页 |
(四) pLXSN-IRES2—EGFP-GDNF双表达载体的构建 | 第23-25页 |
(五) 中量抽提pLXSN-IRES2-EGFP质粒,并测量浓度和纯度 | 第25-26页 |
第三部分 pLXSN-IRES2-EGFP-GDNF的电转染 | 第26-29页 |
讨论 | 第29-41页 |
结论 | 第41-42页 |
附图 | 第42-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读硕士学位期间撰写及发表的学术论文目录 | 第60-61页 |