| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 前言-病毒:海洋生态动力学和疾病学研究的创新点 | 第11-27页 |
| 1 海洋病毒与海洋生态动力学 | 第13-18页 |
| 1．1 海洋病毒在海水中的存在 | 第13-15页 |
| 1．2 在海洋能流中的作用 | 第15-16页 |
| 1．3 在地球物理化学循环中的作用 | 第16页 |
| 1．4 对全球气候的影响 | 第16-17页 |
| 1．5 海洋病毒促进的种间遗传物质交换 | 第17页 |
| 1．6 海洋病毒与赤潮的关系 | 第17-18页 |
| 2 海洋病毒与海洋生物疾病 | 第18-19页 |
| 2．1 海洋生物病毒性疾病 | 第18页 |
| 2．2 病毒生态对海洋生物病毒性疾病的影响 | 第18页 |
| 2．3 病毒生态与海水养殖容纳量 | 第18-19页 |
| 2．4 海洋病毒变异与新病毒发生 | 第19页 |
| 3 海洋病毒研究技术 | 第19-22页 |
| 3．1 形态观察鉴定技术 | 第20页 |
| 3．2 定量技术 | 第20-21页 |
| 3．3 病毒分子生物学鉴定技术 | 第21页 |
| 3．4 病毒分离浓缩技术 | 第21-22页 |
| 4 海洋病毒领域的研究展望 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 第一章 病毒分离技术的建立及病毒的提纯和定量研究 | 第27-40页 |
| 第一节 一种从大体积海水中有效提取病毒颗粒的简易方法 | 第29-35页 |
| 1 材料和方法 | 第29-30页 |
| 1．1 材料 | 第29页 |
| 1．1．1 天然近岸海水样品 | 第29页 |
| 1．1．2 仪器设备 | 第29页 |
| 1．2 方法 | 第29-30页 |
| 1．2．1 水样中病毒的浓缩 | 第30页 |
| 1．2．2 超速离心沉淀病毒 | 第30页 |
| 1．2．3 负染和电镜观察 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-33页 |
| 2．1 不同方法对海水中病毒提取效果的比较 | 第31-32页 |
| 2．2 海水中的病毒粒子的形态多样性 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第二节 病毒的提纯和定量研究 | 第35-40页 |
| 1 材料和方法 | 第35-36页 |
| 1．1 实验材料 | 第35页 |
| 1．1．1 水样材料 | 第35页 |
| 1．1．2 仪器设备 | 第35页 |
| 1．2 实验方法 | 第35-36页 |
| 1．2．1 病毒的提取 | 第35-36页 |
| 1．2．2 超速离心沉淀病毒 | 第36页 |
| 1．2．3 负染和电镜观察 | 第36页 |
| 1．2．4 纯化病毒浓度的测定 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-38页 |
| 2．1 病毒的提纯 | 第36-37页 |
| 2．2 病毒的定量 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第二章 SYBR Green Ⅰ染色对海水中病毒的显微计数研究 | 第40-60页 |
| 1 材料和方法 | 第41-43页 |
| 1．1 材料 | 第41-42页 |
| 1．1．1 天然海水样品材料 | 第41页 |
| 1．1．2 生化试剂材料 | 第41页 |
| 1．1．3 荧光保护剂 | 第41页 |
| 1．1．4 仪器 | 第41-42页 |
| 1．2 方法 | 第42-43页 |
| 1．2．1 取样 | 第42页 |
| 1．2．2 滤器装配 | 第42页 |
| 1．2．3 染色剂工作液配制 | 第42页 |
| 1．2．4 荧光保护剂工作液配制 | 第42页 |
| 1．2．5 加样 | 第42页 |
| 1．2．6 抽滤 | 第42页 |
| 1．2．7 染色 | 第42-43页 |
| 1．2．8 制片 | 第43页 |
| 1．2．9 计数 | 第43页 |
| 1．2．10 计算 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-57页 |
| 2．1 荧光显微观察 | 第43-51页 |
| 2．2 图像分析 | 第51-52页 |
| 2．3 不同月份病毒数量变化分析 | 第52-53页 |
| 2．4 不同月份微生物数量变化分析 | 第53-54页 |
| 2．5 不同月份藻类等浮游生物量变化分析 | 第54页 |
| 2．6 海水中各种生物数量变化相关性分析 | 第54-56页 |
| 2．7 同一时间段内海水采集地点其它因子的变化 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 3．1 水体中病毒的计数方法 | 第57-58页 |
| 3．2 海水荧光显微计数研究 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 第三章 其它探索性研究:病毒基因组文库构建的初步研究 | 第60-69页 |
| 1 材料和方法 | 第60-65页 |
| 1．1 材料 | 第61页 |
| 1．1．1 病毒材料 | 第61页 |
| 1．1．2 酶及其他材料 | 第61页 |
| 1．2 方法 | 第61-65页 |
| 1．2．1 核酸提取 | 第61-62页 |
| 1．2．2 病毒DNA的处理 | 第62页 |
| 1．2．3 大肠杆菌DH-5α菌株增殖 | 第62页 |
| 1．2．4 pBlueseript Ⅱ KS质粒的制备 | 第62-63页 |
| 1．2．5 质粒DNA的酶切和去磷酸化 | 第63页 |
| 1．2．6 质粒和外源DNA片段的连接 | 第63-64页 |
| 1．2．7 大肠杆菌超级感受态细胞的制备 | 第64页 |
| 1．2．8 化学转化法转化 | 第64页 |
| 1．2．9 PCR法鉴定阳性克隆 | 第64-65页 |
| 1．2．10 酶切鉴定插入片钱 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| 2．1 酶切处理的质粒DNA | 第65-66页 |
| 2．2 感受态大肠杆菌的转化效率 | 第66-67页 |
| 2．3 PCR方法鉴定阳性克隆结果 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-69页 |
| 第四章 总结 | 第69-71页 |
| 附录:本论文所使用的试剂配制 | 第71-73页 |
