中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
第一部分 克莱博氏菌青霉素G酰化酶基因工程的研究 | 第14-40页 |
第一章克 莱博氏菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的表达 | 第14-29页 |
前言 | 第14-16页 |
1.材料与方法 | 第16-20页 |
1.1 材料 | 第16-17页 |
1.2 方法 | 第17-20页 |
2.结果与讨论 | 第20-25页 |
2.1 IPTG浓度对表达的影响 | 第20-21页 |
2.2 His-taggedKcPGA的纯化及动力学参数 | 第21-22页 |
2.3 纯化后的重组KcPGA的酶学性质 | 第22-25页 |
小结 | 第25-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
第二章 克莱博氏菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中表达条件的优化 | 第29-40页 |
前言 | 第29-30页 |
1.材料与方法 | 第30-31页 |
1.1 质粒与菌种 | 第30页 |
1.2 培养条件 | 第30页 |
1.3 样品处理 | 第30页 |
1.4 酶活测定 | 第30页 |
1.5 培养条件的优化 | 第30页 |
1.6 质粒稳定性 | 第30-31页 |
2.结果与讨论 | 第31-36页 |
2.1 培养基对KcPGA表达的影响 | 第31-32页 |
2.2 不同培养条件对KcPGA的影响 | 第32-33页 |
2.3 通气量对KcPGA表达的影响 | 第33-34页 |
2.4 碳源对KcPGA表达的影响 | 第34-35页 |
2.5 质粒稳定性 | 第35-36页 |
小结 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-40页 |
第二部分 那西肽产生菌Streptomyces.actuosus基因工程的研究 | 第40-67页 |
前言 | 第40-42页 |
第一章 质粒转化法构建的重组S.actuosus及其对那西肽产量的影响 | 第42-56页 |
1.材料与方法 | 第42-51页 |
1.1 材料 | 第42-43页 |
1.2 方法 | 第43-51页 |
2.结果与讨论 | 第51-56页 |
2.1 重组S.actuosus/pSEVhb的PCR鉴定 | 第51-52页 |
2.2 CO结合实验分析 | 第52页 |
2.3 总糖量的变化 | 第52-53页 |
2.4 限氧条件对VHb表达量的影响 | 第53页 |
2.5 限氧条件下VHb的表达对重组菌菌体生长的影响 | 第53-54页 |
2.6 VHb表达对那西肽发酵产量的影响 | 第54-55页 |
2.7 重组菌的稳定性 | 第55-56页 |
第二章 接合转移法构建的重组S.actuosus及其对那西肽产量的影响 | 第56-67页 |
1.材料与方法 | 第56-59页 |
1.1 材料 | 第56页 |
1.2 方法 | 第56-59页 |
2.结果与讨论 | 第59-64页 |
2.1 重组S.actuosus/pZP3的PCR鉴定 | 第59-60页 |
2.2 CO结合实验分析 | 第60-61页 |
2.3 总糖量的变化 | 第61页 |
2.4 限氧条件对VHb表达量的影响 | 第61页 |
2.5 限氧条件下VHb的表达对重组菌菌体生长的影响 | 第61-62页 |
2.6 VHb表达对那西肽发酵产量的影响 | 第62页 |
2.7 重组菌的稳定性 | 第62-64页 |
小结 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
综述 | 第68-88页 |
第一部分 青霉素G酰化酶的研究进展 | 第68-79页 |
第二部分 透明颤菌血红蛋白的研究进展 | 第79-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
攻读博士期间已发表和待发表的文章 | 第89-100页 |