| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 本研究创新点 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-35页 |
| 1、植物原生质体技术的发展 | 第10-14页 |
| 2、植物原生质体技术的研究意义 | 第14-16页 |
| ·细胞和遗传理论研究的好材料 | 第14-15页 |
| ·植物育种中的意义 | 第15页 |
| ·遗传转化的意义 | 第15-16页 |
| 3、以原生质体和细胞为受体的植物基因转化系统 | 第16-24页 |
| ·原生质体的遗传转化 | 第16-24页 |
| ·基因枪法 | 第18-19页 |
| ·电击法 | 第19页 |
| ·低压脉冲电泳介导基因转化 | 第19页 |
| ·PEG介导的转化法 | 第19-20页 |
| ·花粉管通道法 | 第20页 |
| ·微针注射法 | 第20-21页 |
| ·农杆菌介导的转化法 | 第21-24页 |
| 4.原生质体融合 | 第24-29页 |
| ·植物原生质体融合技术的发展 | 第24-28页 |
| ·水稻原生质体培养及融合的概况 | 第28-29页 |
| 5.野生稻的分类、分布、染色体及有利性状 | 第29-35页 |
| ·野生稻的分类与染色体数 | 第29-30页 |
| ·野生稻的分布与有利性状 | 第30-35页 |
| 第二部分 研究目的和设计思路 | 第35-38页 |
| 1.研究目的 | 第35页 |
| 2.设计思路 | 第35-38页 |
| 第三部分 材料与方法 | 第38-52页 |
| 1.实验材料 | 第38页 |
| 2.实验方法 | 第38-52页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导和继代 | 第38页 |
| ·胚性悬浮细胞系的建立 | 第38-39页 |
| ·原生质体的游离及培养 | 第39-40页 |
| ·疣粒野生稻与栽培稻的原生质体融合及培养 | 第40页 |
| ·融合体再生植株的形态观察： | 第40页 |
| ·融合体再生植株的RAPD分子检测： | 第40-41页 |
| ·融合体的毛细管电泳检测 | 第41-43页 |
| ·毛细管电泳的缓冲溶液 | 第41-42页 |
| ·缓冲溶液的选择 | 第41页 |
| ·缓冲液的浓度 | 第41-42页 |
| ·缓冲液pH对分离的影响 | 第42页 |
| ·毛细管电泳的温度效应 | 第42页 |
| ·水稻品种的毛细管电泳鉴定 | 第42-43页 |
| ·亲本和融合体再生植株后代的AFLP检测 | 第43-48页 |
| ·DNA提取 | 第43-44页 |
| ·基因组DNA限制性酶切 | 第44页 |
| ·接头的连接 | 第44页 |
| ·预扩增 | 第44页 |
| ·选择性扩增 | 第44-45页 |
| ·配制测序胶 | 第45页 |
| ·测序胶电泳 | 第45-48页 |
| ·测序胶银染 | 第48页 |
| ·来于野生稻的DNA片段克隆 | 第48-49页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备及质粒转化 | 第48-49页 |
| ·质粒抽提 | 第49页 |
| ·来于野生稻的DNA片段[MegaBACE1000测序仪]测序 | 第49-50页 |
| ·样品制备 | 第49页 |
| ·样品的纯化： | 第49-50页 |
| ·测序仪上样及测序 | 第50页 |
| ·序列比较和基因功能分析及染色体初定位 | 第50-51页 |
| ·融合体再生植株的抗白叶枯病鉴定 | 第51页 |
| ·融合体的再生植株的选育与利用 | 第51-52页 |
| 第四部分 结果和讨论 | 第52-95页 |
| 1.试验结果 | 第52-86页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导 | 第52页 |
| ·胚性悬浮细胞系的建立 | 第52-53页 |
| ·原生质体的培养 | 第53-55页 |
| ·原生质体的融合体系的建立 | 第55-58页 |
| ·原生质体的失活处理及融合 | 第55页 |
| ·融合体的筛选及培养 | 第55-58页 |
| ·融合体再生植株的形态观察 | 第58-59页 |
| ·融合体再生植株的RAPD分子检测 | 第59-61页 |
| ·融合体再生植株的毛细管电泳检测 | 第61-63页 |
| ·亲体和体细胞杂交后代的AFLP鉴定 | 第63-64页 |
| ·来于野生稻条带的DNA片段克隆测序 | 第64-76页 |
| ·融合再生植株的抗白叶枯病鉴定 | 第76-80页 |
| ·体细胞杂交再生植株后代的选育与利用。 | 第80-86页 |
| 2.讨论 | 第86-92页 |
| ·胚性愈伤的诱导与胚状体的形成 | 第86-87页 |
| ·水稻原生质体培养的技术体系 | 第87-88页 |
| ·原生质体融合 | 第88-89页 |
| ·细胞分裂与细胞分化 | 第89-90页 |
| ·体细胞杂交材料的利用 | 第90页 |
| ·亲本和体细胞后代的AFLP鉴定 | 第90-92页 |
| 3、进一步的研究展望 | 第92-95页 |
| 五、参考文献References | 第95-111页 |
| 附录1：缩写及中英文对照 | 第111-112页 |
| 附录2:在攻读博士学位期间发表撰写 的学术论文、著作和专利 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114页 |