| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 一、引言 | 第10-35页 |
| 1. 细胞周期及其调控机制 | 第10-18页 |
| ·细胞周期的驱动器cyclin-Cdk 复合物 | 第11-13页 |
| ·细胞周期的刹车Cdk 抑制蛋白(CKI) | 第13-15页 |
| ·细胞周期检查点 | 第15-18页 |
| 2. 细胞凋亡及其调控机制 | 第18-24页 |
| ·细胞凋亡的分子机制 | 第18-21页 |
| ·DNA 损伤引起细胞凋亡的分子机制 | 第21-24页 |
| 3. 细胞周期和细胞凋亡的互动关系 | 第24-33页 |
| ·pRB | 第25-27页 |
| ·p53 | 第27-30页 |
| ·p21 | 第30页 |
| ·survivin | 第30-33页 |
| 4 DNA 损伤药物是研究细胞周期和凋亡关系的工具 | 第33-35页 |
| 二、材料与方法 | 第35-43页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第35-36页 |
| 2. 细胞培养与同步化 | 第36页 |
| 3. 流式细胞分析 | 第36页 |
| 4. 细胞凋亡分析 | 第36-37页 |
| ·亚 G1 期 DNA 检测 | 第36-37页 |
| ·Annexin V-PI 双染实验 | 第37页 |
| ·M30-PI 双染实验 | 第37页 |
| ·DNA 片断化实验 | 第37页 |
| 5. DNA 损伤分析 | 第37-38页 |
| 6. SDS-PAGE 和 Western 印迹分析 | 第38-39页 |
| 7. Northern 印迹分析 | 第39页 |
| 8. cDNA 微阵列分析 | 第39-40页 |
| ·Atlas~(TM) Human Apoptosis Array | 第39页 |
| ·GeneChip(?) Human Genome U133 系列 | 第39-40页 |
| 9. 质粒的构建,转染与稳转细胞的建立 | 第40页 |
| ·pEGFP-cgTP53 | 第40页 |
| ·Sur-p | 第40页 |
| ·pEGFP-HIRB | 第40页 |
| 10. 萤光素酶检测 | 第40-41页 |
| 11. RNA 干扰实验 | 第41页 |
| ·survivin 的 RNA 干扰实验 | 第41页 |
| ·p53 的 RNA 干扰实验 | 第41页 |
| 12. mRNA 半衰期的测定 | 第41页 |
| 13. 染色质免疫沉淀 | 第41-42页 |
| 14 poly-A RNA 水平测定 | 第42-43页 |
| 三、实验结果 | 第43-71页 |
| 1. 雷公藤氯内酯醇诱导细胞周期依赖的HeLa 细胞凋亡 | 第43-53页 |
| ·HeLa 细胞中p53 的激活 | 第43-44页 |
| ·依赖于p53 的HeLa 细胞凋亡 | 第44-46页 |
| ·细胞周期依赖的凋亡 | 第46-47页 |
| ·早S 期细胞和中S 期细胞的基因表达谱差异 | 第47-51页 |
| ·survivin 在早S 期细胞和中S 期细胞中的表达差异 | 第51-52页 |
| ·p53 在不同细胞周期时段对survivin 的差异调控 | 第52-53页 |
| 2. 不依赖p53的pRB降解与雷公藤氯内酯醇诱导的胃癌细胞凋亡相关 | 第53-63页 |
| ·线粒体途径介导的AGS 细胞凋亡 | 第53-56页 |
| ·雷公藤氯内酯醇引起AGS细胞DNA损伤 | 第56-57页 |
| ·伴随细胞凋亡发生的pRB 降解 | 第57页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶介导的pRB 降解 | 第57-60页 |
| ·抑制pRB 降解或过表达pRB 可以降低AGS 细胞的凋亡程度 | 第60-61页 |
| ·不依赖于p53 的pRB 降解 | 第61-63页 |
| 3. 雷公藤氯内酯醇诱导的依赖于p53 的p21 表达下调 | 第63-71页 |
| ·p53 激活后AGS 细胞内p21 水平的下调 | 第63-64页 |
| ·AGS 细胞内p21 的转录抑制 | 第64-65页 |
| ·p53 与p21 启动子的结合被抑制 | 第65-66页 |
| ·p53 依赖的p21 下调 | 第66-67页 |
| ·AGS 细胞中p53 相关的基因表达谱 | 第67-71页 |
| 四、结论与讨论 | 第71-76页 |
| 1. 细胞周期依赖的细胞凋亡过程中p53 对survivin 基因的差异调控 | 第71-72页 |
| 2. pRB降解与细胞凋亡 | 第72-73页 |
| 3. p53 激活情况下p21 的表达下调 | 第73-74页 |
| 4. TC诱导下与p53相关的基因表达差异 | 第74页 |
| 5. TC的抗肿瘤机制 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-100页 |
| 发表文章目录 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
