| 第一章 文献综述 | 第1-44页 |
| ·蛋白复性的意义 | 第16-17页 |
| ·蛋白折叠的策略 | 第17页 |
| ·蛋白质复性技术 | 第17-28页 |
| ·传统的复性方法 | 第17-18页 |
| ·添加稀释复性法 | 第18-19页 |
| ·分子伴侣和折叠酶及人工分子伴侣辅助复性 | 第19-21页 |
| ·反胶束复性 | 第21页 |
| ·化学键合法 | 第21-22页 |
| ·梯度降低变性剂浓度的透析 | 第22页 |
| ·流动型反应器 | 第22页 |
| ·批式稀释复性法 | 第22-23页 |
| ·折叠液相色谱法(Refolding Liquid Chromatography) | 第23-27页 |
| ·蛋白质复性及同时纯化装置 | 第27-28页 |
| ·二硫键的正确对接 | 第28-30页 |
| ·朊病毒的研究进展 | 第30-32页 |
| ·朊病毒概述 | 第30页 |
| ·朊病毒的分离纯化 | 第30-32页 |
| ·重组人粒细胞集落刺激因子的研究进展 | 第32-35页 |
| ·G-CSF的蛋白质结构 | 第32页 |
| ·G-CSF的临床应用 | 第32-33页 |
| ·G-CSF的复性和纯化 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-44页 |
| 第二章 HPHIC纯化并同时复性E.coli表达的rbPrP(104一242) | 第44-59页 |
| ·前言 | 第44-47页 |
| ·蛋白分子中的疏水作用力 | 第44-45页 |
| ·疏水色谱的折叠机理 | 第45-46页 |
| ·HPHIC法折叠蛋白与“人工分子伴侣” | 第46-47页 |
| ·实验部分 | 第47-50页 |
| ·仪器与试剂 | 第47-49页 |
| ·rbPrP(104-242)在大肠杆菌中的高效表达 | 第49页 |
| ·rbPrP(104-242)包涵体的制备和溶解 | 第49-50页 |
| ·用HPHIC复性并同时纯化rbPrP(104-242) | 第50页 |
| ·分析方法 | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-56页 |
| ·流动相盐种类 | 第51页 |
| ·固定相的影响 | 第51-54页 |
| ·流动相pH的影响 | 第54页 |
| ·梯度的影响 | 第54页 |
| ·rbPrP(104-242)的纯度和质量回收率 | 第54-55页 |
| ·rbPrP(104-242)的CD表征 | 第55-56页 |
| ·结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第三章 SEC复性E.coli表达的rhG-CSF | 第59-85页 |
| ·前言 | 第59-62页 |
| ·实验方法 | 第62-67页 |
| ·仪器和试剂 | 第62-63页 |
| ·rhG-CSF的表达 | 第63-64页 |
| ·rhG-CSF包涵体的制备和溶解 | 第64-65页 |
| ·用SEC复性rhG-CSF | 第65-66页 |
| ·分析方法 | 第66-67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-82页 |
| ·二硫键对接动力学影响 | 第67-69页 |
| ·脲浓度对rhG-CSF复性的影响 | 第69-70页 |
| ·流动相pH对rhG-CSF复性的影响 | 第70-71页 |
| ·流动相流速对rhG-CSF复性的影响 | 第71-72页 |
| ·谷胱甘肽浓度对rhG-CSF复性的影响 | 第72-74页 |
| ·甘油对rhG-CSF复性的影响 | 第74-75页 |
| ·用SEC复性rhG-CSF | 第75-77页 |
| ·脲梯度SEC复性rhG-CSF | 第77-78页 |
| ·脲梯度长度的选择 | 第78-79页 |
| ·最终脲浓度对rhG-CSF复性的影响 | 第79-81页 |
| ·脲梯度SEC和普通SEC复性rhG-CSF的比较 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第四章 SAX复性并同时纯化E.coli表达的rhG-CSF | 第85-103页 |
| ·前言 | 第85-88页 |
| ·实验部分 | 第88-90页 |
| ·仪器和试剂 | 第88-89页 |
| ·rhG-CSF的表达 | 第89页 |
| ·rhG-CSF包涵体的制备和溶解 | 第89页 |
| ·rhG-CSF的复性 | 第89-90页 |
| ·分析方法 | 第90页 |
| ·结果与讨论 | 第90-100页 |
| ·用SAX复性及同时纯化rhG-CSF | 第90-92页 |
| ·脲浓度对rhG-CSF复性的影响 | 第92-93页 |
| ·流动相pH对rhG-CSF复性的影响 | 第93-94页 |
| ·流速对rhG-CSF复性的影响 | 第94-95页 |
| ·谷胱甘肽浓度对rhG-CSF复性的影响 | 第95-98页 |
| ·SAX法和稀释法复性rhG-CSF的比较 | 第98-100页 |
| ·SAX复性过程中rhG-CSF的质量损失 | 第100页 |
| ·小结 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-103页 |
| 第五章 WAX色谱饼复性并同时纯化E.coli表达的rhG-CSF | 第103-115页 |
| ·前言 | 第103-104页 |
| ·实验部分 | 第104-106页 |
| ·仪器和试剂 | 第104-105页 |
| ·rhG-CSF的表达 | 第105页 |
| ·rhG-CSF包涵体的制备和溶解 | 第105页 |
| ·用WAX色谱饼复性rhG-CSF | 第105页 |
| ·分析方法 | 第105-106页 |
| ·结果与讨论 | 第106-113页 |
| ·脉浓度 | 第106-107页 |
| ·缓冲液 | 第107-108页 |
| ·洗脱剂的选择 | 第108-109页 |
| ·GSH/GSSG比例 | 第109-111页 |
| ·流速 | 第111页 |
| ·pH值 | 第111-113页 |
| ·rhG-CSF的纯度和质量回收率 | 第113页 |
| ·小结 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-115页 |
| 第六章 IMAC复性并同时纯化E.coli表达的rhG-CSF | 第115-132页 |
| ·前言 | 第115-117页 |
| ·实验部分 | 第117-120页 |
| ·仪器和试剂 | 第117-118页 |
| ·rhG-CSF的表达 | 第118页 |
| ·rhG-CSF包涵体的制备和溶解 | 第118页 |
| ·rhG-CSF的IMAC的复性 | 第118-120页 |
| ·分析方法 | 第120页 |
| ·结果和讨论 | 第120-129页 |
| ·用IMAC复性及同时纯化rhG-CSF | 第120-122页 |
| ·脲浓度 | 第122-123页 |
| ·缓冲液种类 | 第123-124页 |
| ·流动相pH | 第124-125页 |
| ·甘油浓度 | 第125-126页 |
| ·IMAC法和稀释法复性rhG-CSF的比较 | 第126-129页 |
| ·小结 | 第129页 |
| 参考文献 | 第129-132页 |
| 第七章 HPHIC复性并同时纯化rhG-CSF | 第132-144页 |
| ·前言 | 第132页 |
| ·实验部分 | 第132-133页 |
| ·仪器和试剂 | 第132页 |
| ·rhG-CSF的表达 | 第132页 |
| ·rhG-CSF包涵体的制备和溶解 | 第132-133页 |
| ·用HPHIC色谱饼复性并同时纯化rhG-CSF | 第133页 |
| ·分析方法 | 第133页 |
| ·结果与讨论 | 第133-142页 |
| ·用HPHIC复性及同时纯化rhG-CSF | 第133-134页 |
| ·盐种类 | 第134-135页 |
| ·起始硫酸铵浓度的影响 | 第135-136页 |
| ·流动相pH | 第136-137页 |
| ·缓冲液种类 | 第137-138页 |
| ·流速 | 第138-139页 |
| ·固定相种类 | 第139-141页 |
| ·rhG-CSF的纯度和质量回收率 | 第141页 |
| ·HPHIC复性过程中rhG-CSF的质量损失 | 第141-142页 |
| ·结论 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-144页 |
| 第八章 HPHIC复性rhG-CSF工艺的放大 | 第144-155页 |
| ·前言 | 第144页 |
| ·实验部分 | 第144-146页 |
| ·仪器和试剂 | 第144-145页 |
| ·rhG-CSF的表达 | 第145页 |
| ·rhG-CSF包涵体的制备和溶解 | 第145页 |
| ·用HPHIC色谱饼在工业规模复性并同时纯化rhG-CSF | 第145-146页 |
| ·分析方法 | 第146页 |
| ·结果与讨论 | 第146-153页 |
| ·流速 | 第146-148页 |
| ·起始硫酸铵浓度 | 第148-149页 |
| ·梯度时间 | 第149-150页 |
| ·进样方式 | 第150-152页 |
| ·用10×200mm I.D.HPHIC包谱饼大规模复性rhG-CSF | 第152-153页 |
| ·小结 | 第153-154页 |
| 参考文献 | 第154-155页 |
| 总结 | 第155-159页 |
| 在读学位期间发表论文 | 第159-161页 |
| 致谢 | 第161页 |
