致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
缩略语 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述与实验设计方案 | 第11-34页 |
第一章 RNA干扰的研究进展 | 第12-23页 |
1 RNAi的发现 | 第12-13页 |
2 参与RNAi途径的主要成员 | 第13-16页 |
·dsRNA和siRNA | 第13-14页 |
·Dicer酶 | 第14-15页 |
·RNA诱导的沉默复合物(RISC) | 第15-16页 |
·RdRP(RNA-dependent RNA polymerase) | 第16页 |
3 RNAi的作用机制 | 第16-19页 |
·RNA阀值模型 | 第16-17页 |
·异常RNA模型 | 第17页 |
·生化开关模型 | 第17页 |
·线虫,真菌和植物中的RdRP依赖的RNAi途径假说 | 第17-18页 |
·非RdRP依赖的RNAi途径假说 | 第18-19页 |
4 siRNA、stRNA和microRNA | 第19-20页 |
5 RNAi的优越性及其应用前景 | 第20-23页 |
·RNAi与基因功能的研究 | 第21页 |
·RNAi在治疗人体疾病中的尝试 | 第21-23页 |
第二章 杆状病毒复制的分子生物学 | 第23-31页 |
1 杆状病毒及其分类地位 | 第23页 |
2 杆状病毒的发育循环 | 第23-24页 |
3 杆状病毒基因组DNA复制的机理 | 第24-28页 |
·杆状病毒编码的类繁殖细胞核抗原的蛋白ETL | 第25页 |
·杆状病毒编码的DNA解旋酶基因 | 第25-26页 |
·杆状病毒编码的DNA聚合酶基因 | 第26-27页 |
·病毒DNA复制相关因子的鉴定 | 第27-28页 |
4 杆状病毒DNA复制模型 | 第28-31页 |
第三章 实验设计方案 | 第31-34页 |
1 本实验的目的和意义 | 第31-32页 |
2 本研究的主要内容 | 第32页 |
3 本研究所要解决的关键性问题 | 第32-33页 |
4 实验流程图 | 第33-34页 |
第二部分 实验内容 | 第34-65页 |
第四章 dsRNA的设计与合成 | 第35-42页 |
·材料和试剂 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-40页 |
·细胞培养与冻存、复苏 | 第36-37页 |
·病毒培养 | 第37页 |
·病毒BmNPV DNA的提取 | 第37页 |
·dsRNA的合成 | 第37-40页 |
·结果与分析 | 第40-42页 |
第五章 dsRNA对BmNPV抑制作用的研究 | 第42-56页 |
·材料与试剂 | 第42-44页 |
·实验方法 | 第44-49页 |
·细胞培养 | 第44页 |
·dsRNA转染家蚕细胞BmN实验 | 第44页 |
·病毒滴度的测定 | 第44页 |
·DNA斑点杂交鉴定 | 第44-47页 |
·RT-PCR鉴定 | 第47-49页 |
·实验结果 | 第49-53页 |
·dsRNA对BmNPV复制的抑制作用 | 第49-50页 |
·DNA斑点杂交结果 | 第50-52页 |
·RT-PCR鉴定目的基因的表达水平 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-56页 |
第六章 转染试剂细胞毒性和转染效率的研究 | 第56-61页 |
·材料与试剂 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-58页 |
·转染试剂的细胞毒性检测(MTT法) | 第57页 |
·转染效率的测定 | 第57-58页 |
·实验结果 | 第58-59页 |
·转染试剂的细胞毒性 | 第58-59页 |
·dsRNA的转染效率 | 第59页 |
·讨论 | 第59-61页 |
第七章 dsRNA在家蚕细胞内分布情况的初步研究 | 第61-65页 |
·材料与试剂 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-62页 |
·结果与讨论 | 第62-65页 |
结论 | 第65-66页 |
英文摘要 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |