缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一部分 文献综述和立题意义 | 第11-25页 |
Ⅰ 文献综述:BAC文库构建的研究进展 | 第11-22页 |
·大片段插入文库的比较 | 第12-15页 |
·λ噬菌体文库 | 第12页 |
·Cosmid(柯斯质粒)文库 | 第12-13页 |
·YAC(酵母人工染色体)文库 | 第13-14页 |
·细菌寄主体系的大片段克隆系统 | 第14-15页 |
·BAC文库的优点 | 第15页 |
·BAC发展简史 | 第15-19页 |
·小麦BAC文库构建的研究进展 | 第19-22页 |
Ⅱ 立题意义及技术路线 | 第22-25页 |
·立题意义 | 第22-23页 |
·技术路线 | 第23-25页 |
第二部分 矮败-中国春小麦品系BAC文库的构建与筛选 | 第25-60页 |
Ⅰ 材料与方法 | 第26-39页 |
材料 | 第26-27页 |
方法 | 第27-39页 |
1 矮败-中国春小麦品系BAC文库的构建 | 第27-34页 |
·高分子量核DNA的制备 | 第27-29页 |
·细胞核的分离 | 第27-28页 |
·胶片的制备 | 第28页 |
·胶片质量的检测 | 第28-29页 |
·部分酶切最佳酶用量的确定 | 第29-30页 |
·大片段DNA的大量酶切 | 第30-31页 |
·酶切DNA片段的第一次选择 | 第31页 |
·大片段DNA的第二次选择 | 第31-33页 |
·大片段DNA与载体DNA的连接 | 第33页 |
·连接产物的转化 | 第33-34页 |
·重组克隆的分析 | 第34页 |
2 矮败-中国春小麦品系BAC混合池的构建 | 第34-37页 |
·获得BAC混合池适宜BAC克隆数的转化复苏液用量的确定 | 第34-35页 |
·BAC混合池的大量制备与保存 | 第35页 |
·含有水稻BAC克隆的BAC混合池的制备 | 第35页 |
·BAC克隆及BAC混合池的稳定性检测 | 第35-37页 |
·BAC单克隆稳定性的检测 | 第35-36页 |
·BAC混合池的稳定性检测 | 第36-37页 |
3 矮败-中国春小麦品系BAC文库的筛选及阳性BAC单克隆的鉴定 | 第37-39页 |
·用PCR方法对BAC文库的筛选 | 第37-38页 |
·阳性BAC单克隆的鉴定 | 第38-39页 |
·BAC超级混合池的筛选 | 第38-39页 |
·阳性BAC单克隆的酶切鉴定 | 第39页 |
Ⅱ 结果与分析 | 第39-53页 |
·高效BAC文库构建技术体系的建立 | 第39-43页 |
·矮败-中国春小麦品系中矮秆材料高质量大片段DNA的制备 | 第39页 |
·部分酶切确定最佳酶用量 | 第39-41页 |
·酶切后DNA片段的二次选择 | 第41-42页 |
·大片段DNA的连接与转化 | 第42-43页 |
·矮败-中国春小麦品系BAC文库的构建及特性 | 第43-47页 |
·大片段DNA与载体DNA的大量连接、转化及BAC混合池的构建 | 第43-44页 |
·BAC克隆平均插入片段的估测 | 第44页 |
·BAC克隆稳定性检测 | 第44-45页 |
·BAC克隆在BAC混合池中的稳定性检测 | 第45-47页 |
·BAC混合池的筛选及阳性克隆的鉴定 | 第47-53页 |
·与Rht10共分离的PCR标记的验证 | 第47-48页 |
·PCR方法筛选BAC混合池理想反应条件的建立 | 第48-49页 |
·BAC混合池的初步筛选及阳性克隆的获得 | 第49-51页 |
·阳性克隆的初步鉴定 | 第51-53页 |
Ⅲ 讨论 | 第53-58页 |
·高效BAC文库构建体系的建立 | 第53-54页 |
·BAC混合池可有效的用于目标基因的图位克隆 | 第54-55页 |
·BAC克隆在BAC混合池中的稳定性 | 第55-56页 |
·用PCR的方法筛选BAC混合池是可行的 | 第56页 |
·矮败-中国春小麦品系BAC文库的应用前景 | 第56-58页 |
Ⅳ 结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-75页 |
附录 | 第75-80页 |
致谢 | 第80页 |