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矮败—中国春小麦品系BAC文库的构建与筛选

缩略词表第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一部分 文献综述和立题意义第11-25页
 Ⅰ 文献综述:BAC文库构建的研究进展第11-22页
   ·大片段插入文库的比较第12-15页
     ·λ噬菌体文库第12页
     ·Cosmid(柯斯质粒)文库第12-13页
     ·YAC(酵母人工染色体)文库第13-14页
     ·细菌寄主体系的大片段克隆系统第14-15页
   ·BAC文库的优点第15页
   ·BAC发展简史第15-19页
   ·小麦BAC文库构建的研究进展第19-22页
 Ⅱ 立题意义及技术路线第22-25页
   ·立题意义第22-23页
   ·技术路线第23-25页
第二部分 矮败-中国春小麦品系BAC文库的构建与筛选第25-60页
 Ⅰ 材料与方法第26-39页
  材料第26-27页
  方法第27-39页
   1 矮败-中国春小麦品系BAC文库的构建第27-34页
   ·高分子量核DNA的制备第27-29页
     ·细胞核的分离第27-28页
     ·胶片的制备第28页
     ·胶片质量的检测第28-29页
   ·部分酶切最佳酶用量的确定第29-30页
   ·大片段DNA的大量酶切第30-31页
   ·酶切DNA片段的第一次选择第31页
   ·大片段DNA的第二次选择第31-33页
   ·大片段DNA与载体DNA的连接第33页
   ·连接产物的转化第33-34页
   ·重组克隆的分析第34页
   2 矮败-中国春小麦品系BAC混合池的构建第34-37页
   ·获得BAC混合池适宜BAC克隆数的转化复苏液用量的确定第34-35页
   ·BAC混合池的大量制备与保存第35页
   ·含有水稻BAC克隆的BAC混合池的制备第35页
   ·BAC克隆及BAC混合池的稳定性检测第35-37页
     ·BAC单克隆稳定性的检测第35-36页
     ·BAC混合池的稳定性检测第36-37页
   3 矮败-中国春小麦品系BAC文库的筛选及阳性BAC单克隆的鉴定第37-39页
   ·用PCR方法对BAC文库的筛选第37-38页
   ·阳性BAC单克隆的鉴定第38-39页
     ·BAC超级混合池的筛选第38-39页
     ·阳性BAC单克隆的酶切鉴定第39页
 Ⅱ 结果与分析第39-53页
   ·高效BAC文库构建技术体系的建立第39-43页
     ·矮败-中国春小麦品系中矮秆材料高质量大片段DNA的制备第39页
     ·部分酶切确定最佳酶用量第39-41页
     ·酶切后DNA片段的二次选择第41-42页
     ·大片段DNA的连接与转化第42-43页
   ·矮败-中国春小麦品系BAC文库的构建及特性第43-47页
     ·大片段DNA与载体DNA的大量连接、转化及BAC混合池的构建第43-44页
     ·BAC克隆平均插入片段的估测第44页
     ·BAC克隆稳定性检测第44-45页
     ·BAC克隆在BAC混合池中的稳定性检测第45-47页
   ·BAC混合池的筛选及阳性克隆的鉴定第47-53页
     ·与Rht10共分离的PCR标记的验证第47-48页
     ·PCR方法筛选BAC混合池理想反应条件的建立第48-49页
     ·BAC混合池的初步筛选及阳性克隆的获得第49-51页
     ·阳性克隆的初步鉴定第51-53页
 Ⅲ 讨论第53-58页
   ·高效BAC文库构建体系的建立第53-54页
   ·BAC混合池可有效的用于目标基因的图位克隆第54-55页
   ·BAC克隆在BAC混合池中的稳定性第55-56页
   ·用PCR的方法筛选BAC混合池是可行的第56页
   ·矮败-中国春小麦品系BAC文库的应用前景第56-58页
 Ⅳ 结论第58-60页
参考文献第60-75页
附录第75-80页
致谢第80页

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