中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第14-44页 |
·研究目的及意义 | 第14页 |
·小冰麦异附加系TAI-27遗传背景 | 第14-15页 |
·染色体微切割、微分离和微克隆技术的研究 | 第15-24页 |
·染色体微切割、微分离和微克隆技术研究进展 | 第15-17页 |
·染色体显微切割及微克隆技术流程 | 第17-19页 |
·染色体微克隆文库分析 | 第19-21页 |
·染色体微切割和微克隆技术的应用 | 第21-23页 |
·问题与展望 | 第23-24页 |
·染色体表达序列分离和EST研究进展 | 第24-31页 |
·微分离特定染色体表达序列分离 | 第24-27页 |
·EST研究进展 | 第27-30页 |
·微分离特定染色体上分离表达序列的应用前景 | 第30-31页 |
·差减抑制杂交技术发展与应用 | 第31-36页 |
·植物R基因的研究进展 | 第36-43页 |
·R基因的克隆 | 第36-37页 |
·R蛋白的结构特征 | 第37-38页 |
·R基因的类型 | 第38-40页 |
·利用同源序列克隆抗病基因 | 第40-43页 |
·研究内容 | 第43-44页 |
2 小冰麦异附加系TAI-27附加染色体文库构建 | 第44-58页 |
·材料和方法 | 第44-52页 |
·材料 | 第44页 |
·染色体标本制备 | 第44页 |
·附加小染色体分离 | 第44-45页 |
·Sau3A接头(linker adaptor)的制备及染色体片段的体外扩增 | 第45-46页 |
·基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
·Southern杂交分析 | 第47-49页 |
·小冰麦异附加系TAI-27附加小染色体文库构建及分析 | 第49-52页 |
·结果与分析 | 第52-56页 |
·TAI-27中附加染色体的分离 | 第52-53页 |
·染色体的LA-PCR扩增和Southern杂交 | 第53-55页 |
·PCR产物克隆和染色体DNA文库特性分析 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
·染色体DNA文库的质量 | 第56-57页 |
·染色体DNA文库的应用 | 第57-58页 |
3 小冰麦异附加系TAI-27附加染色体表达序列分离 | 第58-70页 |
·材料和方法 | 第58-61页 |
·植物材料及染色体标本制备 | 第58页 |
·使用引物与接头 | 第58页 |
·TAI-27中附加染色体分离及扩增 | 第58页 |
·附加染色体杂交前准备 | 第58-59页 |
·中间偃麦草及3B-2 cDNA合成及杂交前准备 | 第59-60页 |
·分离附加染色体上表达序列 | 第60页 |
·PCR扩增 | 第60-61页 |
·染色体DNA表达序列筛选 | 第61页 |
·扩增产物及克隆片段的PCR扩增鉴定 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-67页 |
·技术体系的确定 | 第61-63页 |
·附加染色体上表达序列片段的扩增及克隆 | 第63页 |
·扩增产物及克隆片段来源鉴定 | 第63-65页 |
·附加染色体表达序列分析 | 第65-67页 |
·染色体表达序列遗传背景分析 | 第67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
4 小冰麦异附加系TAI-27差减文库构建及差异表达基因分析 | 第70-81页 |
·材料和方法 | 第70-75页 |
·材料 | 第70页 |
·田间播种、接种、鉴定及取材 | 第70页 |
·差减杂交和抑制PCR | 第70-73页 |
·差减文库构建 | 第73页 |
·差示筛选差减文库 | 第73页 |
·反Northern分析差异表达基因遗传背景 | 第73-75页 |
·差异表达基因染色体定位 | 第75页 |
·结果与分析 | 第75-79页 |
·蚜虫饲喂BYDV后TAI-27植株生长情况 | 第75页 |
·差减文库构建 | 第75-76页 |
·差示筛选差减文库 | 第76-77页 |
·反Northern分析差异表达基因遗传背景 | 第77-78页 |
·差异表达基因的染色体定位 | 第78-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
5 抗病同源片段克隆 | 第81-93页 |
·材料与方法 | 第81-83页 |
·材料 | 第81页 |
·模板准备 | 第81页 |
·小冰麦异附加系TAI-27中附加单染色体DNA的获得 | 第81页 |
·引物设计和PCR扩增 | 第81页 |
·PCR产物克隆、测序及序列比较 | 第81页 |
·Southern杂交和Northern杂交 | 第81-83页 |
·抗病同源序列分析 | 第83页 |
·结果与分析 | 第83-91页 |
·NBS-LRR类R基因同源序列的扩增与鉴定 | 第83-85页 |
·R基因同源序列的同源比较和分类 | 第85-90页 |
·异附加染色体上抗病同源片段ACR1的Southern杂交及特异性分析 | 第90页 |
·异附加染色体上抗病同源片段ACR1的表达 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-93页 |
结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-112页 |
发表论文 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
缩写符号 | 第114-115页 |
GenBank注册的序列 | 第115-119页 |