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小冰麦异附加系TAI-27中异附加中间偃麦草染色体文库构建及抗病基因研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第14-44页
   ·研究目的及意义第14页
   ·小冰麦异附加系TAI-27遗传背景第14-15页
   ·染色体微切割、微分离和微克隆技术的研究第15-24页
     ·染色体微切割、微分离和微克隆技术研究进展第15-17页
     ·染色体显微切割及微克隆技术流程第17-19页
     ·染色体微克隆文库分析第19-21页
     ·染色体微切割和微克隆技术的应用第21-23页
     ·问题与展望第23-24页
   ·染色体表达序列分离和EST研究进展第24-31页
     ·微分离特定染色体表达序列分离第24-27页
     ·EST研究进展第27-30页
     ·微分离特定染色体上分离表达序列的应用前景第30-31页
   ·差减抑制杂交技术发展与应用第31-36页
   ·植物R基因的研究进展第36-43页
     ·R基因的克隆第36-37页
     ·R蛋白的结构特征第37-38页
     ·R基因的类型第38-40页
     ·利用同源序列克隆抗病基因第40-43页
   ·研究内容第43-44页
2 小冰麦异附加系TAI-27附加染色体文库构建第44-58页
   ·材料和方法第44-52页
     ·材料第44页
     ·染色体标本制备第44页
     ·附加小染色体分离第44-45页
     ·Sau3A接头(linker adaptor)的制备及染色体片段的体外扩增第45-46页
     ·基因组DNA的提取第46-47页
     ·Southern杂交分析第47-49页
     ·小冰麦异附加系TAI-27附加小染色体文库构建及分析第49-52页
   ·结果与分析第52-56页
     ·TAI-27中附加染色体的分离第52-53页
     ·染色体的LA-PCR扩增和Southern杂交第53-55页
     ·PCR产物克隆和染色体DNA文库特性分析第55-56页
   ·讨论第56-58页
     ·染色体DNA文库的质量第56-57页
     ·染色体DNA文库的应用第57-58页
3 小冰麦异附加系TAI-27附加染色体表达序列分离第58-70页
   ·材料和方法第58-61页
     ·植物材料及染色体标本制备第58页
     ·使用引物与接头第58页
     ·TAI-27中附加染色体分离及扩增第58页
     ·附加染色体杂交前准备第58-59页
     ·中间偃麦草及3B-2 cDNA合成及杂交前准备第59-60页
     ·分离附加染色体上表达序列第60页
     ·PCR扩增第60-61页
     ·染色体DNA表达序列筛选第61页
     ·扩增产物及克隆片段的PCR扩增鉴定第61页
   ·结果与分析第61-67页
     ·技术体系的确定第61-63页
     ·附加染色体上表达序列片段的扩增及克隆第63页
     ·扩增产物及克隆片段来源鉴定第63-65页
     ·附加染色体表达序列分析第65-67页
     ·染色体表达序列遗传背景分析第67页
   ·讨论第67-70页
4 小冰麦异附加系TAI-27差减文库构建及差异表达基因分析第70-81页
   ·材料和方法第70-75页
     ·材料第70页
     ·田间播种、接种、鉴定及取材第70页
     ·差减杂交和抑制PCR第70-73页
     ·差减文库构建第73页
     ·差示筛选差减文库第73页
     ·反Northern分析差异表达基因遗传背景第73-75页
     ·差异表达基因染色体定位第75页
   ·结果与分析第75-79页
     ·蚜虫饲喂BYDV后TAI-27植株生长情况第75页
     ·差减文库构建第75-76页
     ·差示筛选差减文库第76-77页
     ·反Northern分析差异表达基因遗传背景第77-78页
     ·差异表达基因的染色体定位第78-79页
   ·讨论第79-81页
5 抗病同源片段克隆第81-93页
   ·材料与方法第81-83页
     ·材料第81页
     ·模板准备第81页
     ·小冰麦异附加系TAI-27中附加单染色体DNA的获得第81页
     ·引物设计和PCR扩增第81页
     ·PCR产物克隆、测序及序列比较第81页
     ·Southern杂交和Northern杂交第81-83页
     ·抗病同源序列分析第83页
   ·结果与分析第83-91页
     ·NBS-LRR类R基因同源序列的扩增与鉴定第83-85页
     ·R基因同源序列的同源比较和分类第85-90页
     ·异附加染色体上抗病同源片段ACR1的Southern杂交及特异性分析第90页
     ·异附加染色体上抗病同源片段ACR1的表达第90-91页
   ·讨论第91-93页
结论第93-94页
参考文献第94-112页
发表论文第112-113页
致谢第113-114页
缩写符号第114-115页
GenBank注册的序列第115-119页

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